Способ получения 6-метилентетрациклина

ОПИСИЗОБРЕТЕН ИЯ Союз Советских Социалистических РеспубликК П АТЛАНТУ Зависимый от патентаМ. Кл. С 07 с 103/19 Заявлено 20.Ч 11,1961 ( 745616/23-4) Приоритет Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССРУДК 547,9,07(088.8) Опубликовано 05.Ч 11972, Бюллетень18 Дата опубликования описания 7.Ч 11.1972 Авторыизобретения Иностранцы Роберт Кит Блэквуд, Ганс Генрих Реннгард, Джон Джозеф БирбумЗаявитель СПОСОБ ПОЛУЧЕН ИЯ 6-МЕТИЛ ЕНТЕТРАЦИ КЛИНА 7 СН Е %Сказ) сан,ЕО 43 где Х - атом в водорода или оСпособ закл Соответству общей формул ато одород ксигру ючаетс ющее п ы 11: а или хлора, а Ь -па.в следующем.оизводное тетрацпкли Н ачения, ом воо, сме- темпе 6-метилентетрациклин дегалоботкой водным раствором гидооПредлагается способ получения новых производных тетрациклина с ценными фармакологическимии свойствами - 6-метилентетр ациклина общей формулы 1: де 2 и Е имеют приведенные выше зн ричем если Е - оксигруппа, то Х - а орода, галоидируют в среде инертно шиваемого с водой растворителя при А М-И Е 34122 ратуре не выше 50 С. Полученный 11 а-галоидтетрациклин,12-гемикеталь обрабатывают дегидратирующей кислотой, напри 1 ер фтористоводородной, с последующим 11 а-дегалоидиро 5 ванием полученного 11 а-галоид-метилентетрациклина путем химического восстановленияили каталитического гидрогенолиза. Целевойпродукт выделяют в свободном состоянии илив виде соли известными приемами,10 Галоидирующи м средством является, например, хлор, хлорид йода, И-хлоримид низшей алкановой кислоты, 3-хлор- или 3,5-дихлор,5-диметилгидантоин, низшие алкилгипохлориды, перхлорилфторид и др. Галоиди 15 рующее средство применяют в количестве1 - 1,2 моль на 1 моль соединения тетрациклина и галоидирование проводят в присутствииоснования, особенно если галоидирующимсредством является перхлорилфторид,20 Дегидратирующей кислотой могут быть кислоты хлорная в водном растворе, жидкаяфтористоводородная, концентрированная серная. 11 а-Галоидтетрациклин,12-гемикетальдегидратируют хлорной кислотой при темпе 25 ратуре преи мущественно 60 - 70 С, жидкойвтористоводородной - при 0 - 50 С, концентрированной серной - при температуре ниже20 С.11 а-ГалоидЗО идируют обра341225 20 19 Таблица 3 Таблица 2 Растворитель Растворители неподвижная фаза подвижная фаза неподвижная фаза5 подвижная фаза Водный буферныйраствор (рН 3)Буферный растворМакилвайнеса(рН 3,5) Нитрометан;толуол:пиридин; 10; 3 0,55 УФ-анализ в 0,01 М ХаОН - МеОН дает максимумы у 248, 341 и 447 лык и передержку у 275 ммк. Биологическое исследование показывает величину не менее чем 100 лсг/нг (К. рпецгпоп 1 ае - нефелометрическое испытание с окситетрациклином в качестве стандарта). П р и м е р 35. 9-Нитро,11 а-дихлор-дезокси-деметил-метилен-окситетрациклин,В раствор 600 нг перхлората 7,11 а-дихлор-дезокси - 6 - деметил - 6-метилен-окситетрациклина в 1,5 ил безводного жидкого фторводорода добавляют 100 лг ККОз. Смесь размешивают при 5 С 15 мин, затем ее вылизывают в 75 ил ледяной воды и фильтруют. Для получения продукта фильтрат выпаривают досуха,П р и м е р 36. 9-Нитро-дезокси-деметил-мети лен-окситетр ацн клин.В смесь 500 мг 6-дезокси-деметил-метилен-окситетрациклина в 1,5 мг безводного жидкого фтор водорода добавляют 100 лг КХОз Смесь размешивают при 15 С 30 мин и затем выпаривают, Остаток отстаивают в эфире и фильтруют, чтобы получить необработанный продукт, который промывают в 5%-ном водном растворе НС 1, фильтруют и экстрагируют бутанолом. Экстракт бутанола концентрируют и получают продукт, который кристаллизуют из воды соляной кислотой.П р и м е р 37. 7-Хлор-амино-дезокси- деметил-метилен-окситетр ациклин.В раствор 1,42 г 7-хлор-нитро-дезокси- деметил-б-метилен-окситетрациклина, растворенного в 50 нл воды и 2 мл конц. НС 1, добавляют, размешивая, 1,3 г цинковой пыли при 20 С. Спустя 15 лик смесь фильтруют, рН подгоняют к 2,5 и экстрагируют бутанолом (5 раз по 30 нл). Экстракт бутанола при концентрировании дает 760 мг продукта (в виде дигидрохлорида). Биологическое испытание (К. рпецгпоп(ае) показывает величину в 1680 мсг/мг, УФ-анализ показывает максимумы в 0,01 н. МеОН - НС 1 у 262 и 348 илк; в 0,01 н. МеОН - ХаОН у 264 и 380 м як.Продукт имеет величины К 1, приведенные в табл, 3.Этот продукт получают также восстановлением (водным гидросульфитом натрия) 9-нитро,11 а-дихлор - 6 - дезоксп -6-деметил-окситетр ациклина. 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 П р и м е р 38, 9-Лмино-дезокси-б-деметил.6-метнлсн-окситетрациклин получают, восстанавливая соответствующее 9-нитросоединение гидросульфитом натрия или ЬпС 1, в соляной кислоте.П р и м е р 39. 11 а-Хлор-дезокси-деметил-хлор метилентетр ацикли н.В смесь 1,2 г продукта примера 11 в 15 мл трифторуксусной кислоты добавляют 350 мг Х-хлорсукцинимида и нагревают до 60 С, Примерно 3 час спустя смесь дает отрицательный результат при испытании на К 1/крахмал. Охлажденную смесь добавляют, размешивая, по каплям в 500 мл холодного эфира при температуре ледяной бани. После размешивания в течение 3 час осажденный продукт фильтруют, дважды отстаивают в эфире и высушивают. Получают 1 г,продукта, который растворяют в 300 мл горячего метанола, фильтруют, чтобы удалить небольшое количество нерастворимого материала, и концентрируют до объема 100 ил, Затем добавляют 3 мл а-толуолсульфокислоты, растворенной в метаноле, и оставляют смесь стоять при комнатной температуре до окончания кристаллизации, Получают продукт в виде соли толуолсульфоната фильтрацией осадка, промывкой метанолом и высуши ванием,ИК-анализ продукта показывает ясную кривую малого радиуса с полосой,в 5,69 мк. УФ-анализ в 0,01 н. метанольной НС 1 дает максимумы в 245 и 378 ммк.Найдено, о/: С 51,8; Н 4,3; К 4,3; С 1 10,3;8 4,8.СНзОыКС 1 (как соль п-толуолсульфоната).Вычислено, %: С 52,18; Н 4,2; К 4,2; С 1 10,6; Ь 4,8.П р и и е р 40, 11 а-Хлор-бром-дезокси- деметил-бромметилентетр ациклин.В смесь 4,8 г продукта примера 10 в 40 мл трифторуксусной кислоты добавляют раствор 0,54 мл брома в 10 мл уксусной кислоты, нагревают при 40 - 60 С 1 час и затем оставляют на 12 час при комнатной температуре, Необработанный продукт получают, применяя ту же процедуру, что и в предыдущем примере. Его кристаллизуют из метанола в виде соли а-толуолсульфата (3,54 г). УФ-анализ в 0,01 н, метанольной НС 1 показывает максимумы у 249 и 379 л,ик,П р и м е р 41, 11 а-Хлор-бром-дезокси- деметил-бромметилентетрациклин,21В смесь из 280 мг продукта примера 10 в 5 мл трифторуксусной кислоты добавляют 1,05 мл раствора 0,53 мл брома в 10 мл уксусной кислоты. Образуется тяжелый оранжевый осадок, который размешивают, подогревают при 60 С 2 час и затем оставляют на 48 час. Получают 287 мг продукта, который обрабатымпот эфиром, как описано выше, и кристаллизуют в виде соли сульфата, растворяя в 5 мл метанола и добавляя б капель конц. НЬО. УФ-анализ продукта в 0,01 н. метанольной НС 1 показывает максимумы у 251 и 384 ммк. П р и м е р 42. 9,11 а-Дихлор-б-дезокси-б-деметил-хлорметилентетр ациклиц получают по примеру 39, используя 2 мол, экв. М-хлорсукцинимида.П р и м е р 43. Используя методы предыдущих примеров, получают следующие вещества из соответствующих исходных соединений 11 а-галоид-хлор- (или бром) -6-дезокси-метилентетрациклина; 7,11 а-дихлор- и 7-бром 11 а-хлор-б-дезокси-деметил- хлорметилентетрациклины, а также 7,11 а-дихлор-б-дезоксиб-деметил-б-бромметилецтетрациклин, 7-хлор 11 а-фтор-дезокси - 6-деметил-хлор метилентетрациклин и 7-брома-хлор-дезокси-б-деметил-б-йодметилентетрациклиц.П р и м е р 44. 11 а-Хлор-нитро-дезокси-бдеметил-метилентетрацикли и,Смесь 1 г продукта примера 10 в 20 лгл уксусной кислоты, содержащей 1 мл конц, НКОз, оставляют на 12 час, после чего, добавляя 20 мл воды, крцсталлизуют продукт в виде соли азотной кислоты, фильтруют, промывают в воде и сушат.П р и м е р 45. 11 а-Хлор-дезокси-деметилб-нитрометилентетрациклин.1 г продукта примера 10 нагревают, размешивая в шламме в 20 мл 5%-ной водной азотной кислоты при 60 С. Продукт кристаллизуется из реакционного раствора в виде соли азотной кислоты, Его собирают фильтрацией с последующим промыванием водой и сушкой.П р и м е р 46. 9,11 а-Дихлор-б-дезокси-б-деметил-б-нитрометилентетрациклин получают из продукта предыдущего примера хлорированием, согласно примеру 39.П р и м е р 47, 11 а-Хлор-цитро-б-дезокси- деметил-хлор метилентетрациклин получают из продукта примера 44 хлорированием, как в примере 39.П р и м е р 48. Аналогично примерам 46 и 47 получают следующие продукты из соответствующих 11 а-галоиднитросоединеций в соответствии с процедурой примера 40:9-брома-хлор-дезокси - 6- деметил-нитрометилентетрациклин9-нитро - 11 а - фтор - б - дезокси-б-деметил- бромэтилентетрациклин7,11 а-дихлор-б-дезокси - 6 - деметил-нитрометилентетрациклин.П р и м е р 49. б - Дезокси-деметил-хлорметилеггтетр ациклин, Предмет цзобретеци 45 1. Способ получения 6-метцлецтетрациклина общей формулы 1: Нг Е ЖсН) ОН 50 а Е где Хводороотличаизводи- атом водорода илда или оксигруппа,юигийся тем, что со е тетрациклина об тоь хло вующе рмулы ответщей ф 0 0 ОЮБ НО О 22К 1 ммоль (л) продукта цз примера 39 в25 мл метанола добавляют 100 лгг 5%-ного родия на углероде. Смесь гидрируют, перемешивая ее при комнатной температуре и 1 атм газообразного водорода до того, как будет поглощен 1 ммоль водорода. После отфильтровывация катализатора раствор выпариваютпри пониженном давлении, Для полученияпродукта остаток отстаивают в эфире, филь труют и высушивают.Так же получают следующие соединения изсоответствующих 11 а-галоидсоеди пений (нитросоединения в этой реакции восстанавливаются в аминосоединения, что требует для ре акции больше на 1 ммоль водорода):6-дезокси- деметил - 6 - бромметилентетрациклин9-бром-дезоксц - 6-деметил-бромметилентетрациклин20 9-хлор- дезокси - б-деметил-хлорметилентетрацикчин7-хлор-б-дезоксц-деметил - 6 - хлорметилентетрациклнн7-бром - 6 - дезокси-демстил - б - хлорметилецтетрациклиц7-хлор-дезокси - 6-деметцл-б-бромметилентетрациклин9-амино-дезокси - 6- деметил-метцленгетрациклинб-дезокси-деметил - 6- аьгцггометилентетрациклцгг9-хлор-дезокси - 6 - деметил - 6-аминомегнлентетрацикл9-амино-дезокси - 6- деметил - 6 - хлормети 1 ентетрациклин9-бром - 6 - дезоксц - 6-деметцл-ащнометилентетрациклин9-амино-дезокси - 6 - деметил - 6-бромметилецтетрациклин40 7-хлор-дезокси- деметцл - 6 - аминометилецтетрациклиц.Заказ 193813 Изд,816 Тиран 448 Г 1 одписиоеЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССРМосква, Ж, Раушекая паб., д, 4,5 Типография, пп. Сапнова, 2 где Х и Е имеют приведенные выше значения, причем если Е - оксигруппа, то Х - атом водорода, галоидируют в среде инертного, смешиваемого .с водой растворителя при температуре не выше 50 С, полученный 11 а-галоидтетрациклин,12-гемикеталь обрабатывают дегидратирующей кислотой, например фтористоводородной, с последующим 11 а-дегалоидированием полученного 11 а-галоид-метиленгетрациклина путем химического или каталитического восстановления и выделением целевого продукта в свободном состоянии или в виде соли известными приемами.2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что галоидирующее средство применяют в количестве 1 - 1,2 моль на 1 моль производного тетрациклина,3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что 5 галоидирование проводят в присутствии основания.4. Способ по п, 1, отличающийся тем, чтодегалоидирование осуществляют путем обработки водным раствором гидросульфита ще лочного металла или активным металлом.5. Способ по п. 1, отличающийся тем, чтокаталитическое восстановление ведут при температуре 0 - 100 С при атмосферном или повышенном давлении водорода.сульфита щелочного металла или активным металлом, например цинком в водном кислотном растворе. При этом лучше брать минеральную кислоту. Дегалоидирование путем каталитического гидрирования ведут при температуре 0 в 1 С при атмосферном или повышенном давлении водорода. В качестве катализатора целесообразнее использовать платину.Под инертным к реакции растворителем,применяемым в данном случае, понимается растворитель, который в условиях реакции не реагирует нежелательным образом ни с исходными соединениями, ни с конечными продуктами. Примерами таких растворителей могут служить диоксан, тетрагидрофуран, метиловый эфир диэтиленгликоля (диглим) и метиловый эфир этиленгликоля (моноглим). Желательно, но не обязательно, чтобы в реакционной смеси не было воды в том случае, если продуктом реакции является 11 а-бром- или йодсоединение, до некоторой степени чувствительное к воде. Если реакционная смесь содержит воду, то 11 а-бром- или йодсоединения нельзя подвергать длительной реакции, так как это может привести к значительному снижению выхода желаемого продукта. Температура процесса, очевидно, не является кригической, поскольку она может колебаться от 0 до 50 С. Рекомендуется избегать температуры выше 50 С, поскольку в этом случае могут образоваться 5 а,6-ангидросоединения, снижающие эффективность процесса. Выбор оптимальных условий реакции, например температуры, растворителя, галоидирующего реагента и т. д., является результатом экспериментов. Лучше брать такой растворитель, при котором 11 а-галоидпродукт при образовании кристаллизуется, особенно при наличии бромистых и йодистых соединений. Так, например, бензол-моноглим (диметиловый эфир этиленгликоля) в соотношении 1: 1 предпочтителен как растворитель для 11 а-бромирующего окситетрациклина. При образовании продукт легко отделяется от реакционной смеси. Если этот продукт остается на длительные периоды времени в растворе, то происходит, по-видимому, заметная деградация продукта и значительное уменьшение его выхода.Как уже упоминалось, 11 а-бромнстые и йодистые соединения очень чувствительны к воде. Гидробромид 11 а-бром-окситетр ацнклин,12-гемикеталя растворяется в воде и дает раствор с рН примерно 2. Около 1,5 час спустя продукт нельзя обнаружить, он деградирует предпочтительно в лактон, При кипячении 11 а-галоидпродукта с ацетоном получают высокую регенерацию 5-окситетрациклнна исходного соединения. При обработке водным гидросульфитом натрия 11 а-бромистого гемикеталя также получают исходное соединение, Обычно предпочитают готовить хлористые гемикетальсоединения в растворителе, смешивающемся с водой, как, например, тетрагидрофуран, диоксан, ацетон, динизшие алкпловые 5 ю 15 20 25 зо 35 40 45 50 55 60 65 эфиры этиленгликоля, пропиленгликоля и т. п. Продукт получают простым разбавлением реакционной смеси водой, которая осаждает 11 а-хлортетрациклин,12-гемикеталь,11 а-Хлористые соединения реагируют, повидимому, не так сильно, как соответствующее 11 а-бромистое соединение, что уменьшает необходимость специальной обработки, Они вполне устойчивы в водных растворах даже при низких значениях рН. Так, например, у гидрохлорида 11 а-хлортетрациклин,12-гемикеталя, остающегося в воде при значении рН, равном примерно 1, в течение 18 час при комнатной температуре, разложения незаметно.11 а-Фтортетрациклин получают путем обработки исходного соединения тетрациклина перхлорилфторидом в присутствии сильного основания, предпочтительно гидроокиси щелочного металла или алкоголята. Для реакции обычно растворяют исходное соединение в выбранном растворителе, предпочтительно низшем спирте, т. е. содержащем до 3 атомов углерода, по меньшей мере с мольным эквивалентом основания и добавляют газообразное фтористое соединение перхлорила при комнатной температуре. По мере развития реакции рН раствора падает с щелочных значений до почти нейтральных, причем продукт начинает обычно отделяться, когда рН равно примерно 8. Кристаллический продукт собирают обычным путем и высушивают.Новые 11 а-галоидсоединения пригодны для получения соответствующих тетрациклинов, замещенных в ядре.О посредством ароматических реакций замещения, что дает соединения, замещенные в 7 и/или 9 положении. Примерами таких ароматических реакций замещения могут служить галоидирование и нитрация.Галоидирование проводят обработкой исходного 11 а-галоидсоединения галоидирующим (хлорирующим, бромирующим или йодирующим) реагентом в инертном растворителе, описанном выше, когда речь шла о синтезе 11 а-галоидсоединений.Полученный такимс пособом галоидзамещенный продукт определяют мольным отношением взятого галоидирующего реагента. Если его отношение на 1 моль 11 а-галоидсоединения в основном эквимолярное, то вводится 1 атом галоида, если же оно составляет 2 или больше, то вводятся 2 атома галоида.По завершении реакции галоидирования продукты получают общепринятыми методами. Обычно к реакционной смеси добавляют не являющееся растворителем вещество, после чего собирают осажденный продукт,Нитрацию осуществляют любым стандартным способом. Так, например, исходное соединение реагирует с азотной кислотой регзе или образуется 1 п з 11 п, например нитрат калия и серная кислота. Для достижения лучших результатов нитрацию проводят в таком растворителе, как низшая алкановая кислота, например уксусная, хотя можно брать целый ряд других растворителей. Предпочтение отдается жидкому фторводороду. Небольшое число лабораторных экспериментов позволит отобрать другие подходящие растворители. В то время как условия реакции могут быть весьма различными, следует избегать высоких температур. Удовлетворительных результатов достигают при температуре примерно 25 - 50 С, причем наиболее подходящей является комнатная температура. Время реакции пе является критическим, в частности в связи с устойчивостью исходных соединений к условиям кислой реакции, Для получения оптимальных выходов реакция должна предпочтительно продолжаться 15 - 12 час.Новые 11 а-галоидтетрациклины можно использовать, кроме того, в качестве исходных соединений в реакциях сочетания с солями диазония. Реакцию сочетания с солями арилдиазония осуществля 1 от, как обычно. Например, растворяют 11 а-галоидтетрациклин в воде или воднорастворимом спирте либо кетоне, как ацетон, куда добавляют водный раствор, содержащий 1 - 3 мольных эквивалента выбранной соли арилдиазония. Температуру смеси поддерживают на уровне 0 - 10 С, Продукт сочетания начинает обычно осаждаться из реакционной смеси примерно через 15 лик, однако для обеспечения полной реакции эта последняя должна обычно продолжаться около 2 час. Продукт отделяется, как правило, в виде аморфного вещества, которое собирают, промывают и высушивают. Если осаждения не происходит, то продукт можно получить выпариванием растворителя или экстракцией реакционной смеси такими растворителями, как н-бутанол, метилизобутилкетон и т. п. Полученные азопродукты обычно бывают пригодны для дальнейшего химического превращения илн могут быть очищены переосаждением либо кристаллизацией нз растворителей, хроматографией, техническими приемами экстракции растворителя и т. д,Существует множество солей арилдназония, дающих продукты сочетания данного типа. Получают 7- иили 9-арилазоа-галоидтетрациклин,12-гемикетали. Если Х в исходном соединении означает хлор или бром, то продуктом будет 9-арилазосоединение, а если Х - водород, то продуктом будет смесь 7- и 9-изомеров.Ароматические азопродукты сочетания, а также соответствующие нитросоединения, полученные, как описано выше, особенно пригодны для получения соответствующих аминотетрацнклинов. Азосоединения восстанавливают электролитическими или химическими методами, предпочтительно каталитнчески под действием водорода.По желанию атом 11 а-галогена замещенных в ядре УЭ 11 а-галоидтетрациклинов, полученных из соединений формулы 11, может быть селективно удален восстановлением, предпочтительно химическим путем. Так, например, многие 11 а-бром- или йодсоединения для удаления 11 а-галогена просто кипятят в ацетоне. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 Атомы 11 а-хлора легко удалить обработкой бпсульфнтом натрия в водной среде, Этот последний процесс, годный также и для удаления атома брома или йода, очень прост и ему отдают особое предпочтение при обработке 11 а-хлорсоединений, содержащих другие редуцирующиеся группы. Так, 7,11 а-дихлортетрациклин,12-гемикеталь восстанавливают в 7-хлортетрациклин обработкой бисульфитом натрия в водном диметилформамиде,11 а-Фторсоединения, по-видимому, труднее поддаются селективному восстановлению, поскольку они требуют более энергичной реакции. Так, например, 11 а-фтортетрациклин превращают в соответствующие 11 а-дефторсоединения реакцией с цинком в минеральной кислоте в соответствии со стандартным способом. 11 а-Фторсоединения можно также восстанавливать под действием водорода катализаторами из благородных металлов, предпочтительно при сверхатмосферных давлениях газообразного водорода примерно до 1000 атм,В некоторых случаях для получения значительного выхода желаемого продукта температура процесса может быть выше комнатной (20 - 25 С). При таких условиях восстановления под действием водорода другие редуцнрующиеся группы, например группа 6-гидрокси и 7- или 9-галоген- либо нитрогруппы, также будут восприимчивы к восстановлению, Например, 7-нитроа-фтортетрациклин,12-гемикеталь после обработки газообразным водородом при помощи палладия на углероде при давлении в 1500 фунтов/для (106 кг/слР) дает в качестве основного продукта 7-амино-дезокситетрациклин,Новые 11 а-галоидтетрациклины могут быть также промежуточными соединениями для синтеза 6-дезокситетрациклинов, При обработке водородом в присутствии минеральной кислоты и катализатора из благородного металла восстанавливаются обе группы: 11 а-галоид и 6-окси. Для этой цели можно использовать давления газообразного водорода от атмосферного до сверхатмосферных. Рекомендуются, однако, высокие давления, особенно для 11 а-фторсоедипений, менее восприимчивых к восстановлению под действием водорода и требующих для этого высоких температур, например до 100 С. За исключением 11 а-фторсоединенпй температура не является критической при этой реакции, и высокие температуры (до 50 С) применяют главным образом для сокращения времени реакции, Новые 11 а-галоидтетрациклпны обладают лишь незначительной биологической активностью.Особое значение имеют 11 а-галоидгемикетали, у которых заместитель А - метил ьная группа, а Х - атом хлора илп фтора. Эти соединения превращаются в вещества с поразительно высокой биологической активностью ш ио против вызывающих заболевания микроорганизмов, что делает нх ценными терапевтическими средствами. При испытании ш и 1 го у этих соединений наблюдается лишьпосредственная, хотя и важная, активность, Превращение осуществляют обработкой исходного соединения крепкой дегидратирующей кислотой, Для этой цели можно использовать целый ряд таких кислот, однако предпочтительнее брать минеральные кислоты: например серную, фосфорную, полифосфорную, хлорную, а также другие кислоты, такие как ледяная уксусная кислота, содержащая трехфтористые соединения бора, фторводород (предпочтительно в жидком виде) и тригалоидуксусные кислоты, например трифторуксусная кислота. Рекомендуется также применять концентрированные минеральные кислоты, например по меньшей мере 60%-ные водные кислоты. Особенно благоприятные результаты получают при использовании минеральных кислот следующих концентраций, %:серная 90 - 95фосфорная 80 - 85хлорная 60 - 70. Продолжительность и температура реакции, по-видимому, не являются критическими. При осуществлении этого процесса исходное соединение добавляют к выбранной кислоте и оставляют стоять сравнительно недолго. Так, например, исходное соединение прибавляют к фторводороду, предпочтительно жидкому, при 0 - 50 С и оставляют на 5 - 7 лин и даже дольше, например на несколько часов, после чего фторводород выпаривают. Для получения кристаллического продукта в виде соли гидрофтористого соединения остаток обрабатывают известными способами, например размешивают в веществе, не являющемся растворителем, и перекристаллизовывают из низавших спиртов. Если применяют серную кислоту, то температура реакции должна быть предпочтительно ниже 20 С. При использовании хлорной кислоты реакцию целесообразно проводить при температуре 50 С и выше, лучше 60 - 70 С. Для этого процесса можно брать хлорную кислоту и более высокой концентрации, однако в таком случае возникает опасность взрыва.Продолжительность реакции не является критической, поскольку реакция проходит, видимо, почти мгновенно. Так, например, реакция продолжительностью 5 - 15 мин дает обычно прекрасные результаты при температуре 60 - 70 С. При более низких температурах могут потребоваться несколько более длительные реакции для получения значительного выхода продукта, Если берут трифторуксусную кислоту или уксусную, то реакцию рекомендуется проводить при комнатной температуре примерно 24 час. По окончании реакции продукт получают стандартными способами.Продукт кислотной дегидратации может быть превращен обычным методом из кислой соли в свободное основание или любую желаемую соль.Продуктами процесса дегидратации являются 6-дезокси-деметил-метилена-галоид 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 тетрациклины. Дополнительные 11 а-галоид- метилентетрациклины получают таким же образом из замещенных в ядре 0 11 а-галоидтетрациклин,12-гемикеталей (последние получают, как описано выше), Так получают 7- и/или 9-замещенные 6-метилена-галоидтетрациклины, где заместителем являются галоид-, нитро- или аминогруппы.6-Метилени-галоидтетр ациклины являются промежуточными продуктами при получении соответствующих 6-метилентетрациклинов.Реакцию дегалогенирования можно производить многочисленными стандартными способами, применяемыми для удаления галогена, в том числе химическими и каталитическими методами восстановления.П р и мер 1, 11 а-Фтортетрациклин,12-гемикеталь.В суспензию из 20 г основания тетрациклина в 800 лл воды, охлажденной до 0 С, добавляют 45 лл (2 эквивалента) раствора 2 н, гидроокиси натрия. Тетрациклин растворяется и получается раствор, рН которого примерно 11. Затем фтористое соединение перхлорила барботируют сквозь размешанный раствор (сохраняемый в атмосфере азота) до тех пор, пока рН смеси не достигнет примерно 7. Тяжелый остаток начинает образовываться при рН 8 - 8,5. Избыток фтористого соединения перхлорила вымывают струей азота, а почти белое кристаллическое вещество отфильтровывают, промывают водой, сушат под вакуумом при комнатной температуре и получают 7,9 - 8,5 г продукта. УФ-поглощение достигает максимума у 267 и 340 ммк. ИК-поглощение не дает поглощения карбонила ниже 6 мк.Найдено, %: С 54,97; Н 5,19; И 5,85.С 22 Н 2 ЗО 8 М 21НО.Вычислено, %: С 54,95; Н 520; Х 5,83.П р и м е р 2. 11 а-Фтор-окситетрациклин,12-гемикеталь.К смеси из 6,9 г основания безводного окситетрациклина, растворенной в 285 лл метанола, охлажденного в ледяной бане, добавляют 1 эквивалент 1 н. раствора метилата натрия. Желтая соль натрия осаждается. Фтористое соединение перхлорила барботируют, и соль натрия растворяется вторично. Когда рН смеси приближается к нейтральной, начинает образовываться тяжелый осадок, Избыток фтористого соединения перхлорила удаляют струей азота, продукт отфильтровывают, промывают холодным метанолом, сушат под вакуумом при комнатной температуре и получают 5,1 г бледно-желтых кристаллов. ИК-поглощение не показывает поглощения карбонила ниже 6 лк, Биологическое испытание на К, рпецгпоп 1 ае показывает активность в 4 мсг/мк по шкале тетрациклина. УФ-поглощение достигает максимума у 265 и 336 лик.Элементарный анализ после перекристаллизации продукта из воды:Найдено, %: С 51,2; Н 5,3; Х 5,7.СНяз 09 КГ НаО,Вычислено, %: С 51,4; Н 5,25; 1 ч 5,7,911 а-Хлортетрациклин,12-геПример 3.микеталь.К раствору 2,2 г безводного тетрациклина в25 мл моноглима (диметиловый эфир этиленгликоля) добавляют 800 мл К-хлорсукцинимида и мешают, чтобы растворить реагент. Смесьоставляют на 7 мин, а затем разбавляют 25 млводы. Продукт весом 873 мг кристаллизуетсяв виде белых игл. Биологическое испытаниепродукта показывает активность тетрациклинапротив К. рпецгпоп 1 ае, равную примерно4 мсг/мг. ИК-анализ не дает карбопильныхполос между 5 и б мк. УФ-поглощение достигает максимума у 267 и 340 - 342 ммк,При обработке этого продукта с помощьюгидросульфита натрия в водном диметилформамиде при комнатной температуре тетрациклин регенерируется. Биологическое испытаниереакции смеси показывает активность тетрациклина в 520 - 665 мсг/мк (К, рпецгпоп 1 ае).Кристаллический гидрохлорид этого продукта получают его растворением в избыточнойводной НС 1 (рН около 1) и высушиваниемсмеси вымораживанием.П р и м е р 4. 7,11 а-Дихлортетрациклин,12гемикеталь.Смесь 2,4 г безводного 7-хлортетрациклина,800 мг К-хлорсукцинимида и 25 мл 1,2-диметоксиэтана размешивают в течение 2,5 мин,после чего добавляют 100 мл эфира, а затем300 мл гексана, Образующийся осадок собирают при помощи фильтрации, промываютгексаном и высушивают.Аналогичным образом получают 7-бромахлортетрациклин,12-гемикеталь из 7-бромтетрациклина.П р и м е р 5. 11 а-Хлор-окситетрациклин 6,12-ге ми кет аль.23 г безводного окситетрациклпна растворяют в 250 мл 1,2-диметоксиэтана и добавляютзатем 8 г М-хлорсукцинимида. Смесь размешивают в течение 2 мин и затем вливают приразмешивании в 1 л воды, Отделяющийся продукт собирают при помощи фильтрации, промывают водой и высушивают, ИК-анализ продукта (КВг при 1 % -ной концентрации) не показывает поглощения карбонила в диапазоне5 - 6 мк, но дает следующие главные максимумы, мк: 6,12; 6,35; б,бб; 6,85; 7,22; 7,55, 7,75;7,92; 8,14; 8,36; 8,78; 9,18 и 9,43. Биологическоеиспытание продукта показывает активностьтетрациклина, равную 4 мсг/мг.П р и м е р 6, 2350 мг безводного окситетрациклина растворяют в 10,2 мл подогретой смеси из одинаковых объемов бензола и моноглима. Затем смесь охлаждают в ледяной бане идобавляют, размешивая, 0,5 мл 1 н. раствораброма в бензоле. Продукт кристаллизуетсянепосредственно, его собирают и промываютсвежим р астворителем.Кипячение продукта в ацетоне или обрабогка продукта водным гидросульфитом дает высокую регенерацию окситетрациклина,П р и м е р 7, 11 а-Бромтетрациклин,12-гемикеталь, 10 подвижная фаза 20:З-толуол-пиридин, насыщенный буферным раствором с рН 4,2 неподвижная фазабуферный (водный)раствор с рН 4,2. 60 65 5 10 15 20 25 Зо 35 40 45 50 Повторяют процедуру, указанную в примере 4, применяя Ы-бромсукцинимид в качествегалогенирующего реагента для получения этого продукта из тетрациклина. Аналогично получают и 7-хлора-бром- и 7,11 а-дибромтетр ациклин,12-гемикеталь.При мер 8. Процесс ведут по примеру 4,но применяют М-йодсукцинимид в качестве галогенирующего реагента для приготовленияследующих соединений из подходящих тетрациклинов:7-хлора-йодтетрациклин,12-гемикеталь7-брома-йодтетрациклпн,12-гемикеталь11 а-йод-окситетрапиклин,12-гемикеталь11 а-йодтетрациклин,12-гемикеталь,П р и м е р 10, 11 а-Хлор-дезокси-деметил 6-метилентетр ацикли н.11 а-Хлортетрациклин,12-гемикеталь растворяют в жидком фтористом водороде (в пропорции 2 г/15 мл) при 0 С. Смесь выдерживают при этой температуре 10 - 15 мин, после чего фтористый водород выпаривают, Остатокрастирают в порошок в эфире для получениятвердого продукта 11 а-хлор-дезокси-деметил-метилентетрациклина в виде гидрофтористой соли, которую перекристаллизовываютиз метанола.Или же 10 г сырого гидрофтористого продукта растворяют в 350 мл воды при подогреиании и перемешивании, Затем добавляют такой же обьем концентрированной НС 1 в прозрачный раствор, в результате чего продукткристаллизуется в виде гидрохлористой соли.Найдено, %: С 52,62; Н 4,63; М 5,54; хлорид6,84,СюН 2207112 С 1.Вычислено, %: С 53,11; Н 4,56; И 5,63; хлорид 7,13,ИК-анализ продукта в виде гидрохлористойсоли в грануле КВг при 1 %-ной концентрациипоказывает поглощение карбонила у 5,7 мк,а также следующие важные максимумы: 6,1;6,23; 6,36; 6,45 (область передержек, зЬоц 1 йег),6,91; 7,85; 8,14; 8,55; 10,22; 10,55 и 10,89, Биологическое испытание продукта (К. рпецгпоп(ае) показывает, что активность окситетрациклина равна 50 в 1 мсг/мг. УФ-анализ образца в 0,01 н. метаноле - НС 1 дает максимумы у 376, 278 и 242 ммк, К 1 этого продукта0,2 - 0,3 в следующем расположении; При анализе записи на бумажной ленте УФ-светом пятно продукта флуоресцирует несильно, Однако после опрыскивания бисульфитом натрия флуоресценция усиливается.Когда продукт кипятят в смеси с метанольпой концентрированной НС 1, то получают обратно неизменившийся продукт. При таких же условиях исходное соединение превращают в:хлороформ; пиридин неподвижная фазаводный буферныйраствор с рН 3,5,50 55 60 65 соединение, предположительно являющееся 11 а-хлоризотетрациклином и дающее при обработке водным гидросульфитом натрия изотетрациклин. П р и м е р 11. 11-Фтор-дезокси-деметил 6-метилентетрациклин.250 мг 11 а-фтортетрациклин,12-гемикеталяразмешивают в 2 мл 63/,-ной водной хлорнойкислоты. Твердое вещество растворяется послеподогрева до 60 - 65 С в течение 15 мин, послечего смесь охлаждают и добавляют воды дляполучения 11 а-фтор-дезокси-деметил-метилентетрациклина в виде соли хлорной кислоты. При анализах ультрафиолетовыми и инфракрасными лучами продукт показывает такое же поглощение, как в примере 10.П р и м е р 12. 11 а-Хлор-дезокси-деметил 6-метилен-окситетрациклин.5 г 11 а-хлор-окситетрациклин,12-гемикеталя добавляют к 15 мл сухого жидкого фторводорода и смесь перемешивают 3,5 час притемпературе ледяной бани, Фторводород выпаривают путем подогрева в потоке газообразного азота для получения продукта в виде гидр офтор истой соли. Сырой гидр офтор истыйпродукт растворяют в воде и добавляют концентрированную НС 1 или хлорную кислоту(70/О), чтобы осадить соответственно солигидрохлорида или хлорной кислоты. Соль гндройодида осаждают из раствора неочищеннойгидрофтористой соли в ацетоне, добавляя47% -ную йодистоводородную кислоту.Или же первоначальную реакционную смесьразбавляют 6 - 7 объемами воды и льда и добавляют хлорную кислоту или нафталинсульфокислоту (концентрированную кислоту) дляосаждения соответствующей соли. Разбавление ацетоном первоначальной реакционнойсмеси, а затем добавление НС осаждает сольгидройодида.Найдено, о/о: С 44,0; Н 4,0; М 4,2; С 1 5,5.СрзНиИО 8 С.Вычислено, /,: С 43,7; Н 3,7; К 4,6; С 5,8.УФ-анализ дает следующие максимумы; 222,270 и 372 ммк, ИК-анализ показывает основные максимумы у: 3,05; 3,2; 5,7; 6,02; 6,03; 6,22;6,4; 6,88; 7,4; 7,8; 8,1; 8,9 и 9,1 мк. Соль хлорной кислоты (перхлорат) при УФ-анализе дает максимумы у 237, 270 и 372 ммк.П р и м е р 13, 11 а-Фтор-дезокси-деметил 6-метилен-окситетрациклин получают так же,как в примере 11, но используя 11 а-фтор-окситетрациклин,12-гемикеталь в качестве исходного соединения,Пример 14. Подобные соединения получают из соответствующих 11 а-галоидтетрациклин,12-гемикеталей, причем 11 а-фторсоединение - в соответствии с примером 11, а остальные 11 а-галоидсоединения - по примеру 10.П р и м е р 15. Исходное соединение нз примера 10 растворяют в 94/,-ной серной кислоте(1 г в 10 мл) и оставляют смесь стоять 2 часпри 10 С. Продукт получают в виде соли суль 5 10 15 20 25 Зо 35 40 45 фата, для чего смесь вливают в несколько объемов диэтилового эфира и фильтруют.Продукт можно получить также в виде соли фосфата, применяя 85%-ную фосфорную кислоту вместо серной при соблюдении вышеописанных условий.П р и м е р 16.,Получение минеральных кислых солей 11 а-галоид-метилентетрациклинов.11 а-Хлор-дезокси - 6 - деметил - 6 -метилентетрациклин фторводород растворяют в воде, причем рН раствора должен быть равен 5. Образующееся амфотерное соединение фильтруют и высушивают, после чего растворяют в метаноле, содержащем молярный эквивалент хлорводорода, и осаждают соль гидрохлорида, добавляя эфир. Эту соль готовят так же по способу, описанному в примере 10, Для получения соответствующей соли другие минеральные кислоты могут быть заменены при этом процессе соляной кислотой.Лналогичными способами получают соли гидр охлорида, гидр обро ми да, сульфата, гидройодида, нитрата и фосфата 11 а-галоид-метилентетрациклиновописанных в предыдущих примерах,Подобным образом получают и другие соли, используя различные кислоты, например органические кар боновые кислоты, как-то: винную, лимонную, яблочную, бензойную, гликолевую, глюконовую, гулоновую, янтарную, уксусную и т. п.П р и м е р 17. Продукт из примера 10 (5 мг) растворяют в 3 мл метанола и добавляют свежсизготовленный раствор гидросульфита нагрия (20 мг в 2 мл воды). Смесь оставляют на 15 мин при комнатной температуре, после чего десорбируют метанол и экстрагируют бутанолом, Экстракт бутанола концентрируют для получения продукта 6-дезокси-деметил-метилентетрациклина. Продукт кристаллизуется из ацетонитрила или же его кристаллизуют в виде соли гидрохлорида из воды, добавляя конц. НС 1.При испытании на К. рпецгпоп 1 ае продукт показывает активность окситетрациклина по меньшей мере 110 мсг/мг.Ю продукта 0,6 в следующем расположении: Пример 18. Повторяют процесс по примеру 17, чтобы дехлорировать 11 а-хлор-метилентетрациклины предыдущих примеров для получения следующих продуктов, соответствующих продукту примера 17 по результатам УФ- и ИК-анализов (последний анализ пока. зывает на отсутствие поглощения карбонила в связи с тем, что нет максимума примерно у 5,7 мк): 7-бром,-7-хлор- и 5-окси-дезокси- де метил-метилентетр ациклины,П р и м е р 19. 6-Метилентетр ациклин.Смесь 250 мг гидрохлорида 11 а-хлор-метилентетрациклина и 100 мг цинка в 10 мл13ацетона перемешивают 15 мин при комнатной температуре, после чего добавляют 5 мл 5 о/о-ной НС 1, фильтруют и десорбируют ацетон. Гидрохлорид 6-метилентетрациклина отделяется от концентрированной реакционной смеси и его собирают фильтрацией.Эту процедуру повторяют, используя в качестве растворителя по 5 мл НС 1 и ацетона, и получают сравнимые результаты,П р и м е р 20. 6-Метилентетрациклин.250 мг продукта примера 10 и 250 мг йодиднатрия в 25 мл ацетона дефлегмируют 2 час. Для получения продукта реакционную смесь охлаждают, фильтруют и концентрируют.П р и м е р 21, 250 мг гидрохлорида 11 ахлор-метилентетрациклина дефлегмируют в 50 мл ацетона 24 час. Смесь охлаждают, фильтруют до прозрачности и концентрируют при пониженном давлении, в результате чего получают продукт в виде соли гидрохлорида.П р и м е р 22, К 1 г гидробромида 11 а-бром-метилентетрациклина в 20 мл воды добавляют, размешивая, 320 мг сульфита калия, растворенного в 5 мл воды, После размешивания в течение 30 мин при комнатной температуре реакционную смесь фильтруют и получают продукт.Пример 23. Соли гидрохлорида, гидробро мида, сульфата, гидр ойодида и фосфата 6-метилентетрациклина получают способами, описанными в примере 16.Пример 24. Соль натрия 6-метилентетрациклина получают, растворяя соединение тетрациклина в воде, содержащей эквивалентное количество едкого натра. Раствор высушивают вымораживанием и получают соль натрия,Аналогично получают другие соли щелочных и щелочно-земельных металлов новых соединений б-метилентетрациклина, включая соли калия, лития, бария, кальция, стронция и магния.Кроме того, другие соли можно получить при использовании различных кислот, например органических карбоновых кислот, таких как винная, лимонная, яблочная, бензойная, гликолевая, глюконовая, гулоновая, янтарная, уксусная и т. п., и органических (амины), а также неорганических оснований.П р и м е р 25. 6-Дезокси-деметил-метилентетр ацикли н.Раствор 50 мг гидрохлорида 11 а-хлор-дезокси - 6 - деметил - 6 - метилентетрациклина в 600 мл простого монометилового эфира этиленгликоля охлаждают до 4 С в ледяной бане и, быстро перемешивая, постепенно обрабагывают этот раствор примерно 10 мин 50 г пыли металлического цинка. Во время добавления температура, повышается до 12 С, а после его окончания начинает падать, Реакция продолжается 15 мин, Затем быстрой фильтрацией удаляют цинк, фильтрат промывают растворителем и,постепенно к нему добавляют 1 л воды в течение примерно 10 мин, Образуется желтый шламм цинкового комплекса продук 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 14та. рН раствора подгоняют к 6,8 водным едким натром. Шламм дигерируют примерно1,5 нас в ледяной бане и фильтруют. Мокруюфильтрпрессную лепешку отстаивают в 750 млводы и добавляют по каплям конц, НС 1 до техпор, пока не будет получен прозрачный раствор. Незначительный избыток конц, НС 1 вызывает быструю кристаллизацию гидрохлорида 6-дезокси-деметил-б-метилецтетрациклина в виде блестящих игл. После дцгерировация в течение 1 час продукт фильтруют и высушивают. Выход его 37,8 г, т. пл. 213,8 - 214 С(с расщеплением),П р и м е р 26. 6-Дезокси-б-деметил-мет 11 лецтетрациклин.11 а - Хлор - б - дезокси-б-деметцл-б-метилен.тетрациклин также можно эффективно дехлорировать для получения указанного продуктас помощью следующих реактивов:водный фенилгидразинацетатводный сульфат железаформальдегид - сульфоксалат натриягипофосфористая кислота и палладиеваячерньпорошковое железо в диметцлформамиденикель Ренея в 50 о 1 о-ной водной уксуснойкислоте.Понятно, что 6-метцлентетрациклины и 11 агалоид-метилентетрациклины могут быть частично превращены в свои С - 4-эпимеры приразличных условиях, особенно если значениярН лежат в пределах 2 - 6 и в таких растворителях, как ледяная уксусная кислота. Практически выделенные 6-метилентетрациклин и11 а-галоид-метилецтетрациклцн могут содержать небольшие количества, т. е, менее 20"/о,своих С - 4-эпимеров. 5-Гидроксиметцлентетрациклины более резистентны к С - 4-эпимеризации. С - 4-эпимеры предлагаемых соеди 11 енцй можно изолировать из смесей, применяя стандартные процессы, как-то: бумажнуюхроматографию или технику противоточногор а спределения. По существу. чистые соедп пения С - 4-эпимеров можно вновь превратить вобычную более активную форму известнымиспособами, например обработкой ледяной уксусной кислотой.П р и м е р 27. 6-Дезокси-б-деметил-б-метилен-окситетрациклин.Способ А.К раствору 5 г продукта примера 12 (в виде гидройодида) в 125 л 1 л разбавленной соляной кислоты (1 часть конц. 1-1 С 1 в 55 частяхводы) при 20 С добавляют 2 г цинковой пыли,После перемешивания в течение 10 л 1 ин цинкотфильтровывают, фцльтрат подгоняют к рН0,8 и экстрагиру 1 от бутацолом. Экстракт бутацола концентрируют при пониженном давлении до получения осадка, который растцра 1 отв порошок с помощью эфира. Нерастворимыйэфиром остаток кристалл 11 зуют из смеси метанол - ацетон - ко;щ. соляная кислота - эфирдля получения продукта в виде гидрохлоридамонометанолята (2,5 г), плавящегося при205 С с расщеплением.15Элементарный анализ продукта: С 55,0; Н 5,2; Х 5,5; С 17,0; ОСНЗ 3,4. К 1 продукта составляют соответственно 0 и 0,35: неподвижная фаза буферный водный раствор с рН 4,2; подвижная фаза 1). 20:30-толуол:пири дин, насыщенные буферным раствором с рН 4,2;2). 20:10:3 - нитрометан:хлороформ:пиридин, насыщенные буферным раствором с рН 3,5. буферный водный раствор с рН 3 5,Способ Б.Смесь 1 г 11 а-хлорпродукта, согласно примеру 12, в 10 мл метанола, содержащего200 мг 5%-ного родня на углероде, гидрогенирируют при комнатной температуре и 1 атмводорода до тех пор (2 час), пока не будетпоглощено эквимолярное количество водорода. Катализатор отфильтровывают, фильтратвыпаривают и остаток кристаллизуют по способу А.Способ В.Смесь 1 г 11 а-хлорпродукта, согласно примеру 12, в 70 мл воды, содержащей 1 г гидросульфита натрия, перемешивают 0,5 час прикомнатной температуре. Затем смесь экстрагируют бутанолом, а экстракт бутанола выпаривают. Продукт кристаллизуют по способу А.Способ Г,Используя процесс по способу А, 11 а-хлор 6-дезокси-деметил-метилен - 5-окситетрациклин соль перхлората восстанавливают в6-дезокси-деметил - 6 - метилен - 5-окситетрациклин.Кристаллический продукт хлористоводородного метанолята этого примера можно перекристаллизовать из изопропанола в виде гидрохлорида 6 - дезокси - 6-деметил-метиленокситетрациклина. Перекристаллизованныйпродукт дает следующие максимумы при ИКанализе: 3,1; 3,75; 6,02; 6,23; 6,36; 6,55; 6,9;7,35; 7,6; 7,8; 8,15; 8,26; 8,5; 9,27; 9,95; 10,55;10,8; 11,53; 11,93 и 12,15 мк,П р и м е р 28, 7, 11 а-Дихлор-дезокси-деметил-метилен-гидрокситетр ациклин.Способ А.К 5 г гидройодида 11 а-хлор-дезокси-деметил-метилен-окситетрациклина в 15 млжидкого фтористого водорода, охлажденногодо температуры ледяной бани, добавляют1,5 г М-хлорсукцинимида. Раствор размешивают,при температуре ледяной бани 1,5 час, Сыоой продукт осаждают, добавляя 500 мл эфира, и регенирируют фильтрацией, Сырой продукт поглощается метанолом при комнатнойтемпературе, нерастворимый остаток фильтруют, фильтрат обрабатывают актнвированнымуглеродом, вновь фильтруют и концентрируютпри пониженном давлении, Остаток поглощается,разбег,.ной соляной кислотой, из кото 16рой продукт кристаллизуется в виде гидрохлорида. УФ-анализ в 0,01 н. НС 1 в метаноле поуказывает Л 239 ммк, Е,", 352: Лбах 378 ммк, Е,", 60; отклонение 258 ммк, Е " 324. ИК-анализ показывает основные полосы у 5,7, 6,0 и 6,9 мк.Способ Б.5 г 11 а-хлор-окситетрациклин,12-гемике таля добавляют к 15 мл жидкого фтористоговодорода при температуре ледяной бани, После размешивания в течение 3,5 час при указанной температуре процесс далее ведут по способу А после добавления К-хлорсукцини мида в таком же весовом количестве.Альтернативный и несколько более подходящий способ обработки заключается в следующем. После удаления большей части жидкого фторводорода добавляют 100 мл воды, а за тем 5 г р-нафталинсульфокислоты, Продуктосаждается в виде соли этой кислоты и его собирают, путем фильтрации.Другой способ обработки включает разбавление первоначальной реакционной смеси .25 6 - 7 объемами воды и последующее добавление по каплям концентрированной кислоты для осаждения перхлората и солей -нафталинсульфоната, как описано выше. Полученная таким образом необработанная смесь пер хлората кристаллизуется из изопропанола ввиде длинных игл, которые при УФ-анализе показывают максимум при 260 и 377 ммк и отклонение при 260 ммк, ИК-анализ показывает максимумы у 5,7; 6,0; 6,26; 6,55; 6,88;35 7,2; 7,85 и 8,35 мк.П р и м е р 29, 7-Хлор-дезокси-деметилметилен-окситетрацнклин.Способ А.К раствору 0,5 г 7,11 а-дихлор-дезокси- 40 деметил-метилен- окситетрациклинперхлората в 7,6 мл воды добавляют 0,45 г гидросульфита натрия и полученную смесь размешивают 12 мин, Выделившийся продукт собирают фильтрацией. Биологическое испытание 45 продукта дает величину 3400 мсг/мг - К, рпецгпоп 1 ае - нефелометрическое испытание с окситетрациклином (1000 мсг/мг) в качестве стандарта.Способ Б.50 20 г солп Р-нафталинсульфоната из предыдущего примера суспендируют в 500 мл метанола, содержащего 5 г 5/-ного родня на углероде и гидрогенирируют смесь при комнатной температуре и 1 атм газообразного водо рода, После поглощения 700 мл последнегореакционную массу фильтруют и выпаривают фильтрат для получения 15,4 г остатка.Метанольный раствор из 11 г остатка подгоняют затем до рН 6,5 с помощью триэтил амина и пропускают в колонну 8 х 100 см, содержащую 2 кг порошка клетчатки (целлюлозы), используя воду как неподвижную фазу.Колонну элюируют насыщенным водой этилацетатом и собирают 45 мг фракции. Вслед 65 за элюированнем производят бумажную хро 34122510 15 20 Растворители неподвижная фаза подвижная фаза Этилацетат, насыщенный водой 0,35 Водный буферныйраствор фосфата(РН 4,2) 0,33 То же 55 60 65 17матографию и собирают фракции (частицы) 132 - 260 С, выпаривают досуха, отстаиваюг в эфире и фильтруют для получения 2,74 г чистого аморфного амфотерного продукта.Продукт кристаллизуют, растворяя 1,6 г в 40 лл горячего метанола, и затирают. Фильтрация дает 890 мг продукта в виде амфотерного основания. ИК-анализ дает следующие максимумы: 2,96; 3,29; 3,42; 6,06; 6,18; 6,30;6,58; 6,88; 7,19; 7,43; 7,70; 8,23; 9,06; 9,88; 10,63;10,92; 11,55 и 11,76 мк. УФ-анализ дает следующие результаты: в 0,01 н. НС в метаноле - максимумы у 247 ммк (д е 4,28) и 346 ммк (1 д в 4,02) и отклонение у 370 мяк (1 дв 3,98); в 0,01 н, ИаОН в метаноле - максимумы у 234 алик (дв 4,24), 253 ммк (дв 4,22) и 389 ммк (дв 4,12) и отклонение у 284 ммк (де 4,07); в 0,01 М Мд С 1 в метаноле максимумы у 241 ммк (де 4,32), 349 ммк (дв 4,04),и 372 ммк (передержка, де 4,02),Продукт имеет величины К 1, указанные в табл. 1. Биологическое испытание (К. рпепп 1 опае - в качестве стандарта окситетрацнклин) дает величину в 6000 мсг/мг.Кристаллическую соль перхлората продукта предшествующего примера гидрируют, чтобы получить этот продукт, который кристаллизуют из метанола и 70%-ной хлорной кислоты. Соль перхлората продукта имеет УФ-спектр, идентичный спектру амфотерного основания,Способ В.Этот продукт получают также восстановлением исходного соединения из способа А цинком и кислотой, согласно процедуре, описанной в примере 27.П р и м е р 30, 7-Брома-хлор-дезокси-бдеметил-метилен-окситетрациклин получают в соответствии со способами А и Б примера 28, используя эквивалентное количество И-бромсукцинимида вместо Х-хлорсукцинимида.П р и м е р 31. 7-Бром-дезокси-деметил-метилен-окситетрациклин получают из продукта, описанного в примере 30, обработкой гидросульфитом натрия, как изложено в примере 29,Следующие вещества получают из соотвегствующих 11 а-галоидсоединений, применяя процедуры, описанные в предыдущих примерах: 25 30 35 40 45 50 187-хлора-фтор-дезокеи-деметил - 6 - метнлен-окситетрациклин;7-йода-хлор-дезокси - 6 - деметил - 6-ме тилен-окситетр ациклин;7-брома-фтор-дезокси - 6- деметил-метилен-окситетр ациклин.Эти соединения превращают в 11 а-дегалоидсоединения вышеуказанными способами,П р и м е р 32, 11 а-Хлор-нитро-дезокси- деметил-б-метилен-окситетрациклин.К 1 г 11 а-хлор-дезокси-деметил-метилен-окситетрациклина в 20 мл уксусной кислоты добавляют 1 мл конц, НКОз. Смесь оставляют на 12 час, затем выпаривают до одной четверти первоначального обьема, после чего добавляют 200 м,г эфира. Продукт выделяется в виде соли азотной кислоты и его собирают фильтрацией.Аналогично получают соответствующее 11 афторсоединение. П р и м е р ЗЗ, 7,11 а-Дихлор-нитро-б-дезокси-б-деметил-б-метилен-окситетрациклин.1 г гидрохлорида 7,11 а-дихлор-б-дезокси-бдеметил-б-метилен-окситетрациклина растворяют в 20 мл уксусной кислоты и добавляют 1 лл конц. НКОз. Смесь оставляют на 12 час, после чего концентрируют до одной четверти первоначального объема и добавляют по каплям в 200 мл эфира с размешиванием при температуре ледяной бани. Размешивание продолжают З,час, после чего твердое тело регенерируют фильтрацией, несколько раз отстаивают в эфире и затем сушат, чтобы получить продукт в виде соли гидрохлорида,Используя ту же процедуру, получают следующие продукты из соответствующих исходных соединений:7-хлора-фтор-нитро-дезокси - 6 - деметил-метилен-окситетрациклин;7-бром - 11 а - хлор-нитро-дезокси-деметил-метилен-окситетрациклии;7-хлора - фтор - 9 - нитро-дезокси-деметил-б-метилеи-окситетрациклин,Эти продукты превращают в 7-бром- и 7-хлор-амино-б - дезокси - 6- деметил-б-метилеи-окситетрациклин вышеописанными способами. Данные соединения химически (циик в разбавленной НС) или каталитически (родий) восстанавливают в 7-хлор-, 7-йод- и 7-бром-амнно- дезокси - 6 - деметил-метилен-окситетрациклины,П р и м е р 34. 7 - Хлор - 9 - нитро-дезокси- де метил-метилеи-окситетр аци клин.К раствору 1 г основания 7-хлор-дезокси-деметил-метилен-окситетрациклина в 8 лл безводного жидкого фторводорода (НР) при 0 С добавляют 220 мг КХОз. Смесь размешивают 30 лин при 0"С и выпаривают фторводород в присутствии азота. Остаток отстаивают в сухом эфире, фильтруют и высушивают, Продукт имеет величины К 1, указанные в табл. 2,