Сухой бактериальный препарат для получения продукта типа йогурт

СОЮЗ СОВЕТСИИХСОЦИАЛИСТИЧЕСИИХРЕСПУБЛИН 4 АЗ И ПАТЕНТ мере одинчек Е.деотококков смешанную яц 1 гцг 1 саотобранныэФФекта,го отношении 0,01;1К полнитель ГОСУДАРСТЕЕННЦЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(71) Сейкенкай Фаундейшнл ДжуридиклПерсон (ЗР)(54) СУХОЙ ВАКТЕРИЫ 1 ЬНЫЙ ПРЕ 11 АРАТД 1 И ПОЛУЧЕНИЯ ПРОДУКТА ТИПА ЙОГУРТ(57) Изобретение относится к молочной промышленности и биотехнологии иможет быть использовано в качествепродукта, обладающего дезодорирующимдействием, и в качестве добавки ккорчам для животных и птиц, Цельизобретения - придание целевому продукту повышенного дезодорирующего эф" Изобретение относится к молочной промышпеннОсти и биотехнологии и мо 1 жет быть использовано в качестве продукта, обладающего дезодорирующим действием, и в качестве добавки к .кормам для животных и птиц.Цель изобретения - придание целевому продукту повышенного, дезодори рующего эффектаИзобретение заключается в создании композиции, содержащей по крайней(1) А 23 С 9/12, С 12 И 1/20 фекта, Изобретение заключается всоздании композиции, содержащей покрайней мере один штамм молочнокислых палочек ЕасгоЬасдПцв цеойогапя,1.асгоЬас 11 ця с 1 еогапв и смешаннуюкультуру 1.ассоЬас 111 цв вц 1 Гцг 1 саРЕКИ Р 7383 или РЕКМ Р 7384 и 1.асгоЪас 111 цв п 1 говцв РЕКИ Р 7385 илиРЕКМ Р 7386, из молочнокислых стрептококков Вггергососсця Гаеса 1 гвРЕКМ Р 2083 или РЕКМ Р 7382, способных продуцировать антибиотики при соотношении культур от 150;1 до 0,01:1,Предусматривается дополнительное содержание от 0,5 до 0,15 масч, Вас 111 цв соаяц 1 апя или Вас 111 цв вцЬг 11 дяи/или 10-100 мас.ч, ВдйЫоЬасгег 1.цшяр. АТСС 1146 или АТСС 11863Отобранными штаммами засевают йогуртовуюсреду и выдерживают смесь в течение48 ч при 37 С, получая в результатейогурт, Полученный йогурт испытываютна запах и вкус и отбирают клетки,обладающие хорошим запахом и вкусом,1.з,п, ф-гы, 4 табл,штамм молочнокислых палоогапв и Ь.с 1 еогапв и стрепгегрсососсцв гаеса 11 я и культуру Т.асгоЬасПця и ЬасгоЬас 111 ця пз.гговцв, с учетом дезодорирующего аиболее сильно проявляющезанном сочетании и при со культур от 150:1 до оме того, предусмотрено до ое содержание О, 5-0, 15 мас . ч,+308 ме Вкус ах ое 00а 0 А А А А 0 роща; Сдовольно хорошо ку; 70 щ +308 70 масЛ мало 508 - 50 мас,Х молока и 50рим А " отлично; Внадобно соевому ссоевого сока, 50 щ х ока тавитель И,ПрРед М,Дидык ова С И,Дербак ТРеда ректорЛ Патаи 612 Тираж 38 Подписноеобретениям и открытиям при ГКНТ СССРРаушская наб., д. 4/5 осуда оизводственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина ЗаказВНИИПИ 0 0 0 С о а нного к 3035, М тета пова, ИА А В С С С СВас 111 цв соар 1 апв или Вас 111 ця вцЪг 11 в и/илн 10-100 мас.ч. ВдГ 1 йоЪасег 1 цш вр. АТСС 11146" или АТСС 11863,Отличия четырех указанных типовЬасгоас 111 ця от известных ранее 1,ассоЬас 111 ця следующие,Дпя размножения известных штаммовобладающие запахом соединения, содержащие атомы серы, и обладающие запахом соединения, содержащие атоюазота, не являются необходимыми, Даже при добавке таких обладающих запахом соединений к питательной среде,в которой известные штаммы ЬасоЪас 111 цв не могут размножаться размножения их не происходитДаже при добавке этих соединений на стадии логарифмического роста известных штаммовускорение роста микроорганизмов не 20наблюдают. Известные штаммы 1,асоЬас 11 1 цв не потребляют этих соединений, которые полностью остаются втом количестве, в котором их добавляют, 25Известные штаммы ЬассоЬас 111 цяразделяются в отношении ауксотропиина штаммы, которые могут размножаться в среде Стефансона - Ветмана(Б " И) при добавлении к ней кислотыСавапйпо и витаминов, и штаммы, которые не размножаются в этой среде,пока к ней помимо кислоты СаяаЫпои витаминов не добавляются другиекомпоненты,Известные штаммы Ьасг.оЬас 111 цяразмножаются в обычной среде хуже посравнению с КвсЬегдсМа со 1 д и томуподобных, Так, способность их кразмножению составляет 0,5 от соответствующей величины для ЕвсЬегспа со 11. Их стационарная кишечнаяспособность сохраняется в течение1"2 дней, Относительно их очищающейспособности, даже в отношении обладающих запахом сое,цинений, содержащих атомы углерода, ничего не известноВсе четыре указаннь.х штаммовЬасйоЬас 111 цв обладают следующими свой 50ствами ЬасгоЬас 111 ця, Они являютсяграм-положительными, анаэробпымн илимикроаэрофильными, представляют собой необраэующие спор палочки, которые в зависимости от типа штамма мо 55гут быть сферическими, изогнутымиили нитеобразными; они неподвижны,отрицательны по отношению к каталаэеи не снижают содержание нитратов; они не разлагают желатин, не продуцируют индол илн сероводород Некоторые из них имеют биполярную окраску,Они не разлагают белки и жиры илиразлагают их в очень сЛабои степени,Они лучше размножаются в аназробныхили микроэробных, чем в аэробных условиях, интенсивно разлагают сахараи стоики к кислотам. 11 ри использовании их для Ферментации глюкозы образуется молочная кислота с выходомболее 50%. Размножение их ускоряетсяпри добавке к питательной среде уксусной кислоты. Они непатогенные поотношению к животным и растениям,ЬасгоЬас 111 ця с 1 еагапя оказываюточень мягкое действие даже при введении их орально в больших количествах и снижают содержание плохо пахнущих веществ в испражнениях, не вызывая неприятных ощущений при длительном использовании. Однако припрекращении приема штамм выводится изорганизма через кишечный тракт, теряя свою способность оказывать дезодорирующее действие хп ч 1 но в течение непродолжительного времени,Дезодорирующая способность ЬасгоЬас 111 ця Йеойогапя на несколько порядков выше по сравнению с ЬасгоЪас 111 ця с 1 еагапя, и, кроме того, ониполностью разлагают плохо пахнущиесоединения,Для каждого вида ЬасгоЬас 111 ця отбирают те клетки, которые имеют .большее значение (М . ЬассоЬас 11 1 ця1 асЫв, используемые в предлагаемомспособе, выделяют, например, следую"щим образомВ среде А (среда Б-У + витамин ++ агар, при этом среда Б-М имеет сле.дующий состав, г: КНРО 1; МВБО,. хх 7 НО 0,7; ИаС 1 1; (ИН)Р 04, 4;РеБО, 7 НО 0,03; глюкоза 5) или всреде В (среда Б- + казалиновая кислота + агар) формируют колонию с помощью анаэробной культуры из фекалий,После этого выращивают полученную колонию в среде ЬВБ. Селективная средадля ЬасоЬас 111 ця 1 асв состоитиз, г: триптиказ 10; экстракт дрожжей 5; мясной экстракт 10; КНР 04. 6;кислый лимоннокислый аммоний 2; глю;.коза 20; твин 80 1 (торговое название моноолеата поликсиэтиленсорбитана); ацетат натрия 40; раствор В15 мл; ледяная уксусная кислота5 65 рН и стерилизации 3,7 мп (раствор В имеет следующий состав, г: РеБОс х х 7 Н О 0,5; МпБО 4, пНО 2,47; МаС 1 0,5; МдБ 04 7 Н 0 1 О; вода 250 мп), и собирают выращенные на ней бактериальные клетки. Эти клетки выращи вают затем в обычной агаровой питательной среде и из всех получаемых штаммов оставляют только те, которые в точности отвечают определению 1.ассоЬасд 11 цв 1 асггв.После этого полученные штаммы разделяют в соответствии с величиной ауксотропии с помощью следующих питательных сред: глюкоза или крахмал, неорганические соли и вода (Ц); среда С 1 с добавкой обладающего запахом соединения, содержащего атомы серы, азота или углерода, содержащегося н фекалиях (о); среда с 1 с добавкой витаминов, по-отдельности или в комбинации ; среда а с добавкой одной или нескольких аминокислот (2); среда Ц с добавкой одного или нескольких особых витаминов (; среда С 1 с добавкой триптофана (9); среда д с добавкой одной или нескольких амино кислот, содержащих атомы серы 1.В указанной питательной среде под витаминами име)отся н виду витамины А, В 1, В, В и В), никотинамид, пан тотенат кальция, витамины С и В и т,дПод особыми витаминами имеются в виду другие, отличные от перечисленных, витамины, такие как фоленая кислота, биотин и т.п. Под аминокислотами имеются в виде отличные от особых аминокислот и аминокислот, содержащих атомы серы, аминокислоты, такие как глицин, глутаминовая кислота, лизин, алании, фенилаланин, .альгинин, аспарагиновая кислота и . т,п, Под аминокислотами, содержащими атомы серы, имеются в виду цистин, цистеин, метионин, таурин и т.д.1В качестве Бггергососсцв Гаеса 11 в,используемых в предлагаемом способе,применяются микроорганизмы, добавляемые к кормам для домашних животных, Это должен быть штамм, способный продуцировать антибиотик, поскольку вырабатываемый им антибиотикподавляет рост и размножение кищеч"ных сапрофитон и косвенно способствует размножению 1.асгоЬасд 11 цв, исйользуемых в предлагаемом изобретении,1774Для выделения таких Бггергососсцв1 аеса 1 Ы в качестве источника испольэуют фекалии челонека или домашнихживотных. Выращивание осуществляют5спрн 34 39 С в аэробных условиях (втеченце 48 ч) в селективной дляБггергососсцв Еаеса 1 дз питательнонсреде, например среде БР, состоящеи10 из, г: пептон 20; глюкоза 5; КНРО4; И 1 РО 1,5; ЧаИО 0,5; ИаС 1 5;ВСР (бромкреэоловый пурпурный)0,032; агар 15; вода 1 л (рН Ь,97,2).15 Полученные Бггергососсцв Еаеса 1 гвпоцнергают исгытаниям на гемолиэ,оставля я негемолит иле скне кле ткн,из которых отбирают те, которые обладают способностью продуцироватьантибиотики, Полученным штаммом з асенают питательную среду, состоящуюиз снятого молока и сахароэы, Иэ полученных в результате бактериальныхклеток отбирают клетки, обладающиехорошим запахом и имеющие нужные покаэатели, и испольэу)от их для осуществления предлагаемого изобретенияя.типичный метод испытания штамма30 на способность продуцировать антибиотики заключается н высеванииБггергососгцв Гаеса 11 в на агаронуюпитательну)о среду диаметром 1 О мм,содержащую сахар и СаСО, выращнна 35нии в течение 48-72 ч ири 37 сС штриФхо нои разводя( больных э ародышей насреде н р )диаьном направлении отцентр среды, покрытой Бггерсососсцв1.а ос а 1. г ви и 1)одолжении ны 1)ащкнаиия40 н течиие 24-48 ч дн опрсцеления,продуциру)от ли Бггергососсцв йаеса 11 вантибиотики,Лнтибиотши, вырабатываемыеЫ гге р гос ос сцз 1: аеса 1). з, представляютсобой нестойкие к повышенным темпе ратурам аминогл)окозиды. При этом один штамм продуцирует 4-5 видов антибиотиков, обладающих узким спектром антибактериальной активности50 Эти 4-5 видов антибиотиков с узкимспектром антибактериальной активности вместе обладают такими же свойствами, как один антибиотик с очень широким спектром антибактериальной активности.Бггергососсцв Еаеса 1 дв являютсянетоксичными по сравнению с актив ностью и метаболизмом других кишечных бактерий, доходящих до 1 ОО биллионов, 1651 774Относительно негемолитического штамма Бсгерсососсцв Гаеса 11 в, продуцирующего антибиотики, "следует отметить, что он повышает активность ЬассоЬа 5 с 11.1 цв ВгГ 1 йоЬассегдцш и подавляет активность патогенных бактерий.Предпочтительными штаммами Б егерсососсця Хаеса 11 я являются штаммы, хранящиеся в Регшепсасоп КевеагсЬ 1 пвсхсцсе (Япония) под номерами национальной регистрации РЕВИ-Р 2082 и 7382 (номера международной регистрации 1 РО 14452 и 14453).В соответствии с предлагаемым по 15 крайней мере один из микроорганизмов ЬассоЬасИ 1 цв йеодогапя, ЬассоЪас 11- 1 ця с 1 еагапя и смешанный штамм ЬассоЬас 111 ця яц 1 йцгдса и ЬассоЬас 111 ця п 1 сгояцв используются в комбинации с 20 упомянутым микроорганизмом Бсгерсососсця Еаеса 11 з. Соотношение ЬассоЬас 111 цв и Бсгерсососсця Гаеса 11 я в комбинации находится в пределах25 (150:0.01):1, предпочтительно (100 0,01);1 а наиболее предпочтительно (30-0,03):1, Наиболее целесообразно использовать их в отношении О;1, которое характерно для кишечной флоры При непа средственном нанесении на слизистую оболочку кожи ЬассоЪас 111 цв используются в меньшем1количестве чем Бсгерсососсця, а именно в соотношении (1-0,03):. При использовании ЬассоЪас 111 ця вц 1 Гц г.са и ЬассоЬас 111 цв п 1 сговця для достижения того же эффекта, что и в случае ЬассоЪас 11 ця с 1 еагапя, достаточно применять смесь ЬассоЪас 111 цв вц 1 йцгдса и ЬассоЪас 111 цв псгояцв, 40 в которой бы каждый из компонентов находился в таком же количестве, как и ЬассоЬас 111 ця с 1 еагапя.Для получения сухих бактериальных препаратов ЬассоЬас 111 ця и Бсгерсо соссця Гаеса 11 я с добавкой Вдйс 1 оЬассег 1 цш и/кли Васд 11 ця достаточно смешать их в соотношении 5-15 масч. ЬассоЬас 111 ця, 10-100 масч. В 1 ГдйоЬассег 1 цш и 0,05-0,15 мас.ч. Вас 11- 50 1 ця на 1 мас ч, Бсгерсососсця Гаеса-. 11 в. При использовании комбинации четырех указанных штаммов ЬассоЬас 111 цв и Бсгерсососсця Каеса 11 в в соответствии с предлагаемым они моГут также использоваться с добавкой ВИ 1 доЬассег 1 цш, Васд 11 ця или смеси последних, При использовании В 1 Г 1 йоЬассег 1 цш дезодорирующее действие препарата сохраняется даже после прекращения приема его Вас 111 цз же повышает способность ЬассоЪасд 11 цв и БСгерсососсця перерабатывать плохо пахнущие вещества в процессе дезодорированияВ качестве В 1 ГЫоЬассег 1 цш для осуществления предлагаемого изобре тения может использоваться штамм ВдЯйоЬассег 1 цш, используемый для получения йогурта, или штамм, исполь зуемый в пищевых продуктах, В пред лагаемом изобретении используются штаммы, хранящиеся в АТСС.В качестве В 1 Г 1 доЬассег 1 цш дляосуществления предлагаемого изобретения используются штаьиы Вас 111 цвсоаяц 1 апя, представляющие собойпрекрасный бактериальный посевнойматериал для получения йогурта, штаммы Вас 111 ця соард 1 апя, представляющиесобой прекрасный бактериальный материал для ферментации сои, и т.п, Возможно также применение и другихштаммов Вас 111 ця, использующихся приполучении пищевых продуктов В 1 ГЫоЬассеп.цн предпочтительно использовать в количестве, в 1-10 раз (помассе) превышающем количество ЬассоЪасд 11 ця, а Вас 111 ця в количестве,составляющем 1-0,01% от количестваЬассоЬас 111 ця,Соотношение отдельных штаммов,полученных в результате предлагаемого выращивания штаммовсоответствуетсоотношению этих штаммов при добавленни их до выращивания в питательную среду, Однако для выращиваниянескольких штаммов, включая ВН 1 йоЬассег 1 цш, желательно подбирать такую питательную среду для одновременного размножения бактерий, в которой размножение В 1 Й 1 доЪассеггцш происходило бы с высокой скоростью, длятого чтобы размножение ВгГ 1 йоЬасСег 1 цш, протекающее с более низкой скоростью, могло бы начаться раньше других видов штаммов.Выделение Бсгерсососсця Еаеса 1 двосуществляют следующим образомВ качестве питательной среды ипользуют среду БР (20 г пептона, 5 гглюкозы, 4 г КНРО, 1,5 г КНРО,0,5 г ИаИО, 5 г БаС 1, 0,032 г ВСР,15 г агара и 1 л воды; рН 6,9-7,2),представляющую собой селективную среду для выращивания Бсгерсососсцвйаеса 11 я, Суспендируют в этой питательной среде фекалии человека илиживотных и осуществляют выращиваниен аэробных условиях при 37 вС в течение 48 ч,Кпетки, идентифицированные какБггергососсцз 1 аеса 1 гз, подвергаютиспытаниям на гемолиз и отбирают негемолитические кпеткиИспытывают отобранные клетки наспособность продуцировать антибиоти, ки и оставляют клетки, обладающие такой способностью,Отобранным штаммом засевают йогуртовую среду, состоящую из 100 г обезжиренного молока и 00 г сахароэы, ивыдерживают смесь н течение 48 ч при37 С, получая н результате йогуртПопученный йогурт испытывают ьа запах и вкус и отбирают клетки, обло.дающие хорошими запахом и вкусом,Выделение клеток из питательной среды проводят следующим образом,В случае 1.асгоЬас 111 цв с 1 еагапя.1,асгоЪас 111 ця сеос 1 огапз, 1,асгоЬас 11- 1 цз вц 1 Ецг 1 са и 1.асгоЬас 1.11 цз пдггозцв, используемых в предлагаемомизобретении, а также 8 Ггер ГососсцвГаеса 1 гв и Вас 111 ця, каждый из штаммов по-отдельности высевают н упомянутую лактозную питательную средуМКБ, а именно в среду, содержащую,г: мясной экстракт 10; пептон 1 О;экстракт дрожжей 5; лактоза 20;твин 80мп; КНРО 4. 80,2; ацетдтнатрия 5; цитрат аммония 2; МВБО 4 хх 7 Н О 0,2; Мп 804 4 Н О 0,05, провоодят выращивание при 37 С в течение72 ч и выделяют клетки с помощьюохлаждаемой центрифуги.В случае ВдЕ 1 соЬасгег 1 цш исходный штамм высевают н лактозную средуМКБ с добавкой 1 мг витамина В, 8 мгпантотената кальция и 0,1 мг биотина,опроводят выращивание при 37 С в течение 96 ч и отделяют клетки с помощью охлаждаемой центрифуги,Отдепение клеток осуществляют следующим образом,П р и м е р 1Определяют степень дезодорирования На 89 Н О и КН при использовании смеси штаммов 1.асгоЬас 11 цз и Бг.гергососсцв Гаеса 1 гв.Штаммы 1.асгоЬасг 11 цз и Бггерго"соссцз Гаеса 1 гз засевают в среду, содержащую г: мясной экстракт 5; пептон.5; глюкоза 1; СаСОЭ 1; фекалии, содержащие 0,5 г Яа Б 9 Н О или0,5 г 111, 1, и осущестнляют выращивание для определения уменьшения содержания На 8 9 НО и Я, Полученные результаты приведены н табл,:1Для сраннения опыты повторяют втех же условиях, но вместо смеси1.асгоЪасг 11 цв и Бггергососсцв 1 яеса 1 гв используют, только штаммы 1 асгоЬас гегцш, Полученные результаты приведены в табл, 2Как видно из табл.2, при использовании комбинации 1.асгоЬас 111 цв иБГгерГососсцв Каеса 11 я способностьуснаинать обладающие запахом веществавозрастает на 10207. по сравнению стем случаем, когда используются однитолько 1.асгоЪас 111 цв. Кроме того, 1,асгоЬас 11 ця с 1 еос 1 огапв поглощают обладающие запахом вещества в большей снепени, чем 1.асгоЬас 111 цв с 1 еагапз.Первые потребляют ИаБ 9 Н, О и ИНполностью в течение 72 ч, тогда как25 1.ассоЬас 111 ця с 1 еагапя их полностьюне потребляют, 1.асгоЬас 111 цв виНог 1 са и 1.асгоЬас 111 цв п 1 ггозцв такжене потребляют полностью обладающиезапахом нещества,30 Использовавшиеся н опытах штаммыперечислены в табл, 3.Приведенные в табл.3 штаммы а и оБггергососсця Гаеса 1 я продуцируютантибиотики. Штаимы О и с 1 БГгергососсцв Гаеса 11 я не продуцируют антибиотикон. Штамм А Вас 111 цв представляет собой семенные клетки для получения йогурта (Васг 11 цв соаац 1 апя).Штамм В Вас 111 ця представляет собой40 семенные клетки для ферментации сои(Вас 111 ця яцЬг 111 я),П р и м е р 2Опыты по дезодорации проводят с использованиемштамма ЕЕКМ-Р В 7382, н дальнейшем45 называемого штамм а (Бггер гососсцзГаеса 11 з), и штаммон 1 ГО 14253 и4450.К 1 г свежих экскрементов человека добавляют 9 мп изотонического50 Раствора хлористого натрия, К однойчасти (смесь 1) полученной таким образом смеси добавляют 1 мп растворас культурой клеток ЬасгоЬась 11 цвс 1 еагапз, а к другой части (смесь 2)- 1 мп раствора культуры клеток 1 асйоЬасг 11 ця с 1 еагапв и 0,5 мп растворакультуры клеток штамма а, после чего обе порции выдерживают при 37 Сов течение 48 ч, 11 165На основании оценки интенсивностизапаха делают вывод, что степень дезодорации выше в серии опытов сосмесью 2, а количество недезодорированных фекалий вдвое меньше, чем вслучае смеси 1Прн этом в последнемслучае дезодорацию фекалий не наблюдают в двух из десяти опытов.При оральном введении одних толькоЬасгоЬас 11 ця с 1 еагапз в комбинациис штаммом р установлено, что дезодорирующий эффект выше (степень дезодориоования определяют путем анализавыделяющихся фекалий) в том случае,когда используется комбинация ЬасгоЬас 111 цз со штаммом О, причем приэтом всегда имеет место дезодорирование.Результаты этих опытов (1 п чиччо)свидетельствуют о том, что Ьасг.оЬас 111 цз с 1 еагапз, а также ЬасгоЬас 111 цз в сочетании со штаммом с сохраняют свою активность в кишечнике, вкотором присутствуют Фекалии (содержащие микроорганизмы, вызывающиегниение, большей частью анаэробные,Ив,количестве до 1,5 ф 10 клеток на 1,фекалий), Хотя значительный эффектполучен как при использовании толькоЬасгоЬас 111 цз с 1 еагапя, так и в случае комбинации их со штаммом д,тем не менее комбинация ЬасГоЬасх 11 ця,с 1 еагапя со штаммом более эффективна Под эффективностью имеется ввиду высокая степень дезодорирова"ння и уменьшение числа случаев отсутствия дезодорирующего действия,Описанные опыты относятся к использованию ЬасгоЬас 111 ця с 1 еагапз,аналогичные сравнительные опыты про".водят с использованием Ьасг.оЬас 111 цяйеойогапз и смеси ЬасгоЪас 11 цз зц 1 Йцгса с ЬасгоЬас 111 цз п 1 ггояця(штаммы 1 р 0 14255, 14256, 14252,14253), а именно сравнивают действиеЬасгоЪасд 11 цз йеойогапя и ЬасгоЪас 111 цз йеодогапз в комбинации соштаммом О, а также смеси ЬасгоЬас 11 ця зц 1 Ецгса и ЬасгоЬас 111 цзп 1.сгояця с этой же смесью, но в комбинации со штаммом а,При этом ту же тенденцию, как ив случае ЬасгоЪасд 11 ця с 1 еагапя,наблюдают. при использовании смесиЬасгоЬас 111 ця яц 1 йцгдса и ЬасгоЬась 11 ця п 1 ггаяця.Эффект действия штамма а больше вслучае Ьас гоЬас 111 ця йе ойогапя, а1774 именно при использовании штамма Оштамм Яггерсососсця Еаеса 11 з, лродуцирующий антибиотики, оказывает значительно более сильное действие в отношении уничтожения плохих запахов не только при оральном введении, но и при наружном применении препарата в области лобка у женщин.П р и м е р 3Получение йогурта,При получении йогурта путем ферментации Ьас гоЬас 111 ця с 1 еагапз и Яггергососсця Гаеса 1 дя питательную среду для посевных клеток, содержащую 30 г обезжиренного молока и 3 г карбоната кальция (рН 7,0), разделяют на две части и стерилизуют, После этого засевают каждую из порций указанными штаммами и осуществляют выращивание при 37 фС в течение 24 ч, по лучая в результате посевные клетки ЬасгоЬ ас 111 ця с 1 еагапя и Я гге р госос" 5 10 5 20 сцз Гаеса 1 хя (количество клеток составляет 1,510 кл,/мл для Ьасго 925 Ьас 111 ця с 1 еагапз и 2 109 кл./мп дляБггер гососсця Гаеса 11 з),Параллельно стерилизуют 1000 млсреды для получения йогурта, состоящей из 100 г обезжиренного молока,30 100 г сахарозы и 2 г агара,К приготовленной таким образомсреде для получения йогурта добавляют 10 мл посевных клеток ЬасгоЬас 11- 1 цз с 1 еагапз, О, 8 мл посевных клетокЯггергососсця Гаеса 11 з, осуществляютвыращивание при 37 С в течение 24 ч,получая в результате йогуртПолученный йогурт содержит2,51 О кл,/мл ЬасгоЬас 111 ця с 1 еагапз40 и 2,510 кл./мп Яггергососсцз Еае".са 1 хя . Соотношение между ЬасгоЪась 1- 1 ця с 1 еагапз и Бсгергососсцз Гаеса. 1 дз равно 10:1Этот йогурт вводятчеловеку и животным,1При получении йогурта ферментацией ЬасгоЪасх 11 ця с 1 еагапя, Яггергососсцз Каеса 1 ьз и ВдКйоЬасгег 1 цшпосевные клетки ЬасгоЬасПця с 1 еа 50 галя и Яггергососсцз Гаеса 1 дз получают путем приготовления питательнойсреды для посевных клеток, посевакаждого иэ штаммов в питательнуюсреду и выращивания при 37 С в течеоние 24 ч, В 1 ЕЫоЪасгег 1 цш засеваютв питательную среду для посевныхклеток, состоящую из 30 г обезжиренного молока,г цистеина, 1 мг витамина В, 8 мг пантогената кальция и,165 О, г биотина, и осущест.пяют выращивание при 37 С в течение 72 ч.Параллельно стерилизуют 200 дп среды дпя получения йогурта, состоя щей из 100 г обезжиренного долока, 100 г сахарозы, 2 г агара и 1 цистеина, и фильтруют ее п стерильных условиях а После этОГО к при 1 Офф товленной среде добавляют 1 дг вита" мина В, 8 мг пантогената кальция и О, 1 дг биотина.К пол уч енной таким об раз од среде добавляют 10 дл посевных клеток В й ЙОЬас еег цш и о существ пи ют выращивание при 37 С в течение 36 ч,оЗатеи к питательной среде одновременно,цобавляютО де 1 посевнь 1 х клеток 1 асгоЬас 11 цз с 1 еагапз и 0,8 мп посевных клеток Яггереососсцз йаеса 1 з и продоежают выращивание при 37 С в течение 36 ч, .Еолучая в результате йогурт.Полученный такид образом йогурт содержит 2 1 О кл./дп 1.асг,оЬас 11 ця с 1 еагапя, 2 08 кл./и 1 ЯГгерГососсцз 1 аеса 1 в И,З О 7 кл,/мл Ве.ЕОЬасгегцп, Соо Т 11 ошение между 1,асеоЬас 1- 1 ця с 1 еагапвЯггергососсцз Гаеса 1 в и В ,1 обасеегпеп равно 10 5П р и д е р 4 Получение сухих препаратов.Для получения полусухих препаратов засевают по отдельно сти каждыд штаммом 1,асеоЬас 11 цз с 1 еагагя и Яагер ососсцз аае са 1 в описанную лактозную питательную срееу 1 ЯЯ, а также штаммод В 1 ОЬас гег 1 цш соот "ветству 1 ощую питательную среду и осу ществпяют выращивьп 1 ие каждой культу ры К О г влажнь 1 х клеток, отобран ных путем центрифугирования, добавляют по 300 г крахмала, высушенного при повышенной температуре до остаточкой влажности 0,2%, и 1 г цистеина и перемешивают компоненты, получая в результате препарат с конеч ной влажностью 2% или Еенееа 11 олучение препаратов, содержащих ЬасоЬас 11 цз с 1 еаг"пя и Ясгергососсця Еаеса 1 я, ведут путед смешения высушенных и сдешаиных с крахдалод 10 г 1,асгоЬас 11 ця с 1 еагапв и 1 г ЯГгергососсця Гаеса 1 з. Полученным препаратод заполняют пузырьки, герде тически закупоривают их в атмосфере азота и хранят в темном прохладнодместе,774 4 Получение препаратов, содержащихЬасгоЬ ас 11 цв с 1 еагапз, Я Егер Мсогсцз алвесая и В з 11 ОЬасЫгЕш, в. "дут путем смещения 11 ысугеп 1 шЕХ и сдешан 11 ых с крахдЗ,1".ъ Опис: 1 Бым Образ од1 О Г Т,ас ГОЬас 11 ця сеаапзЯгергососсцв Гаеса 1 в и 100 г ВКооассег 11 пе. Полученныь; препаратомзаполняют пузьерьки, герметично закупоривают их в атдосфере а"ота и хранят в темном прохладном месте,Дпя получения сухих препаратовзасевают по отдельности каждым штаммод 1.ас 1:ОЬас 11 цз с 1 еагапз и Яггер.ОСОССЦЗ ЙаЕСа 1 З ОПИаан 1 ЕУЮ ППТаТЕЛЬафную среду ВЯ, а также штаммом ВЖ. -.".Ь с е цш соответствующую пЕГЕательиук среду : осуществляют выращивание 20 каждой куят туры, 1 о 1 О г ве 1 ажньех клеток ка дога;Ез ште 1 в 1 он, .отобранныхпут,.д 11 е 11 тр 1 фугцвования, дис 1 ергирую; вОО дл раствора, содержащего1% лактозы и 0,1% цистина, и получен 25 пую дисперсию высушивают с помощьюсубпЕиационпой сушк 1111 олучение препаратов, содержащих1,асЕОЬас 11 ця с 1 еагапз и Ясгергососцз Гаеса 1.я, ведут путед смешения 30 полуце 111 ых описанныд образом 10 гпрепарата живых кпеток 1.асгоЬас 11 цвС 1 ЕаГапя И 1 Г ПрцЕараТа ЖИВЫХ КЛЕаток Я егер лососе 1 з Гаеса 1 я, 1 олученныд препаратом заполняют гдпулы ихрапят пх.1 Олучение препаратов, содержащихВас гоЬа с 11 ця с 1 еа гап з, Я г ер гос оссиь аеса 1 з и ВеЙОЬас Гегцш, ведутпутам сдсше 1 гия полученных описаннымспособод 10 г 1.асгоЬас 11 цв с 1 еагапя,1 г Яггер,ососсез 1"аеса 1 я и 100 гВ 1 : сОьа с е г 1 цпе, из полученного пре"парата готовят таблетки, которые хранят в пузыр 1:ках.45П в и д е р 5. Смешанную культуру 1,асгоЬас 11 цз с 1 еагапя, 1 ассоЬас.11 цз ЙеоОапя и смешанный штамм1 асгоЪас 11 цв вц 1 цгса и/или 1.асгоЪас 11 ця пгговцз в равных количест 50 вах и Ясгергососсця Йаеса 1 я и/илиБас 11 ця Ревев получают с использоваЕеиед среды, состоящей из 1000 г молока или смеси долока и соевого сока, 100 г сахарозы и 21-агара, После 55 стеригп 1 зации среды указанные штаддыинокулируют одновременно в среду втребуемом соотношении клеток и получают культуру при 37 ОС в течение24 ч для подготовки йогурта, содер1651774 16 ТаблицаНаэ 911 0 500 1.ас соЬас).11 цв ер ососа 3). в 28 24 с 1 еатацв6587658865896590ц 1 сговцв73857386в ц 1 Е цг). са73837384194627422779278027812782 225 ррв)180190110 280 220 225 80 225 80110 90 390 300 ЗОО 250 400 280 300 225 330 225 30035 рр Оа Й 530 520 400 280 400 280 225 225 5 О 510 515 6 .О6200О 400 400 180 140 7. 25 225 180 ) ) ) 22022000 280 280 30 20 80 80 520 580 520 580 180 40 14040 225 90 225 90 180 70225 85 жащего ферментированное молоко, смесьмолока и соевого сока,Смешанную культуру штаммов, используемую в предыдущем случае с добавлением В 1 ЯйоЬасГег 1 цш получают в5упомянутой среде, в которую добавляют 1 г цистина, 1 мг витамина В28 мг патогината кальция и 0,1 мгбиотина в стерильных условиях, причем ВгййоЬасгегцш культивируютранее при 37 С в течение 36 ч, затемдругие штаммы засевают одновременнои культивирование продолжают при 37 Сов течение 36 ч для подготовки продукта,Полученный предлагаемый продуктобеспечивает лучший вкус и запах,чем сравниваемый образец, который получен при ферментации только 1 асГоЬас 111 цзЧерез 8 ч после инокуляции указанных 1 асгоЬасд 11 цз и/или Васг 11 цз всреду инокулируют Яггергососсцз Еаеса 1 гз, Культивирование осуществляют 25при 37 С в целом в течение 48 ч, Полученный продукт обеспечивает лучшийвкус и запах по сравнениюс продуктом, в котором указанные четыре штам"ма были засеяны одновременноЧерез 24 ч после инокуляции ВН. -с 1 оЬасГег 1 цш инокулируют 1.ассоЪас 3.11 цзи/или Вас 3.11 цз, Спустя 8 ч инокулируют в указанную среду ЯГгергососсцзЙаеса 11 з. Купьтивирование проводятпри 37 С в течение 48:ч, Полученныйо 35таким образом продукт обеспечивает лучший вкус и запах по сравнению с продуктом, в котором укаэанные четыре штамма быяи засеяны одновременно,Предлагаемый продукт может быть использован как добавка к корму, предназначенному для кормления животных, в том числе кошек, собак, поросят, а кроме этого, и для птиц,Формул а из об рет ения1Сухой бактериальный препарат для получения продукта типа йогурт, содержащий молочнокислые палочки ЬасгоЬас 111 цз и молочнокислые стрептококки ЯГгергососсцз, о т л и- чающий с я тем, что, с целью придания целевому продукту повышенного дезодорируюцего эффекта, он содержит из молочнокислых палочек 1.асгоЬасх 11 цз по крайней мере один штамм 1.ас гоЪас 111 цз йеойогапз, 1,асгоЬас 11 цз с 1 еагапз и смешанную культуру 1,асгоЬасд 11 цз зц 1 йцгдса РЕКИ Р 7383 или ГЕКИ Р 7384 и 1,асгоЬас 111 цз пхггозцз ГЕКИ Р 7385 или ГЕКИ Р 7386, из молочнокислых стрептококковБггерсососсцз Йаеса 11 з РЕКИ Р 2083 или Р 7382, способные продуцировать антибиотики при соотношении культур (150-0,01):1:2 Препарат по:п,1, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что он дополнительно содержит 0,5-0,15 мас.ч, Васд 11 цз соа 8 ц 1 апз или Вас 111 цз з 1 Ъгд 1 з и/или 10-100 мас.ч, ВхйдйоЪасгегцш зр. АТСС 11146 или АТС 11863.1651774 1 а Я п П ц а 2 ас 111 пе 50 ррах 6587 с 1 еасап 6588 6589 6590 7385 7386 7383 7384 1.,п 1 ссоао п 11 исьс 94 Пеойогап 3010000 742 2779 2780 2781 2 782 Таблиц РЕКИ ТРО:А Т с гоЬас 111 оеагапв 6587 6589 6590 14 ЬасгоЬас 11 пвае ойогапя 1946 2742 2779 2780 45 27 Ьас гоЬ ас 11П СГО 8118 1425 1425 380 386 ЬассоЬас 111 иввп 1 йиг 1 са 7383 384 255 256 сгер гососспяаеса 11 в 2082( ягга 1 п) 524453 6569 ( 14506 О 3) 1114611863 ггадп)ясга 1.п)вггадп) 1 ЫЙоЬас гегхиш гагп 2930(В ягга 1 п номера, приведенные на однои лини дному и тому же штамму, Используемое азвание приведено в скобках после рео номера,Регистрационныеотносится к осокращенное нгистрационног р и 300 3 ОО .75 О 510 515 400 200 5 О 250 250 200 300 250 250 25 515 520 300 300 250 ррв 200 200 100 55 525 250 250 400 300 250 р 350 250 200 350 250 200 300 150 125 400 300 250 400 300 250 515 590 625 530 650 650 200 50 0 150 5 д 0 250 100 0 70 100 0 200 80 О 250 100 0