Способ определения кватерона в фармацевтических препаратах

(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КВАТЕРОНА В ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТА Изо ескойния кватегпаратаханическиронапутем лориметого раст тами с ием по риро вора ретение относится к промышленности, в ц определения кватер ческих препаратах. стен способ определ фа рма це втичес ких пре бработки пробы неорпоследующимлученного цве Известный способ предусматривает обработку пробы препарата раствором гидроксиламина в едком натре, Через 30 мин в реакционную смесь добавляют раствор соляной кислоты и раствор хлорида окисного железа. В результате реакции образуется операционный гидроксилат железа, Количественное содержание четвертичного амина определяют, го измеряя оптическую плотность окрашенного продукта реакции на фотоэлектро" колориметре, Относительная ошибкамстодд1094. Однако известный способ анализа требует выполнения пяти аналитичес" ких операций, предшествующих фотометрированию, продолжительностью 50 - 60 мин, Недостаточно высокая воспроизводимость, реакция требует строгого соблюдения температурного режима. Способ характеризуется малой специфичностью, так как реакцию образова-. ния гидроксамовых кислот и последующего получения окрашенных гидроксаматов железа дают многие другие соединения, не являющиеся солями четырех-замещенного аммониятретичные амины, антибиотики и т,п,) .Цель изобретения - повышение спе". цифичности и ускорения способа,Указанная цель достигается тем, что согласно способу определения кватерона в фармацевтических препаратах путем обработки пробы неоргани 4 ескими с последующим колориметрмрованием полученного цветного раствора, пробу обрабатывают оксипроизводным хлор938150 3анила при рН 11,4 - 11,6, затем добавляют в реакционную смесь хлороформ, хлороформный слой отделяюти колориметрируют.Способ осуществляется следующим образом.Водный раствор четвертичного амина кватерона обрабатывают раствором хлоранила при рН 1 1, 4- 11, 6, поддерживают добавлением гидроокиси натрия. 1 ф При добавлении к хлороформному раст" вору хлоранила водного раствора щелочи образуется диоксипроизводное соединение хлоранила, переходящее в водный слой. При последующем добавлении 1 в реакционную смесь четвертичного амина в водном слое происходит образование нового интенсивно окрашенного в фиолетовый цвет комплексного соединения четвертичного амина и хлорв анила которое извлекается хлороформом при рН 11,4-11,6.Интенсивность окрашенного хлороформного слоя, содержащего продукт реакции, прямо пропорциональна содер-жанию четвертичного амина.Колицественное определение четвертичного амина- кватерона проводят фотометрическим методом по предварительно построенному калибровочному графику. Оптическую плотноств окрашенного раствора измеряют на фотоэлектроколориметре (ФЭК - 568) в кювете с толщиной рабочего слоя 20 мм, светофильтр У 6 (Л =540+10 нм). В качестве35 раствора сравнения применяют хлороФорм (слепой опыт).Построение калибровочного графика осуществляют следующим образом.Из точно приготовленного 0,14-ного10 раствора препарата в воде готовят серию стандартных растворов 1 - 4 и 5 мл исходного 0,1-ного раствора ква-, терона переносят в делительные воронки с 5 мл 0,14-ного хлороформного45 раствора реактива, обработанным 0,8- 1,0 мл 0,1 н раствора едкого натра. Общий объем водной фазы доводят до 6 мл дистиллированной водой.Образующийся окрашенный комплекс кватерона с аци-Формой хлоранила из-. в влекают хлороформом дважды по 10 мл. Экстракт переносят в мерную колбу емкостью 25 мл и доводят общий объем окрашенного раствора хлороформом до метки. Измерение оптической плотности раствора хлороформом до метки, Измерение оптической плотности растворов стандартной серии проводят с пофмощью фотоэлектроколорюетра ФЭКИв кювете с толщиной рабочего слоя20 мм на фоне хлороформа (слепойопыт), По рез уль татам измерения опт ической плотности строят калибровочныйграфик и рассчитывают уравнение калибровочного графика: Д =, 4,0 Х С ++ О, 0075.П р и м .е р 1. Количественное определение кватерона при рН 11,4 в нижней области графика. Содержание кватерона 1 мг в пробе.Навеску 0,5 г препарата растворяютв дистиллированной воде в мерной колбе 10 мл и доводят водой до метки,1 мл приготовленного раствора вносятв делительную воронку с 5 мл реактива, обработанным 0,8 мл 0,1 н раствора едкого натра. Общий объем роднойфазы доводят до 6 мл водой. Окрашенный комплекс извлекают дважды хлороформом по 10 мл. Экстракт собираютв мерную колбу 25 мл и доводят общийобъем раствора до метки хлороформом.Оптическую плотность окрашенного ра".створа измеряют с помощью фотоэлект-,роколориметра (ФЭКИ) в кювете столщиной рабочего слоя 20 мм, присветофильтре М 6 Л = 540 нм, на фонехлороформа (слепой опыт).Дальнейшее определение кватеронапроводят по уравнению калибровочногографика, построенного методом наимень.ших квадратов.Результаты количественного определения приведены в табл. 1,П р и м е р 2. Количественное оп-.ределение кватерона при рН 11,4 воптимальной области графика, Содерфжание кватерона 3 мг в пробе.Навеску 0,05 г препарата растворяют в дистиллированной воде в первойколбе 50 мл и доводят водой до метки, 3 мл приготовленного растворавносят в делительную воронку с 5 млреактива, обработанным 0,8 мл 0,1 нраствора едкого натра. Общий объемводной фазы. доводят до 6 мл водой.Окрашенный комплекс извлекают дважды хлороформом по 10 мл. Экстракт собирают в первую колбу 25 мл и доводят общий объем раствора до меткихлороформом. Оптическую плотностьокрашенного раствора измеряют с по"мощью фотоэлектроколориметра (ФЭК 56 И) в кювете с толщиной рабочегослоя 20 мм, при светофильтре й 6Л = 540 мм, на Фоне хлороформа (слепой опыт).938150 6го графикапостроенного методом наи"меньших квадратов.Результаты количественного определения кватерона приведены в табл.П р и м е р 5. Количественное определение кватерона при рН 11,6 в оптимальной области графика. Содержаниекватерона 3 мг в пробе.Навеску 0,05 г препарата растеоря -ют в дистиллированной воде в мернойколбе 50 мл и доводят водой до метки,3 мл приготовленного раствора вносятв делительную воронку с 5 мл реактивва, обработанным 1 мл 0,1 н раствораедкого натра. Общий объем водной фазы доводят до 6 мл водой. Окрашенныйкомплекс извлекают дважды хлороформомдо 10 мл, Экстракт собирают в мернуюколбу 25 мл и доводят общий объемраствора до метки хлороформом. Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют с помощью фотоэлектроколориметра ФЭКИ в кювете с толщиной рабочего слоя 20 мм, при светофильтре У 6 Х = 540 нм, на фоне хлороформа (слепой опыт).Дальнейшее определение кватеронапроводят по уравнению калибровочногографика, построенного методом наименьших квадратов,Результаты количественного определения кватерона приведены в табл, 5. Дальнейшее определение кватеронапроводят по уравнению калибровочного , графика, построенного методом наименьших квадратов.Результаты количественного опредепения кватерона приведены в табл, 2.П р и м е р 3. Количественное определение кватерона при рН 11,4 вверхней области графика. Содержаниекватерона 5 мг в пробе.Навеску 0,05 г препарата растворяют в дистиллированной воде в мернойколбе 50 мп и доводят водой до метки,5 мл приготовленного раствора вносяте делительную воронку с 5 мл реактива,15обработанным 0,8 мл 0,1 н раствораедкого натра. Общий объем водной фазы доводят до 6 мл водой, Окрашенныйкомплекс извлекают дважды хлорофор"мом по 10 мл, Экстракт собирают в мер-гоную колбу 25 мл и добавляют общий объем раствора до метки хлороформом. Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют с помощью Фотоэлектроколориметра ФЭКИ в кювете с тол щиной рабочего слоя 20 мм, при светоФильтре У Е Л = 540 нм, на фрне хлоро. Формного раствора (слепой опыт).Дальнейшее определение кватерона проводят по уравнению калибровочного зц графика, построенного методом наименьших квадратов.Результаты количественного определения кватерона приведены в табл. 3. 35П р и м е р 4, Количественное определение кватерона при рН 11,6 в нижней области графика, Содержание кватерона 1 мг в пробе.Навеску 0, 05 г препарата растворяе ют в дистиллированной воде в мерной колбе 50 мл и доводят водой до метки 1 мл приготовленного раствора вносят в делительную воронку с 5 мл реакти ва, обработанным 1 мл 0,1 н раствора едкого натра. Общий объем водной фазы доводят до 6 мл водой. Окрашенный комплекс извлекают дважды хлороформом до 10 мл. Экстракт собирают в мерную колбу 25 мл и доводят общий объем раствора до метки хлороформом. Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют с помощью фотоэлектроколориметра ФЭКМ в кювете с толщиной рабочего слоя 20 мм, при светофильтре У 6 Х = 540 нм", на фоне хлороформа (слепой опыт ),Дальнейшее определение кватерона проводят по уравнению калибровочноП р и и е р 6. Количественное определение кватерона при рН 11,6 вверхней области графика. Содержаниекватерона 5 мг в пробе.Навеску 0,05 г препарата, растворяют в дистиллированной воде в мернойколбе емкостью 50 мл и доводят водойдо метки. 5 мп приготовленного раствора вносят в делительную воронку с5 мл реактива, обработанный 1 мл 0,1 нраствора едкого натра. Общий объемводной фазы вводят до 6 мл водой. Окрашенный комплекс извлекают дважды хлороформом по 10 мл Экстракт собирают в мерную колбу 25 мп и доводят общий объем раствора до метки хлороформсм. Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют с помощью фотоэлектроколориметра ФЭКМ в кювете с толщиной рабочего слоя 20 мм, при светофильтре У 6 А = 540 нм, на фоне хлороформа (слепой опыт),Дальнейшее определение кватерона проводят по уравнению калибровочно-го графика, построенного методом наименьших квадратов.7 93815Результаты количественного определения кватерона приведены в табл.6П р и и е р 7. Количественное определение кватерона, при рН 11,6 в верхней области графика, Содержание ,кватерона 5 мг в пробе.Навеску 0,05 г препарата растворя. ют в дистиллированной воде в мерной колбе емкостью 50 мл и доводят водой до метки,5 мл приготовленного раствора 0 вносят в делительную воронку с 5 мл реактива, обработанным 1 мл 0,1 н раствора едкого натра. Общий объем водной фазы доводят до 6 мл водой. Окрашенный комплекс извлекают хлоро" Формом дважды по 10 мл. Зкстракт собирают в мерную колбу 25 мл и доводят общий объем раствора до метки хлороформом. Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют с помощью Фотоэлектроколориметра ФЗКМ в кювете с толщиной рабочего слоя 20 мл, при светофильтре У 6 А =540 нм, на Фоне хлороформа (слепой опыт),Дальнейшее определение кватерона проводят по уравнению калибровочного графика, построенного методом наименьших квадратов.Результаты количественного определения кватерона приведены в табл. 7.П р и м е р 8. КбличественЭое определение кватерона при рН 11,5 в 0,63 раствора; 0,5 мл исследуемого раствора вносят в делительную воронку с где Х - галоген или органическаякислота, радикал.Химическими и физико-химическими методами установлено, что реакция между четвертичным амином кватероном и хлоранилом в условиях ее .проведения протекает в молярном отношении 1:1, что подтверждено методами изо 0 85 мл реактива, обработанным 0,9 мл 0,1 н раствором едкого натра. Общий объем водной фазы доводят до 6 мл . водой. Окрашенный комплекс извлекают хлороформом дважды по 10 мл. Зкстракт собирают в мерную колбу емкостью 25 мл и доводят общий объем раствора до метки хлороформом. Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют с помощью фотоэлектроколоринетра ФЗКМ в кювете с толщиной рабочего слоя 20 мм, при светофильтре У 6 Л =540 нм на фоне хлороформа (слепой опыт),Определение кватерона проводят по уравнению калибровочного графика.Результаты количественного опре" деления кватерона в лекарственной форме 0,64-ном растворе, приведены .в табл, 8.Как видно из приведенных в таблицах данных количественного определе" ния кватерона в укаэанном интервале концентрация линейной зависимости, относительная погрешность анализа чистого препарата в оптимальной области не превышает + 0,504 и в случае анализа лекарственной формы - +1,053. Зкстракция хлороформом позволяет выделить только окрашенный продукт реакции, исклочает влияние на оптическую плотность исходных продуктов реакции, а также промежуточных соединений, образующихся в результате реакции по схеме. 1молярных серий и насыщения, В химическом отношении хлоранил в данной реакции ведет себя, как одноосновная кислота, способная образовывать окрашенные комплексные типа хлоранилами-.нов с бесцветными растворами препаратов производными четырехзамещенного аммония. Спектрофотометрические иссле9 938150 10дования окрашенного продукта покаэы- Предлагаемый способ прост, обладавают, что максимум светопоглощения ок- ет высокой точностью, селективностЬ, рашенного раствора препарата находит- обеспечивает снижение числа трудоемся в области 540 нм, хлоранил в дан- ких аналитических операций и повыше ной области абсорбционной способнос- % ние в 2 раза точности определения, тью не обладает. Оптицеская плотностьокрашенного хлороформного извлечениястабильная в течение 5-6 ч. Для извлечения окрашенного продукта на 5 млводной фазы достаточно 1-2 кратнойэкстракции по 1 мл хлороформом илидихлорэтаном. Найденомг/мл в пробемг 3 Метрологические данные Содержание в пробе,мг/мл(на 25 мл) Навеска,Взято наанализ,мг 0,173 О, 0414 1,0350 100,49 6= 0.35 Зр= 0,97 О, 1 76 О, 0421 1, 0525 99 ф 48 0,168 0,0401 1,0025 98,67 М = 99,52+0,97А = +0,974 Таблица 2 Иетрологические данные Найдено иг/мл в пробе мг 4Содержание в пробе,мг/мл (на 25 мл) Взято наанализ,мг 99,623 0,493 0,1214 3,0350 99,97 0,1214 0,0506 3, 0360 О, 0485 0,0510 0,470 0,1156 2,8900 99,31 0,495 0,1219 3 0475 99,59 0,41 0,18 0,1164 0,1224 2,9100 3,0600 0,50 0,485 0,1194 2,9850 100,100,512 0,1261 3,1525 99,14 0,0497 . 2,9820 0,1193 0,1272 О, 0530 3,1800 99,6210,50Т 0,5 И Т аблица 3 Иетрологицеские данные Найдено иг/мл в пробе мг 40,1981 4,95251,2 056 5, 14000,2081 5,2025о 2006 5,о 15 о0,2076 5,1900 99,45100,3999,1099 70100,19 0,800 0,830 0,840 0,810 0,838 4 е 9800 5,1200 5,2500 5,0300 5,1800 0,1992 0,2048 0,2100 0,2012 0,2072 Эр= М = А = в О, 0512 0,0502 0,0515 О, 0529 О, 0508 0,04980,0512 .0,0525О, 053О. 0618 1, 0240 1,.0040 1,0300 1,0580 1, 0160 О, 0410 О, 0402 О, 0412 0,0423 0,0406 Предлагаемый способ может бытьиспользован в практике контрольноаналитицеских лабораторий, на фарма 1 е цевтических заводах, биохимических,судебно-химических лабораторий и.других аптечных учреждениях.Таблица 0,170 0,0406 1,0150 99,12 Х = 99,5.2 Ж0,168 0,0401 1,0025 99,85 . б = 0,70 99,7730 530,240,6799,77+0,6714 938150 Таблица Метрологические данные Навеска,гВзято на Содержание в пробе,мг/млМет ролог ическ ие данные+1,0699,47+1,05 0 5 формула изобретенияСпособ определения кватерона в фармацевтических препаратах путем обработки пробы неорганическими, 40 агентами с последующим колориметрированием полученного цветного раствора, о т л и ч а ю щ и й. с я тем, что, с целью повышения специфичности и ускорения способа, пробу обрабатывают . Составитель А Бражникова Ревактор А. Коэориз Техред Е,Харитоичик Корректор У. Пономаренко Заказ 4450/66 . Тираж 887 Подписное ВНИИПИ Государственногокомитета СССР по делам изобретений и открытий филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 0,0515 О, 0522 О, 0496 О, 0488 О, 0517 5 1500 5,2200 4 9600 4,8800 5,1700 0,1984 О, 1952 О, 2068 оксипроизводным хлоранила при рН 11,411,6, затем добавляют в реакционнуюсмесь хлороформ, хлороформный слойотделяют и колориметрируют.Источники информации,,принятые во внимание при экспертизе1.Крамаренко В. ф., Попова В. И,фотометрия в,фармацевтическом анализе. Киев, 1972, с. 96-97.1