Способ определения белка в хлебопродуктах

146 . 4дистиллированной воды,2-3 капли раствора метилового красного, нейтрализуют раствором 5 М ИаОН и 0,2 Мгидрофосфатом натрия, К раствору добавляют 25 мл 0,2 М гидрофосфата натрия, затем приливают 5 мл 0,1 н,гипохлорита кальция, Колбу оставляют на 10 мин, после чего вводят 20 мл1 ОЕ-ного йодида калия (0025 М поЭДТА), затем - 10 мл раствора фосфорной кислоты (1:8),Содержимое колбы взбалтывают иоставляют на 3-5 мин, Выделившийся15 йод титруют стандартным 0,02 н, раствором тиосульфата натрия до соломенно-желтой окраски, затем доливают 1-2 мл крахмала и дотитровываютдо исчезновения синей окраски раст 20 вора.Параллельно титруют аликвотнуючасть контрольного раствора, содержащего все используемые реактивы.Расчет ведут по формуле250 009333 (Ч -Ч)Чи 30 Графики найденных зависимостей приведены на фиг. 1 (при разбавлении1:50) и Фиг. 2 (при разбавлении 1:100),Выбранные пределы разведения минерализата 1:50-1:100 обусловленытем, что при снижении степени разведения увеличивается кислотность, что 40отрицательно сказывается на состоя-.нии ион-селективного эпектрода, а приувеличении степени разведения концентрации ионов ИН снижается ниже порога чувствительности электрода, 45Предлагаемый способ позволяет упростить процедуру определения белка в,пищевых продуктах, сделать ее болееэкономичной и безопасной,П р и м е р 1 (известный способ).50 мг воздушно-сухого продукта хлебаминерализуют с добавлением 3 г смесисульфатов калия и меди (50:1) и 1015 мп концентрированной серной ки, слоты, для ускорейия сжигания добавляют 5 капель ЗОХ-ной перекиси водорода. Гидролизат разбавляют до 250 млчасть раствора пипеткой переносят вконическую колбу, добавляют 50 мл 0009333 3 2505,0,05 3 1508 известный для данного продукта коэффициент,Для построения градуировочного графика используют образец хлеба (крошки) с известным содержанием белка (азота), например 173,5 мг белка в 1 г продукта. Рассчитывают концент - рацию ионов ХН в минерализатах и ее логарифм. Проводят минерализацию и измерение потенциала в минерализатах проб от 10 до 200 мг с помощью ионселективного электрода ЭМ-ИН -01 при4 разведениях 1:50 и 1:100.Расчетные значения логарифмов конФцентраций ионов ИН и измеренные значения потенциалов приведены в табл,1.Результаты математической .обработки показывают, что для обоих разведений имеется линейная зависимость между значением потенциала и логарифмами концентраций МН в минерализатах крошки, которая описывается следующими уравнениями регрессии: У р -3,07854-0,02786 х;У = -3,15387-0,03154 х.Значение потенциала хорошо коррелируют с 1 д(НН.):г = -0,974012;гоо О 986234 где Х - содержание азота, мг/г;о7 -Ч - объем стандартного растворатиосульфата натрия, израсходованного на контрольныйопыт и на титрование остаткахлорной извести в аликвотнойчасти исследуемого раствора,Ч;Ч - объем мерной колбы и пипетки соответственно, мл;ш - навеска, г;0,009333- количество азота, соответствующее 1 мл 0,02 н, тиосульфата натрия, мг,В данном примере,Содержание белка в продукте рассчитывают умножением найденного количества азота на коэффициент, выражающий зависимость содержания белка в хлебе от содержания аммиака, т.е. 28 5,7=159 мг белка в 1 г продукта,П р и м е р 2 (предложенный способ), К 50 мг крошки хлеба добавляют 1 см концентрированной серной кислоты, 0,5 г смеси сульфатов калия и меди, 0,5 мл перекиси водорода, нагревают до полного обесцвечивания-42 10 25 35 50- 75 100 150 200 5 15пробы, затем разбавляют дистиллированной водой в соотношении 1:50 ипроводят прямое потенциометрическоеизмерение с помощью ион-селективного,электрода ЭМ-ИН. По полученномузначению потенциала - 12,5 ш 7 на графике, приведенном на фиг. 1, находятконцентрацию аммиака (1,861-10 фМ),которую пересчитывают на содержаниебелка путем умножения на соответствующий коэффициент разведения и наизвестный коэффициент пересчета, т.е.-31,86 10 50 14 20=26 мг/г (азота);26 5,7=148 мг/г (белка),П р и м е р 3 (предложенный спо соб), К 50 мг крошки хлеба добавляют 1 см концентрированной серной кислоты, 0,5 г смеси сульфатов калия и меди, 0,5 мл перекиси водорода нагревают до полного обесцвечивания пробы, затем разбавляют дистиллированной: водой в соотношении 1:100 и проводят прямое потенциирование с помощью ион-селективного электрода ЭГ-ИН. По полученному значению потенциала - 4,5 шЧ на графике, приведенном на Фиг, 2, находят концент-зрацию аммиака (0,97 10 Г 1), которую пересчитывают на содержание белка путем умножения на коэффициент разведе 08146 6ния и на известный коэффициент пересчета, т,е.9,97 10 100 14 20=27 мг/г (азота);5 27 5,7=154 мг/г (белка). В табл, 2 приведена сравнительная характеристика известного и предлагаемого способов. 10 Формула изобретения Способ определения белка в хлебопродуктах, предусматривающий минерализацию исследуемой пробы в кон центрированной серной кислоте, разбавление минерализата водой, установление концентрации аммиака с последующим пересчетам на количество белка, отличающийся тем, 20 что, с целью повышения производительности, снижения трудоемкости, снижения экологической вредности, проводят прямое измерение потенциала минерализата с помощью ион-селективно го электрода и устанавливают концентрацию аммиака в зависимости от значения потенциала по предварительнопостроенному градуировочному графику,2. Способ 2 о п, 1, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что минерализатразбавляют водой в отношении 1:501: 100.Таблица 18 1508146 Показатели 1212 102 В завися- т мости отпробы 52010В зависиния пробы, минПродолжительность стадиианализа одной пробы,мин:Разбавление пробыОтбор аликвоты наанализНейтрализацияОкисление аммиакаСвязывание ионов меди и подготовка ктитрованиюТитрованиеОбщая продолжительностьанализа (без учета временных затрат на приготовление реактивов)Число ручных операцийРасход материалов реактивов;Исследуемый, материал, гКонцентрированная серная кислота, смзПерекись водорода, смМетиловый красный,5 М гидроксид натрия,0,2 М гидрофосфат натрия 0,1 н, гипохлорит кальция, см З 1 ОЕ-ный йодит калия,смФосфорная кислота,см0,02 н, тиосульфат нат- рия Необходимое оборудование Тафблица 2 40-50 40-50 70-80 48-5812 2 0,1-0,5 0,025 10-15 12 0,5 мости отпробыОборудова- Оборудование для ние для сжигания; сжигания; стеклян- рН-метр в ные колбы, комплекте с пипетки, ион-селекмерные ци- тивным элеклиндры,ти- тродом тровальная ЭМ-ННустановкаец каз 5535/47 Подписи 9 Производств о-издательский комбинат "Патент", г. Уагород, ул. Гагарина НИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ ССС 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5