Способ количественного определения 3-кетостероидов

Союз Советских Социалистических РеспубликОП ИС АНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДВТИЛЬСТВУ(22) Заявлено 170380 (21) 2896849/23-04 (53)М. Кл.3 0 О 1 М 21/78 с присоединением заявки Но Государствеииый комитет СССР ио делам изобретеиий и открытийДата опубликования описания 231181(72) Авторы 4) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ3-КЕТОСТЕРОИДОВ налитиособам3-кетостереднизоовышен ие вре 25 1Изобретение относится кческой химии, а именно к сколичественного определенияроидов кортизона ацетата,лона, преднизона ацетата) . Известен способ количественного определения З-кетостероидов, заключающийся в титровании анализируемой пробы нитритом натрия 1.Недостатком этого способа является низкая избирательность, поскольку нитрит натрия используется при титриметрическом анализе ароматических аминов,Наиболее близким к изобретению по технической сущности и достигаемому результату является способ количественного определения 3-кето- стероидов, заключающийся в обработке анализируемой пробы раствором тетразолия синего и гидроокисью тетраМетиламмония в среде безводного этанола при комнатной температуре с последующим спектрофотометрированием полученного раствора 21.Недостатком известного способа является длительность определения 1,5-2 ч и низкая, чувствительность определения-щи количество 2-10 г,Цель изобретения п ие чувствительности, сокращен мени определения.Поставленная цель достигается тем, что согласно способу количест венного определения 3-кетостероидов в качестве органического Реагента используют 2-дефинил-ацМил,3- -индандион-гидрозона и в качестве органического растворителя хлороФорма и обработку ведут при температуре 99-100 о С в присутствии соляной кислотыП р и м е р 1, Количественное определение кортизона ацетата. ТоЧНую навеску препарата (0,01-. 0,002 г) пе". реносят количественно хлороформом в мерную колбу на 50 мл и доводят ,хлороформом до метки.Из разведения берут по 1 мл,прибавляют 3 мл 0,4 раствора дифезона" 2-дифенилацетил, 3-индандион 1- гидразона в хлороформе 1-2 капли концентрированной соляной кислотй. Реакционную смесь нагревают на кипящей водяной бане 99-100 о С с обрат . ным холодильником. После охлаждения раствор переносят в мерную колбу на 25 мл,доводят хлороформомпод метки и спектрофотомируют при Хд =450 нм (кортизона ацетат) .883715 0 - оптическая плотность раствора стандартного образца при Со - концентрация стандартного раствора; Ф Р 50,0-15,0 ЗЕО,О %Е)0 Со В1 см 1 - толщина слоя в см;р - навеска, г,где О Результаты количественного опре 1 О деления приведены в табл,1.ЪТаблица 1- оптическая плотность продукта реакции при, ОбъектисследованияМетрологические характе- ристики Найдено постандартнообразцу,Ъ Навеска Кортизонацетат Х=100 ю 2399,56 5=0 ф 8065 101 ю 09 043 107 120 100 ю 4 5=00,0106 99 ф 96) Приготовленне 0,4 раствора дифезона: 0,4 г дифезона растворяют в хло роформе при нагревании на водяной бане и доводят хлороформом до 100 мл. Подчиняемость продукта реакцииосновному закону светопоглощениянаблюдается в пределах концентраций0,2-1,6 мг/мл.Расчет процентного содержания 3-кетостероидов проводят по формулам Х=99 ю 69 5=0,597 100,4 101,9 трологичесе характериски Х=100 г 09 5=1 к 0674 5 =2,62Х+5 = 100, ОЗ:883715 О ЩОРС и гр, сод. 1 о где Рср - средний кортизона ацетата преднизолона - 0,1 зона ацетата 0,25Результаты коли деления 3-кетостер ных формах приведе вес таблет0,12 г;46 г; дляг.чественногоидов в лены в табл. для едни о опре- карствен 2.А ц а 2 л Объектисследования ологическиектеристики е веска, г Найдено по стандартно му образцу, етрологиеские хаактеристики йдено 19 Ь БасиИет хар ортизоцетат 1022 0,0255+5 =0,0056 10,00013 0,00560,0055 00 П р и м е р 2. Количественное определение преднизолона, в лекарствен-. ных формах. Точную навеску (О, 1-0,5 г) хорошо измельченных таблеток переносят количественно хлороформом в мерную колбу на 50 мп, хорошо взбалтывают, доводят хлороформом до метки.Извлечения предниэона ацетата фильтруют через бумажный фильтр, отбрасывая первые порции фильтрата. Иэ разве. дения (а для преднизона ацетата иэ фильтрата) берут по 1 мл,прибавляют 3 мл 0,4 раствора дифеэона в хлороформе и дальше поступают как в примере 1.Определение граммового содержания 3-кетостероидов в лекарственных формах проводилось как по стандартному образцу, так и по удельному показателю поглощения.Расчет граммового содержания в пересчете на средний вес таблетки проводят по формуламгр.с д. 3) 50,0 що С р О, 0056 Х 15О, 00561 фО, 00061 0,0054883715 Формула изобретения Составитель Л.Соломенцева Редактор П.Ортутай Техред И.Асталош Корректор М.ДемчикЗаказ 10211/64Тираж 910 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва,Ж, Раушская наб.,д,4/5Филиал ППП "Патент", г, Ужгород, ул,Проектная, 4 Настоящий способ прост в выполнении, не требует дополнительных операций (высушивание до постоянного веса, дробное извлечение действующих веществ с последующим выпариванием и растворением их), исключает применение труднодоступных реагентов и безводнйх растворителей. Количественное определение 3-кетостероидов по предла гаемому способу проводится в течение 25-30 мин, а по известному - 1,5 -2 ч, Чувствительность предлагаемого способа в сравнении с известным при анализе таблеток выше 4-5 раз. Так, в предлагаемом способе расход лекарственной формы составляет 0,2-1 г, в то время как в известном - 2-10 г. 15 Способ количественного определения 3) 3-кетостероидов путем обработки анали зируемой пробы органическим реагентом в среде органического растворителя споследующим спектрофотометрированиемполученного раствора, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью повышения чувствительности и сокращениявремени определения, в качестве органического реагента используют 2-дифенилацетил,3-индандион-гидразон ив качестве органического растворителяхлороформ и обработку ведут при температуре 99-100 ОС в присутствии соляной кислоты. Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Кцг 1 епв 1 Ь 1.еоп, эа 11 п,Едиагд цОейега 1 па 1 оп о се гЬопу 1 соароцпд э Ьу зод 1 ца п 1 йг 1 йе й 1 йгай 1 оп оГ ехсевь 2,4-д 1 п 1 йгорЬепу 1 ЬуЬгаг 1 пе 1 и йЬе ргезепсе оУ Ьудгагопеп 1,Рпагвас.Яс 1, 1966, 55. Р 12, р, 1457-1459.2. Международная фармакопея. Жене.ва., издание 2-ое, 1969, с. 767 (прототип) .