Способ количественного определения яблочной кислоты в плодоовощных продуктах

(22) Заяв о 22,04.75 (21) 2128710/13 с присоединением заявки(23) ПриоритетОпубликовано 15.12.76. Бюллетень4 Дата опубликования описания 14.12.76 Государственный комитет Совета Министров СССР пв делам изобретенийи открытий 3) УДК 663 25(54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЯБЛОЧНОЙ КИСЛОТЫ В ПЛОДООВОШНЪХ ПРОДУКТАПол мом 2 д Изобретение относится к консервной и винодельческой промышленности и предназначено для количественного определения яблочной кислоты в плодоовощных продуктах, в частности в винах, соках.Известны способы количественного определения яблочной кислоты в плодоовощных продуктах, например фруктовых соках, овощах, винах.Известен способ, основанный на свойстве свинцовой соли яблочной кислоты растворяться в избытке уксуснокислого свинца. Из раствора яблочнокислый свинец осаждается спиртом и затем разлагается серной кислотой. Выделившаяся свободная яблочная кислота определяется перманганатометрически 11. Этот способ требует большого количества реактивов, много времени на проведение анализа и применим только при отсутствии в продукте винной кислоты.Известен также способ количественного определения яблочной кислоты в плодоовощных продуктах, который состоит в том, что исследуемый продукт пропускают через колонку с ионообменной смолой, колонку промывают дистиллированной водой со скоростью 150 мл/ч, Органические кислоты элюируют с анионита 1 н. раствором ХаОН. Элюат, содержащий натриевые соли органических кислот, пропускают через колонку с катионитом. ученныи фильтрат упаривают под вакууи используют для хроматографирования21. Данный способ является наиоолее близким к изооретению по технической сущности5 и достигаемому результату.,указанный способ треоует много временина проведение анализа, наличия реактивов ив основном применяется только при научныхисследованиях.0 Цель изобретения - упрощение анализа исокращение его продолжительности при определении яблочнои кислоты в продуктах.Согласно изобретению полученный элюатсмеси всех органических кислот спектрофотометрируют при длине волн 270 - 280 нм, и пооптической плотности известными способамирассчитывают содержание яблочной кислотыв продукте,то позволяет определять яблочную кислоту в присутствии всех органических кислот,выделенных пз сока и вина, без их предварительного разделения. Кроме того, отпадаетнеобходимость в концентрирован 1 п 1 элюатакислот перед определением содержания яблочной кислоты, а также не требуется отделение аминокислот, необходимое при бумажнойхроматографии,На фиг. 1 показаны спектрофотометрическпе кривые поглощения растворов каждой в0 отдельности органической кислоты; нафиг.2 - кривые поглощения двух смесей органических кислот, в одной из которых имеется яолочцая кислота, в другой отсутствует; на фцг. 3 - кривые поглощения растворов яблочпой кислОты разлцчнОЙ коццентраЕЕии; ца фцг. 4 показаца зависимость оптической плотности раствора прц длцце волны 270 - 280 цм От концее 1 трации Яблоче 10 Й кислоты; це фи. 5 изображены спектрофотометрцческие кривые поглощения элюатов растворов смеси органических кислот; ца фиг. б - кривые поглощения элюата оргаццческих кислот, выделенных цз виноградного сока; па фиг. 7 - кривые поглощения элюата органических кислот, выделенных из виноградного вина.Из приведенного ца фиг. 1 видно, что раств 01)ы мОлОчнОЙ, Вцнцое 1, яцтарцОЙ и лимоп- НОЙ кислот в принятых копцсцтрацц 51 х при длине волн 270 - 280 нм имеют оптическую плотность, близкую к нулю, тогда как кривая поглогцецпя раствора яблочной кислоты в этом диапазоне волн имеет четко выраженную горизонтальную площадку.Прц спектрофотометрировациц раствора смесц кислот, в которой отсутствует яблочная кислота в указанном диапазоне волн оптическая плотность близка к нулю, тогда как прц работе со смесью тех же кислот и яблочной кислоты ца кривой появляется горизонтальная площадка при длинах волн 270 в 2 цм (фцг. 2).Прц снятии спектрофотометрических кривых поглощения в растворах, содержащих различное количество яблочной кислоты, наблюдалась различная высота этой горцзон- талш 10 Й и;Опеадкп ца кривых цад Осью 2 бсццсс (фцг. 3). Оптцческая плотность раствора яблочной кислоты прц длине волны 270 - 280 нм имеет прямолицейцую завпсцмость от се концентрации (фиг, 4),В соках и винах присутствуют вещества, оказывающие влияние па оптическую плотность при длпцс волны 250 - 280 нм, что мсшает непосредственному спектрофотометрцровацию для определения яблочной кислоты, поэтому возникает необходимость в предварительном выделении органических кислот цз исслсдуемого продукта. На фпг. 5 приведены спектрофотометричсские кривые поглощения элюатов кислот, полученных последователь. ным пропусканием сначала через аццоцит ЗДЗП, затем через катионит КУ. Пропу. скапие через анионит необходимо для выделения из исследуемого раствора органических кислот в виде натриевых солей, через КУ- для превращения солей в полученном элюате в кислоты. Как видно цз приведенного на фиг. 5, при работе со смесью кислот, содержащей яблочную кислоту, на кривой поглощения имеется характерная горизонтальная площадка, На кривой, соответствующей смеси, в которой нет яблочной кислоты, эта площадка отсутствует. Алалогцчцым Ооразо.,1 путем 1 лропускае 1 иявиноградного сока и вцпа через ациоццт ЗДЗП ц катиоццт КУбыли получены элюаты органических кислот, спектрофото 5 метрические крцвыс поглощения которыхпривсдепы ца фиг, б и 7. Кривая 1 соответствует исходному вццоградцому соку или вину, кривая 2 - тому же соку и вину, по в цих добавлена кислота из расчета 3 г/л. Как видно, го рцзоцтальцая площадка во втором случаерасположена несколько выше.Приращение оптической плотности раствора при длццс волны 270 - 280 нм (е - е) соответствует добавке яблочной кислоты, 15 Используя известный метод добавок иучитывая прямолшейную зависимость оптической плотности раствора от концентрации в нем яблочной кцслоть), рассчитывают содержаццс последней в исходном материале.20 Если добавка яблочцой кислоты в концентрации гг г/л прц)ло,)ЕИТ к увеличеццю оптической плотности от е, до еъ то концентрация Х г/л се в исходном продукте оцределКгся по форм ) че25 П р и м е р, Выделяют кислоты цз сока цлцвина известным способом, как и прц бумаж цой хроматографии.0 мл виноградного сока или вина пропускают через анцонит ЗДЗП в ОН - -форме.Снятие со смолы кислот, вступивших в ионный обмен, производится 1 н. раствором ед кого патра, Количество этого раствора определяется моментом, когда элюат при стекациц с колонки имеет слабощелочцую реакцию.Далее этот элюат пропускают через катцоцит КУв Н+-форме. Злюат после КУсобира ется в мерную колбу ца 100 мл. Первоначально элюат прц стека 11 и с колонки имеет нейтральную реакцию, затем кислую. Как только после этого элюат станет приобретать нейтральную реакцию, элюирование прекращают.45 Если к этому моменту количество собранногоэлюата составляет менее 100 мл, то полученный раствор доводят до метки бцдцстцллятом.Зтот элюат спектрофотометрпруют прц длц цс 270 - 280 цм па спектрофотометре в кюветеразмером 100 мм.Лцалогичпо поступают с таким же образцом виноградного сока или вина, в который добавлено известное количество яблочной 55 кислоты.Получив значения оптической плотности вбонх случаях, по приведенной выше формуле проводят расчет концентрации яблочной кислоты в исходном продукте.60Формула изобретенияСпособ количественного определения яблочной кислоты в плодоовощных продуктах, например винах, соках, предусмат 1 ешвающ 1 й 65 выделение смеси органических кислот, содер,6 7,2 Нм 270 7 7,а гю гю ла 1 цихся 3 продукте, путем пропуска последнего через колонку с ионообменно смолой с иос;едуопим элюированнем, о т л н ч а юпи йс я тем, что, с целью уирапения и ускорения анализа, полученный элюат спсктрофотомстрируют при длине волны 270 - 280 нм и ио оптической плотности рассчитывают содеркканпе яблочной кислоты. 11 сточиики ннф 011 аппп, ирииятыс О Внимание при зкспертизе:1. Ьуритсйи Л. 11. Ието,исследованияпнисвык продк"Зов, 1 вся, 1 сП 68 с 522 5 Я 5 ", Лвокяип С. П. Новыс методы биокгмиче- скк исследовапй впа, ЦИ 11 Т 11 П 11 П 11:- 111 ОМ, 1968, 539269539269 2 б го 2 з г.б ставитель Э. Шахт Подписноов СССР Изд.1836 Тираж 1029И Государственного комитета Совета Минпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. з 2768/5 Ц