Способ замораживания спермы гусей

Союз СоветскихСоциалистическихреспублик ОП ИСАНИЕ пп 9 К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУоо делам иаобредеии и открытий82Бюллетень М 38 Опубликовано 15. 53) УЛК 636. 082. .4535(088.8) а опубликования описания 15, 10,8 ина " " - -.3рБь, -.ййя -".(72) Авторы изобретения Мавро Царенко, А. Д, курбатов и сесоюзныи научно-исследовательский институт и генетики сельскохозяйственных животных(71) Заявитель 54) СПОСОБ ЗАМОРАЗ 1 ВАНИЛ СПЕРМЬ ГУСЕЙ гИзобретение относится к разве,дению сельскохозяйственных животных, а именно, к способам замораживания спермы гусей.Известен способ замораживания спермы гусей, заключающийся в том, что сперму высокой активности разбавляют средой для замораживания в соотношении 1:1 и добавляют криопротектор этиленгликоль в количестве 10 в конечной концентрации. Раз бавление спермы и добавление этилен гликоля проводят при комнатной температуре, Затем ставят в холодильоник при 2-4 С на эквилибрацию, которая продолжается 1 ч. Сперму, подготовленную для замораживания, набирают охлажденными пипетками и накапывают в виде гранул объемом 0,1-0,5 мл на поверхность фторопластовой пластины, предварительнооохлажденной до 60-75 С, Гранулы выдерживают на пластине в течение20 с. За это время сперма охлаждается до 10-12 С, Далее пластину сгранулами опускают в пары азота на1 мин, сперма охлаждается до 40-.50 С, затем гранулы опускают в жидокий азот. Оттаивание гранул производят в пенициллиновых флаконах вводяной бане при 70-75 С в течение7-10 с. Оплодотворенность яиц гусынь 1 о осемененных спермой, замороженнойпо указанному способу была в весенний период 78,Я, а осенью 44,53.Выводимость гусят от числа заложенных яиц была 64,2 и 30,53 соот ветственно.Недостатками этого способа являют,ся сравнительно низкая оплодотворенность яиц и низкая выводимость гусят.Цель изобретения - повышение сохо ранности биологической полноценности спермы после замораживания.Поставленная цель достигаетсятем, что эквилибрацию спермы осу50 3 96 ществляют в два этапа, вначале перед добавлением криопротектора втечение 20-30 мин, а затем пос. ле добавления криопротектора в течение 10-15 мин, причем накапываниеспермы проводят на фторопластовуюпластину, имеющую температуру 185190 С в течение 2-3 мин, а затем пластину с гранулами помещают в жидкий азот на 1-2 мин.П р и м е р, Сперму гусаков высокой активности .разбавляют в соотг ношении 1:3 одной из сред, предназначенных для замораживания, иставят в холодильник, где поддерживается температура 2-4 С. Флако-.ны закрывают резиновой пробкой. Через 30 мин в охлажденную сперму добавляют охлажденный этиленгликоль или диметилсульфоксид в количестве 53-ной конечной концентрации, Содержание флакона быстро перемешива ют круговыми движениями и ставят в холодильник еще на 10 мин. После этого флакон вынимают из холодиль" . ника, определяют активность спермы после эквилибрации и, если активность спермы оказалась не ниже 4-5 баллов, ее замораживают. Для этого сперму подготовленную к замораживанию наби рают в остуженную пипетку или шприц и накапывают по 0,1-0,15 мл на фторо- . пластовую пластину, предварительно охлажденную в жидком хладагенте до-196 С, а затем поднимают пластину на уровень 1,5 см. Температура пластины в начале накапывания должна быть-185 С, такую температуру она приобретает через 15 с, экспозицияпластины в этом положении должна быть2,5 мин, а. скорость охлаждения 0,7 с Затем пластину с гранулами погружают в жидкий азот, в котором она находится 1,5 мин, обеспечивая скоростьохлаждения гранул 3,1 ф/с. После выхода пластины из азота гранулы собирают пинцетом, помещая их в пенициллиновый флакон, последний ставят вконтейнер сосуда Дьюара, погружая вжидкий азот или другой жидкий хладагент, Для искусственного осеменения гусынь .флаконы с гранулами спер 429 ф 5мы достают из сосуда Дьюара и отогревают в водяной бане, имеющей температуру 40-80 С, периодически встряохивая спермуДержат флаконы в водедо полного оттаивания гранул. Затем быстро оценивают активность спермы и осеменяют гусынь,Результаты искусственного осеменения гусынь спермой замороженно-от 1 О таянной представлены в таблице, показывают, что искусственное осеменение гусынь спермой, замороженнооттаянной по предлагаемому способу,обеспечивает получение более высокой15 оплодотворенности яиц и выводимости. гусят, чем при использовании спермы,.замороженной по способу прототипа,Так,оплодотворенность яиц гусынь впервом случае была при использоваа нии инозитол-глюкозной среды от 56,3до 86,73, а вывод гусят от числаяиц, заложенных на инкубацию,от 45,8до 67,73 тогда как при использованииспермы, замороженной по способу-про 25 тотипу, оплодотворенность яиц. былалишь. 52,6-70,2, а выводимость от38,3 до 44,93. Разница была достоверна по второму порогу, хотя опытыбыли проведены в сравнимых условияхЗ на птицах-аналогах.,Научное и экономическое значениепредлагаемого способа состоит втом, что он обеспечивает лучшую оплбдотворенность яиц гусынь при исполь"зовании замороженно-оттаянной спермычем ранее существовавшие способы;Консервация спермы гусей ставит селекционную работу на более высокийуровень, так как дает возможностьдлительного хранения спермы самцовулучшателей и тем самым позволяетиспользовать ее тогда, когда селекционеру она нужна. Кроме того, метод низкотемпературной консервации дает возможность сохранения генофонда гусей локальных пород, которым грозит уничтожение из-за их неконкурентноспособности, но которыемогут сыграть в дальнейшем большую роль в выведении новых пород и линий.Составитель А. ФилипповаРедактор М. Бандура Техред А.Ач 1(орректор Н; Буряк Заказ ОО 25/3 .Тираж 714 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Иосква, Н, Раушская наб., д, 4/5Филиал ППП "Патент", г, Ужгород, ул. Проектная,Способ замораживания спермы гусей, включающий разбавление спермы, добавление криопроектора, эквилибра цию, накапывание спермы на джоропластовую пластину для образования гранул и помещение гранул замороженной спермы в жидкий азот, о тл и ч а ю щ и й с я тем, что. с целью повышения сохранности биологической полноценности спермы после замораживания, эквилибрацию спермы ,осуществляют в два этапа, вначале 965429 8 1 перед добавлением криопротектора в течение 20-30 мин, а затем после добавления криопротектора в течение 10-15 мин, причем накапывание спермы проводят на фторопластовую пластину, имеющую температуру 185-190 С, в течение 2-3 мин, а затем пластину с гранулами помещают в жидкий азот на 1-2 мин. оИсточники инФормации,принятые во внимание при экспертизе.1, Авторское свидетельство СССРУ 65662 1, кл. А 6 1 0 О/02, 1976,