Чупырина

Номер патента: 1763488

Опубликовано: 23.09.1992

Авторы: Вотрин, Кирзон, Пчелинцева, Романцев, Соколова, Ткачева, Ходарев, Чупырина

МПК: C12N 9/16, G01N 27/26

Метки: зависимой, ингибитора, эндонуклеазы

...концентрации сульфата аммония до 70 приводило к снижению выхода ингибитора на 10-15 и снижению стабильности препарата. Повышение концентрации сульфата аммония до 85 фи 90 фне приводило к изменению результатов,Осадок, полученный после высаливания, растворяли в минимальном объеме 10 вМ трис-НС, рН 7,4 - 7,6 и обессоливали на колонках с сефадексом 6-25. Обессоленный образец, содержащий 1 - 1,5 мг белка в 1-2 мл, наносили на катионообменную колонку "Мопо Я" (система РР С, Фармация, Швеция), предварительно уравновешенную тем же буфером. Скорость нанесения составляла 0,1-0,2 мл/мин. После нанесения образца колонку промывали 5 - 7 мл того же буфера со скоростью 1 мл/мин, после чегоначинали элюцию сорбированных белков линейным градиентом йаС...

Номер патента: 1541514

Опубликовано: 07.02.1990

Авторы: Александрова, Вотрин, Газдаров, Коромыслов, Ходарев, Чупырина

МПК: G01N 33/48

Метки: активности, зависимой, лимфоцитов, эндонуклеазы

...3 ммольМрСЭ.; 1,2 моль сахарозы) в соотноше -нии 1:3 и центрифугируют 1 О мин,1500-2000 р, при 4 Г,Осадки ядер суспендируют в минимальном объеме ТМС,9 беэ тритонаХ, затем доводят объем ТМС,9до 10-12 мл и суспенэию центрифугируют 1500-2000 я при 4 С 10 мин. Осадки поданным световоймикроскопии представляют собои интактные клеточныеядра, свободные от цитоплаэматических загрязнений, Выход ядер 0,3 мгДНК/10 лимфоцитов,8Для определения активности Са/Мрзависимой зндонуклеазы клеточные ядра суспендируют в инкубационной средеТМСС (50 ммоль трис-НС 1, рН 8,3;10 ммоль МрС:.2, 1 ммоль СаС 1;0,25 моль сахарозы) до концентрации1 мг/мл по ДНК, В инкубационные пробирки (.Эппендорф) вносят 10-50 мклсуспензии ядер в ТМСС. Инкубацию проводят при 37 С в...