Способ профилактики и лечения острых респираторных заболеваний вирусной этиологии

ОП ИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИ ИТЕЛЬСТВУ пц 745523 Союз Советских Социалистических Республик(22) Заявлено 150678 (21) 2628199/28-13с присоединением заявки Мо(51)М. Кл 2 А 61 К 35/20 Государственный комитет СССР по делам изобретений и открытий(088.8) Дата опубликования описания 070780(54) СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ОСТРЫХРЕСПИРАТОРНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ:ВИРУСНОЙ ЭТИОЛОГИИ Изобретение относится к медицинеи касается профилактики и лечениятяжелых форм заболеваний вируснойэтиологии.Известен способ профилактикии лечения острых .респираторных заболеваний вирусной этиологии путеминтраназального введения иммуноглобулина 1,Однако при известном способе возможна аллергизация организма., аллергические реакции и различные осложнения,Целью изобретения является исключение аллергизации организма, 15снижение тяжести течения болезни иуменьшение числа осложнений.Эта цель достигается тем, чтовводят секреторные антитела классасекреторного иммуноглобулина А, выде ленные из женскогомолозива.П р и м е р 1. Приготовлениетест-препарата.Из антисыворотьк к человескимиммуноглобулинам А и О (19 А, 1 дО)методом экспресс-хроматографии выделяют 196 и 19 А фракции. Белокэтих фракций Фиксируют посредствомбидиазотированного бензидина (БДБ) на поверхность стабилизированных формалином эритроцитов барана.Определение клеток, сенсибилизированных секреторным иммуноглобулином А и иммуноглобулином 6.В опыт берут 40 крыс. 15-ти жи= вотным из каждой группы вводят интраназально под легким эфирным наркозом по 0,5 мл препаратов секреторных антител. Другим 15 животным такое же количество гамма-глобулина. Остальные 10 крыс составляют контрольную группу. Взвеси клеток эпителия трахеи интактных животных соединяют с тест-препаратами - эритроцитами, сенсибилизированными анти А или антиантителами, Полученные смеси выдерживают 30 мин при комнатной температуре и взаимодействие между эпителиальными клетками и тест-препаратом наблюдают с помощью Фазово-контрастного микроскопа. Сенсибилизированные антителами эритроциты не прикреплялись к поверхности клеток эпителия трахеи интактных крыс, Через 3, 24 и 48 ч после введения животным секреторных антител или гамма-глобулина изучают взаимоотношение клеток эпителия трахеи745523 Таблица 1 Сроки после введения препарата, ч, и количество сенсибилизированных клеток 48 Обследовано Выявлено Обсле" довано Выявлено Выявлено Обследовано сеысибилизированныхклеток сенсибили"зированных клеток сенсибилизироваыныхклеток Абс. % Абс. Ъ Абс .,136 9,3+.01 животных подопытных групп с теми. "же тест-препаратами (см,табл.1). Через 3 ч количество клеток, сенсибилизированных 1 дА и 196 антителами,не различалось между ссбой (11,0 ++614 и 10,2+2,45%). Однако через24 и 48 ч было выявлено достоверно(р ( 0,05) больше клеток, сенсибилизированных 519 А,В табл.2 приведены результаты взаимодействия секреторного иммуноглобулина А и иммуноглобулина 6 с клетками эпителиальиой выстилки трахея"крйсЭти данйые указывают на более выраженное сродство антител класса579 А с клетками эпителиальной выстилкйдыхательных путей.Й р и м е р 2. В опыт берут20 крыс. Десяти животным интранаэальреторанти-тела(51 цА) 1450. 160 11,0 1 1463(О,плацебо 1377 150 11, бф 0, 86" . 4новводят 0,5 мл препарата секретор ных антител, 10-ти другим (контрольная группа) плацебо-раствор бычьегосывороточного альбумина, содержащего1,8 мг белка в 1 мл, Сутки спустявсех крыс инфицируют 100 ИД 50/0,1 млвируса гриппа А (Ленинград)75(НЭ 92).Еще через трое суток, то есть вмомент максимального развития инфекции, животных забивают и с помощью )О реакцйй непрямой гемадсорбции определяют количество клеток эпителиятрахеи, инфицйрованных вирусом. Уживотных, защищенных секреторными антителами, оно было в 4,5 раза ниже(р с 0,01). Эти данные представленй 15 в табл.2. Они указывают на выраженнуюантиинекционную активность препарата секреторных антител. П р и м е р 3. В опыт берут480 мышей, распределенных на 12 групп, б контрольным группам животных вводят интранаэально по 0,08 мл плацебо (см.пример 2). Трем группам 55 подопытных мышей, вводят такое жеколичество 519 А Фракции, полученной при гельфетрации препарата секреторных антител. Трем другим опытным группам - цельный препарат секреторных антител, Сутки спустя животных из контрольных и опытных групп иыицируют 1,10 и 100 ИД 50/0,1 мл вируса. гриппа А(Виктория)72(НЗ 92), адаптированного к организму мышей. Еще через(0,0 Пл 0 20 5 можно закявляется лом препачто преи выделен- обладают ой активИз приведенных лючить, что 519 Й осйовным действу рата секреторных парат секреторных ная из него 51 уА выраженной антии ностьюданных фракци ющим нач антител антите Фракция фекцион5й 3 суток всех животных забивают.Легкие от каждых двух мышей соединяют в одну пробу и в экстрактах,полученных из этих двух органов,определяют присутствие вируса путемзаражения культур хорионаллантоиснойоболочки 11-дневных развивающихсякуриных эмбрионов. Введение 510 АФракции (р0,02) защищает от реП р и м е р 4. Определение концентрации антител в препаратах секреторных антител и сывороточного гамма-глобулина вне организма.Опыт начинают с определения содержания антител к вирусу гриппа А(Виктория)72(НЗ Р 2) в препаратах секреторных антител и титрованного гамма-глобулина. В реакции непрямо гемагглютинации (РНГА) титр антител в препарате гамма-глобулина оказался в 8 раз выше, чем в препарате секреторных антител. В реакции биологи.ческой нейтрализации тот же препарат нейтрализовал на 2 ед., т.е. в 100 раз больше вируса, чем препарат секреторных антител . 1 продукции 10 ИД 50/0,1 мл вируса, а введение цельного препарата от репродукции 100 ИД вируса (см.табл.3).В табл.3 приведена антиинфекционная активность препарата секреторных антител и выделенной из него Фракции секреторного иммуноглобулина А. Определение профилактическойактивности препаратов секреторныхантител и сывороточного гамма-глобулина модели экспериментальной гриппозной инфекции белых мышей,В опыт берут 480 мышей, 160 животным контрольной группы интраназально вводят плацебо, 160 животным первой подопытной группы - секреторные антитела, и еще 160 мышам -гамма-глобулин. Через 24 ч всех животных интраназально инфицируют 10(НЗ 92).В течение 12 дней учитываютгибель мышей. К концу опыта достоверное ( ( 0,05) снижение смертностибыло обнаружено лишь у мышей, получавших секреторные антитела. Однако,в период с 4 по 7 день достоверноменьше погибали животные в обеихподопытных группах, чем в контроле.Таким образом, при заражении большими дозами вируса антитела класса дС,составляющие действующее началогамма-глобулина, способны только за745523 Формула изобретения 50 55 60 ЦНИИПИ Заказ 4048/3 Тираж 673 Подписное Филиал ППП Патентф, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 держать развитие инфекционного процесса и лишь антитела класса 9. 9 Амогут предотвратить гибель животных.Следовательно, профилактическая активность антител определяется нетолько их концентрацией, но и способностью обеззараживать чужеродныйбиологический агент в конкретныхусловиях окружающей среды. В дыхательных путях она значительно вышеу антител класса 519 А.П р и м е р 5, В грудничковойгруппе Физиологического отделениядетской больницы находилось поднаблюдением 16 детей в возрастеот 3-х до 7-ми месяцев. Из них9-ти детям после предварительнойобработки носа 2-ным теплым содовым раствором вводили в обе половины носа 1 раз в день по 2 каплипрепарата секреторных антител (СА),другим 7-ми детям вместо препарата.вводили стерильный физиологическийраствор, Введение препарата секреторных антител (СА) или физиологического раствора проводили на протяжении всего срока наблюдения. За.время наблюдения в группе детей зарегистрированы вспышки острых респираторных заболеваний аденовируснойи РС-вирусной этиологии, Из 11 случаев заболеваний (острых респираторных заболеваний) среди детей, получавших препарат секреторных антител,10 протекало з легкой форме и только 1 - в среднетяжелой. Осложнилисьотитом - 4 случая, заболеваний пневмонией не было, Из 7 случаев острыхреспираторных заболеваний в группедетей, не получавших препарат, 5протекало в" среднетяжелой форме",1 - в тяжелой и лишь 1 в легкой форме, во всех случаях имел место отити в одном - пневмонйя. Пример показывает, что на Фоне ежедневногозакапывания в нос препарата секреторных антител острые респираторныезаболевания протекали значительнолегче с меньшим количеством осложнений (отиты и пневмонии). Аллергических реакций в ответ на введениепрепарата не наблюдалось,П р и м е р 6. В отделении длябольных острыми респираторными вирусными инфекциями находилось поднаблюдением 40 больных детей ввозрасте от 1 года до 5 лет. 20-тииз них, кроме обычного лечения, 3раза в день вводили в обе половиныноса по 2 капли препарата секреторныхантител. Другим 20-ти детям -стерильный физиологический раствор.Вгруппе детей, получивших пре 8парат секреторных антител, наслое"ние новых острых распираторных заболеваний в период пребывания в отделении имело место у 7 больных.(70,0+11,0). Пример указывает напрофилактический эффект препаратасекреторных антител. Аллергическихреакций в ответ на введение препара"тов не наблюдалось.П р и м е р 7. В отделении длянедоношенных детей больницы находилось 18 детей в возрасте от 1-годо 3-х месяцев. В отделении возник ла вспышка острых Респират Рн хзаболеваний РС-вирусной этиологии,переболело 7 детей, В тяжелой иочень тяжелой форме заболеваниепротекало у 4-х, в среднетяжелой -у 3-х детей. Остановка дыхания име ла место у 3-х больных, у всех детей отмечалась дыхательная недостаточность 1-ой степени. Детямначали вводить 3 раза в день по2 капли препарата секреторных анти тел в обе половины носа. После этогозаболели остальные 11 детей. В тяжелой форме острое респираторное заболевание протекало у 2-х детей, всреднетяжелом - у шести, в легкой - 30 у трех. Случаев остановки дыханияна было, дыхательная недостаточность - степени, Пример указываетна эффективность применения препарата при лечении острых распиратор ных заболеваний у детей первого годажизни. Аллергических реакций в ответна введение препарата на наблюдалось.Предлагаемый способ снижает тяжесть заболевания острыми респираторными инфекциями, уменьшает числоосложнений и исключает аллергизациюорганизма. Способ профилактики и леченияострых респираторных заболеванийвирусной этиологии путем интраназального введения иммуноглобулина,.о т л и ч а ю щ и й с я тем, что,с целью исключения аллергизацииорганизма, снижения тяжести теченияболезни и уменьшения числа осложнений, вводят секреторные антителакласса секреторного иммуноглобулина А, выделенные из женского молозива,Источники информации,принятые во внимание при экспертизе 1. ЖМЭИ, 1977, Р 5, с. 109-114,