Способ получения моноцианэтиловых эфиров защищенных мононуклеотидов

3 91064применяемых в молекулярной биологиии молекулярной генетике.Известен способ получения моноцианэтиловых эфиров защищенных мононуклеотидов формулыпутем взаимодействия в пиридине защищенных нуклеотидов с 2-цианэтанолом в присутствии триизопропилбензолсульфохлорида, экстракции хлороформом и последующей обработки смеси эфиров смесью 10абсолютных триэтиламина и пиридинав соотношении 1:1 11, Выход целевыхпродуктов 40-653, Время проведенияпроцесса 18 ч.Недостатками такого способа явля" 1 зются значительная продолжительностьпроцесса (18 ч) и относительно невысокий выход целевого продукта (40.654),Целью изобретения является упрощение процесса и повышение выходацелевого продукта.Цель достигается тем, что при получении моноцианэтиловых эфиров за"щищенных мононуклеотидов формулы 1 дв качестве конденсирующего агентаиспользуют арилсульфотетразолид, ав качестве органического растворителя смесь хлороформ - бутанол в соотношении 7:3.зеВыход целевых продуктов 60-80,Время проведения процесса 1-3 ч. Отличиями предлагаемого способа получения моноцианэтиловых эфиров монозамещенных нуклеотидов являются ис"пользование в качестве конденсирующего агента арилсульфотетразолидаи использование в качестве органического растворителя при экстракции смеси хлороформ - бутанол в соотношении 7:3, что позволяет сократить время проведения процесса до 1-3 ч и 9 4,увеличить выход целевого продукта до60-803,П р и м е р. 243 мг (0,3 ммоль)5 -О"диметокситритил"2 -О-тетрагидропиранилуридин-фосфата (в виде триэтиламмонийной соли) сушат многократным упариванием с абсолютным пиридином, растворяют в 1,5 мл абсолютногопиридина, добавляют 227 мг(0,9 ммоль)мезитиленсульфотетразолида, через10 мин " 0,2 мл (3 ммоль) 2-цианэтанола. Контроль за ходом реакциитонкослойная хроматография (ТСХ) насиликагеле в системе А (хлороформ::метанол:триэтиламин, 75:24:1),Через 2 ч реакцию прекращают, реакционную смесь упаривают досуха на ротационном испарителе при 30 ОС, раст-, .воряют в 30 мл охлажденной льдом смеси хлороформ-н-бутанол (7:3) и энергично встряхивают с 30 мл охлажденного 1 М триэтиламмонийбикарбонатного буфера. Слой буфера отделяют, про"мывают хлороформом (20 мл 2). Объединенные органические слои упаривают,сушат с добавлением абсолютного пиридина, растворяет в смеси абсолютный триэтиламин - абсолютный пиридин.Контроль - ТСХ в системе А. Через 3 чреакционную смесь упаривают досуха,сушат упариванием с абсолютным этанолом и осаждают вещество из хлороформного раствора его в смесь петролейный эфир - серный эфир (1:3) Получают. 156 мг (603) 5-О-диметокситритил"О-тетрагидропиранилуридин-цианэтилфосфата (триэтиламмонийнойсоли).Выходы и характеристики синтезированных моноцианэтиловых эфиров защищенных нуклеотидов приведены в таблице.910649 вфРастворитель Времяракции,ч Выход, Ф Соединение ттт ттт ттт .А Б 1 а,В-урацил 60 75 0,32 0,53 055(отн,ир) ИТР ОСК,0,5 0,3(отн.Ср.),03 И триэтиламмонийч; 45 мин, ДИТгтгруппу пред 2 Ф-ным раствором бензолсу ние 7 мин.тетразолид,тетразолид. МХроматографическая подвижность на Ксистемы растворителей: А - хлорофор(по объему), Б - ацетонитрилтвода,МУЭлектрофоретическая подвижность в 0бикарбонатном буФере, рн 7,5; 1,3 1варительно удаляют выдерживанием скислоты в хлороформе при ОфС в течеф" Конденсирующий агент-мезитиленсульфоФФВ 4Конденсирующий агент - бензолсульфо:24:1 о ормула изобретения овыхв Ю СБао В СМСцО,го оНО О) где В " урацил, цитозин, аденин, гуанин с защищенными реакционным центрами 81- ТЪР)0фВ,с О, ОСК, а,В- Й-бензоилцитози Способ получения моноцианэфиров защищенных мононуклеоформулыз 1021/26 Тираж 390 Подписно ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб д.лиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул, Проектная,утем взаимодействия в пиридине заищенных йуклеотидов с 2"цианэтаноом в присутствии конденсирующего 910 б 49 8агента, экстракции органическим растворителем и последующей обработки образующейся смеси эфиров смесью абсолютных триэтиламина и пиридина в соотношении 1:1, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью упрощения процесса и увеличения выхода целевогопродукта, в качестве конденсирующе"го агента используют арилсульфотетра 1 О золид, а в качестве органическогорастворителя смесь хлороформ-бутанолв соотношении 7:3.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1 1. йМ. Адап 13 а 3 с ей а 1. "ТЬе снеа 3 са 3 зпФЬез 3 з оГ йЬе апт.3 сос 3 оп1 оор оГ ец 3 согуо 3 с 3 п 3 й 3 айог ййМАсопйа 3 п 3 пц йЬе Ьурегвх 33 т 3 ед пцс 3 еоз 3-