Способ получения биокатализатора для кислотопонижения виноматериалов

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИРЕСПУБЛИК 634716 Е РЕ ЕЛЬСТВ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР ПИСАНИЕ ИЗО К АВТОРСКОМУ СВИ(71) Физико-химический институтим, А.В.Богатского и Научно-производственное обьединение по виноградарствуи питомниководству(56) Авторское свидетельство СССРМ 1125235, кл. С 12 С 1/02, 1982.Рогоо 5 репоИ, Аесзапдго Воиасп,Маго РЛЧм, Агтого 1 агпогав. Авег, 1, Епо.Ибс, 33, йг 1, 1982, 83, с. 91,(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОКАТАЛИЗАТОРА ДЛЯ КИСЛОТОПОНИЖЕНИЯ ВИНОМАТЕРИАЛОВ Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для кислотопонижения виноматериалов.Цель изобретения - увеличение выхода по активности при иммобилизации и повышение стабильности целевого продукта,Способ заключается в иммобилизации бактерийеосопозюс оепоз в 2;-ный угле- водный гель - филлофорин при соотношении клетки - филлофорин 1:6 - 1;9 (по массе) с последующим выдерживанием геля с иммобилизованными клетками в течение 3 ч в насыщенном хлористым калием виноматериале. Сохранение активности клеток при иммобилизации и их высокая стабильность прежде всего связаны с физико-химическими особенностями филлофорина (в сравнении с другими каррагинанами), а также такое существенное преимущество филлофорина перед другими каррагинанами как 1)5 С 12 й 11/10, С 12 6 1/О(57) Изобретение относится к биотехнологии, в частности к способам кислотопонижения вин оматериалов, и может найти применение для производства вин. Цель изобретения - увеличение выхода по активности при иммобилизации и повышение стабильности целевого продукта, Способ заключается в иммобилизации клетокеосопозтос оепоз в 2-ном филлофорине при массовом соотношении клетки и филлофорина, равном 1:(6 - 9), а также в последующем выдерживании геля с иммобилизованными клетками в течение 3 ч в насыщенном хлористым калием виноматериале, Способ позволяет увел ичить выход по активности при иммобилизации от 45 - 60 до 100;6, а также повысить стабильность целевого продукта с 6 ч до 33 сут, 4 табл. у отсутствие растворимости в виноматериале при многоразовом использовании, в ре- а зультате чего уменьшается выход клеток Оеисопозтос оепоз в виноматериале. Температуры плавления иммобилизованных в филлофорине клеток ,оепоз выше по сравнению с самим филлофорином, что очевидно свидетельствует о существовании взаимодействия клеткиецсопозтос - фил- СЛ лофорин.Для упрочнения и грануляции биокатализатора кислотопонижения используетсяввей насыщенный КС виноматериал, при этом в отличие от ранее используемых методов (применения для этих целей насыщенного раствора КС 1, толуола) достигается полное сохранение исходной активности клеток, получение более прочного геля и исключение стадии многократной отмывки от толуола.10 15 Использование предложенного способа позволяет увеличить выход по активности при иммобилизации от 45-65 до 100, а также повысить стабильность целевого продукта от 6 ч до 33 сут (при выдерживании катализатора в виноматериале),Способ иллюстрируется следующими примерами. П р и м е р 1, Стерильный 2 ф-ный гель филлофорина при температуре 40 С стерильно смешивают с клетками консорциума. оепоэ, соотношение клетки - гель 1:6, затем продавливают через фильеру в охлажденный перемешиваемый насыщенный раствор КС в виноматериале и выдерживают в течение 3 ч.Затем к 0,7 л виноматериала сорта Алиготе с титруемой кислотностью 10,4 г/дм,з содержащем З,З г/дм :яблочной кислоты, добавляют 77 г иммобилизованных клеток (10). Через 3 сут титруемая кислотность составляет 8,3 г/дм, а содержание Е-яблочзной кислоты практически не регистрируется. Виноматериал затем сливают и иммобилизованные клетки используют повторно, Возможно проведение кислотопонижения в течение 33 сут. П р и м е р 2. Порядок выполнения операций аналогичен примеру 1. Однако используют иммобилизованные клетки при соотношении клетки - 2 ь-ный филлофорин 1:9, Через 3 сут титруемая кислотность составляет 8,5 г/дм, а содержание :яблочзной кислоты практически не регистрируется.П р и м е р ы 3 - 4. Порядок выполнения операций аналогичен примеру 1. Но используют иммобилизованные клетки ,оепоэ при соотношении клетки - 2-ный филлофорин 1;3 и 1:12. Через 3 сут титруемая кислотность составляет 8,9 и 9,3 г/дм.Примеры иллюстрируют нецелесообразностьь получения биокатализатора для проведения кислотопонижения при данном соотношении клетки - филлофорин.П р и м е р 5. Порядок выполнения операций аналогичен примеру 1. Соотношение клетки - филлофорин 1:6. Используют 157 ь иммобилизованных клеток. В результате титэоуемая кислотность составляет 8,4 г/дм, а содержание -яблочной кислоты не регистрируется,П р и м е р 6, Выполняют операции аналогично примеру 5, только соотношение клетки - филлофорин 1:9, титруемая кислотность 8,4, содержание -яблочной кислоты не регистрируется,20 25 30 35 40 45 50 55 П ри м е ры 7-8. Выполняют операциианалогично примеру 5, соотношение клетки - филлофорин 1:3 и 1:12, Через 3 сут титруемая кислотность составляет 9,0 и 9,2,присутствовала Е-яблочная кислота.Примеры иллюстрируют нецелесообразность получения биокаталиэатора для проведения кислотопонижения при данном соотношении клетки - филлофорин,П р и м е р ы 9-12, Порядок операций аналогичен примеру 1. Соотношение клетки - филлофорин 1:3; 1:6; 1:9; 1:12. Для кислотопонижения берут 5 иммибилизованных клеток, Во всех случаях полного удаления Е-яблочной кислоты не происходит. Примеры иллюстрируют нецелесообразность проведения кислотопонижения при данном количестве иммобилизованных клеток.П р и м е р ы 13-16, Порядок операций аналогичен примеру 1. Соотношение клетки - филлофорин 1:3; 1:6; 1;9; 1;12, Для кислотопонижения берут 20 иммобилизованных клеток. Во всех случаях наблюдают 1000 удаление -яблочной кислоты, однако использовать такое количество иммобилиэованных клеток нецелесообразно по экономическим соображениям.П р и м е р ы 17 - 21. Порядок операций аналогичен примеру 1, Но используют при иммобилизации клетки ,оепоэ (штаммы ТА, Т, Т, Т 2 с, Т(табл, 1).Во всех случаях сохраняется 100 О исходной активности. Содержание-яблочной кислоты в виноматериале после использования иммобилизованных в филлофорин клеток не регистрируется.Оптимальным является 2-ный филлофорин, так как при иммобилизации в 1 получается слабый гель, а использовать2 филлофорина нецелесообразно. так как прочность геля не увеличивается, а до 85 падает активность иммобилизованных кле- ток, кроме того, по зкономическим соображениям нецелесообразно использовать более концентрированный гель (табл, 2).В табл. 3 приведены данные, подтверждающие, что весовое соотношение клетки - филлофорин 1:(6-9) является оптимальным.Из данных табл, 3 следует, что максимальное снижение титруемой кислотности наблюдается для соотношения клетки - филлофорин 1:(6-9) для всех взятых в вино- материал количеств филлофорина с иммобилиэованными клетками.При использовании каррагинанов, отличных от филлофорина, выход по, активности при иммобилизации снижается (табл. 4).Таким образом, предлагаемый способ получения биокатализатора для кислотопо1634716 Таблица 1 Табли блица 3 нижения виноматериалов позволяет иммобилизованным по этому способу клеткам.оепов сохранять 100 исходной активности (вместо 45 - 60 по известному способу) и в результате проводить 100 трансфор мацию :яблочной кислоты в :молочную при кислотопонижении виноматериалов. Активность иммобилизованных клеток в ходе кислотопонижения сохраняется в течение 33 сут (вместо 6 ч), что обеспечивает 10 воэможность их многократного использования, иммобилизованные таким образом клетки легко отделяются от виноматериала, при этом отсутствует опасность бактериального загрязнения, снижа ется пенообразование,Формула изобретения Способ получения биокатализатора для кислотопонижения виноматериалов, заключающийся в иммобилизации бактерийецсопоз 1 ос оепоз в геле углеводной природы, отл ич а ю щи йс я тем,что, с целью увеличения выхода по активности при иммобилизации и повышения стабильносцеле-. вого продукта, в качестве геля используют 2-ный филлофорин, соотношение клетки и филлофорина устанавливают равным 1:6 - 1:9 и полученный гель с иммобилизованными клетками выдерживают в течение 3 ч в насыщенном хлористым калием виноматериале.1634716Таблица 4Составитель В.Муронец Редактор М.Недолуженко Техред М,Моргентал Корректор О,Кравцова Заказ 733 Тираж 368 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101