Способ определения активности -зависимых дегидрогеназ

Номер патента: 1190263

Авторы: Петушков, Родионова, Фиш, Шефер

ZIP архив

Текст

)4 (3 ГОСУДАРС ПО ДЕЛАМ ЯИСАНИЕ ИЗОБРЕТ зависиакцепто еесь,соде р к сидо редукщнм изме АН СССР ер, ающиия точности спо. птор электронов в т. 270,АДН в кон.тивность опдопервого по. ННЫЙ НОМИТЕТ СССРОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(71) Институт биофизики СО(56) Доклады АН СССР, 198Юф 5, с, 1239-1242. 54) (57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВ НОСТИ ХАДН-ЗАВИСИМЫХ ДЕГИДРОГЕНАЗ путем добавления ХАДН.гидрогеназы, ее субстратанов н ХАДН в реакционную сщую люциферузу 1)АДН:ФМНтазу и их субстраты,с последую нием биолюминесценции,о т л с я тем, что, с целью повышенысоба,используют субстратакцнасыщающей концентрации, ацентрации 10 ф М и ределяют по константе псе рядка спада биолюминесценц119026 ь/и ЧК= Составитель Н. ГуляеваТехред М.Гергель Корректор Т, Колб Редактор Е. Папп Заказ 6972/46 Тираж 896 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж - 35, Раушская наб д, 4/5Филиал ППП "Патент", г, Ужгород, ул. Проектная, 4 Изобретенйе относится к биохимии и мо-. жет быть использовано в технической микробиологии и медицинской диагностике и предназначено для измерения микроколичеств ХАДН. зависимых дегидрогеназ. 5Цель изобретения - повышение точности способа.П р и м е р. В качестве ХАДН-зависимой дегидрогеназы использовали лактатдегидрогеназу из сердечной мьшщы свиньи с удель ной активностью 200 ер/мг (Кеапа 1 - Венгрия). К образцу, содержащему 50 мкл миристинового альдегида, 1,0910М; 50 мкл флавинмононуклеотида, 2,510М; частично очищенный препарат люцифераэы из Вепес 1 еа 15 Ьагчеу 1, содержащей и ХАДН ФМН.оксидоредуктазу (активность люциферазы 7 1 О кВ с , активность ХАДН ФМИ.оксидоредуктазы - 0,01 мкмоль/мл) - 30 мкг; 100 мкл пирувата, 8 10" М; 0,1 мкг лактадегидрогеназы; 460 мкл 0,1 М; К, Ха.фосфатного буфера, рН - 7,0 добавляли 100 мкл ХАДН 1,210М, Из. 3 гмерение проводили в термостатируемой кю. вете при 30 С.Для учета неспецифического окисления ХАДН измерения, аналогичные описанным выше, проводилй в отсутствии 1 ЧАДН.зависимой дегидрогеназы. Кинетика уменьшения биолюминесценции в присутствии и отсутст. вии лактагидрогенаэы соответствовала псев. допервому порядку. Констанку лсевдоперво. го порядка спада биолюминесценции рассчитывали по формуле Константы спада биолюминесценции в при. сутствии и отсутствии ХАДН составляют 15,8 мини 0,22 минсоответственно.Аналогично были посчитаны константы спада и для других концентраций лактатдегид. рогеназы, Константа спада К прямо пропорциональна количеству лактатдегидрогеназы.

Смотреть

Заявка

3733406, 16.02.1984

ИНСТИТУТ БИОФИЗИКИ СО АН СССР

ПЕТУШКОВ ВАЛЕНТИН НИКОЛАЕВИЧ, ШЕФЕР ЛИНА ПЕТРОВНА, РОДИОНОВА НАТАЛЬЯ СЕРГЕЕВНА, ФИШ АБРАМ МИХАЙЛОВИЧ

МПК / Метки

МПК: G01N 33/48

Метки: активности, дегидрогеназ, зависимых

Опубликовано: 07.11.1985

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-1190263-sposob-opredeleniya-aktivnosti-zavisimykh-degidrogenaz.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения активности -зависимых дегидрогеназ</a>

Похожие патенты