Способ подготовки замороженных клеток костного мозга к использованию

Номер патента: 1441504

Авторы: Савчик, Обозная

Формула

СПОСОБ ПОДГОТОВКИ ЗАМОРОЖЕННЫХ КЛЕТОК КОСТНОГО МОЗГА К ИСПОЛЬЗОВАНИЮ, включающий замораживание клеток при температуре жидкого азота, размораживание, последующее добавление цитохрома С, отличающийся тем, что, с целью повышения числа жизнеспособных клеток, в размороженную суспензию дополнительно вводят холин-хлорид в концентрации 0,9 1,1% а цитохром С берут в концентрации 0,0025 0,0027%

Описание

Изобретение относится к медицине и может быть использовано при подготовке консервированных биологических материалов к использованию, в частности ядросодержащих клеток костного мозга.
Целью изобретения является повышение числа жизнеспособных клеток.
Способ осуществляют следующим образом. Замороженную клеточную взвесь размораживают на водяной бане при 40-42оС, затем переносят в стеклянный флакон и добавляют цитохром С в конечной концентрации 0,0023-0,0027% и холин-хлорид в конечной концентрации 0,8-1,2% Выдерживают 20-30 мин в холодильнике при 4оС, после чего определяют процент сохранившихся в жизнеспособном состоянии клеток.
П р и м е р 1. Ампулы с костным мозгом, замороженным до -196оС, помещают на 30 с в водяную баню с температурой 42оС, для равномерного размораживания ампулы подвергают покачиванию со скоростью 2 качания в 1 с в вертикальном направлении. После этого взвесь переносят в стеклянный флакон, в который добавляют цитохром С до конечной концентрации 1% и ставят на 20 мин в холодильник при 4оС. После этого определяют жизнеспособность клеток по эозиновой пробе и их количество в 1 мкл суспензии.
П р и м е р 2. Ампулы с замороженным костным мозгом помещают на 30 с в водяную баню (42оС), где размораживают при постоянном покачивании. После этого суспензию переносят в стеклянный флакон, добавляют цитохром С и холин-хлорид в конечных концентрациях 0,0025 и 1% соответственно и ставят на 5 сут в холодильник (4оС).
П р и м е р 3. Ампулы с замороженным костным мозгом помещают в 30 с в водяную баню (42оС), где размораживают при постоянном покачивании. После этого суспензию переносят в стеклянные флаконы, в которые вводят цитохром С в различных концентрациях: 0,001, 0,0023, 0,0025, 0,0027 и 0,025% Холин-хлорид добавляют во все флаконы до конечной концентрации 1%
П р и м е р 4. Ампулы с замороженным костным мозгом помещают на 30 с в водяную баню с температурой 42оС, где размораживают при постоянном покачивании. После того как суспензию размораживают, ее разливают в стеклянные флаконы, в каждый из которых вводят цитохром С до конечной концентрации 0,0025% а затем добавляют холин-хлорид в различных концентрациях: 0,5, 0,8, 1,0, 1,2, 2,0%
Жизнеспособность клеток в суспензии, подготовленной предлагаемым способом, на 21% выше, чем в суспензии, подготовленной известным способом.
Через 5 сут жизнеспособность клеток в суспензии подготовленной предлагаемым способом, на 16% выше по сравнению с прототипом.
Таким образом, предлагаемый способ обеспечивает жизнеспособность 85% клеток.
Изобретение относится к медицине, предназначено для подготовки консервированных биологических материалов к использованию, в частности ядросодержащих клеток костного мозга. Цель изобретения повышение числа жизнеспособных клеток. Для этого замороженную клеточную взвесь размораживают на водяной бане при 40 42°С, затем переносят в стеклянный флакон и добавляют цитохром С в конечной концентрации 0,0023 0,0027% и холинхлорид в конечной концентрации 0,8 1,2% Выдерживают 20-30 мин в холодильнике при 4°С, затем определяют процент сохранившихся в жизнеспособном состоянии клеток.

Заявка

3798558/14, 08.10.1984

Институт проблем криобиологии и криомедицины АН УССР

Обозная Э. И, Савчик А. Б

МПК / Метки

МПК: A01N 1/02

Метки: клеток, подготовки, замороженных, использованию, мозга, костного

Опубликовано: 25.07.1995

Код ссылки

<a href="http://patents.su/0-1441504-sposob-podgotovki-zamorozhennykh-kletok-kostnogo-mozga-k-ispolzovaniyu.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ подготовки замороженных клеток костного мозга к использованию</a>

Похожие патенты