Способ получения белковой биомассы

.Сидоренко,инчев Бабиццидиоми1984 в И.В.ющие ба, Минс И о" асако- качеие относи ся к микробиости и касается штамма гриба и зобре туру, состоящую из дрожжей, причем гр вают в соотношении логическои ромышленно лковой био спользован бы и дрожки засеот 3:1 до 1:1 по олучения божет битьобавки к к1 сль изо массы, котор а в качестве массе. Ферменты, выдел рмам в жретения емые в ибами,альту отноводстве вышение вылее высокой способны активдроюкевых а протеоли ть гр ральную жидкос проявлять прот ность, т.е, вь клеток, Индукт тических Ферме хода укта за счет роста и степ олитическ скоростисырья,Спососреду, с,лому, обные соли конве с ь лизи синте зыва ам заключаетсядержащую измеаботанную вод добавляют см том грибов являютсябиргли такие парыри совместноморых преотеолитио нтов ьченную сой, и минераль ожжи. Поэтоибоя и дрожь ей, и и кот шанную куль ультивироваш. ГОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМПРИ ГННТ СССР(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕПИЯ БЕЛКОВОЙМАССЫ(5 I) Изобретение относится к мибиологической промышленности иется получения белковой биомасторая может быть использована тве добавки к кормам в животно стве. Целью изобретения является повышение выхода продукта за счет более высокой скорости роста и степени конверсии сьпья. Способ заключается в тсм, что в питательную среду, содержащую измельченную солоьминеральные соли, небольшое количество глюкозы и кукурузного экстракта и воду, добавляют смешанную культуру, состоящую из штамма гриба и дрожжей, причем грибы и дрожки засевают в соотношении 3;1-1:1 по массе. Выращиваемые пары грибы-дрожки; Аярег 11- 1 ця йцпц.дог.ця ВКМ Ги 1%осогогц 1 а ацгог 1 аса ВКМ Уили Сапс 11- с 1 а гцрояа ВКПМ У; А 11 еяс 1 пегх геггеягг 1 я ВКМ Ги СандЫа гщояа ф ВКПМ У; Брогогг 1 спцш рц Ыег 11 епгцгп ВКМ Ри СагйЫа гцяояа ВКПМ Уилн Кос 1 огогц 1 а (, ацгог 1 аса ВКМ У, Получают продукт с содержанием сырого протеина в кор- ф ме до 27%. 4 табл.ческая активность ферментов гриба была бы минимальна, т.е, чтобы лизис дрожжей под действием этих ферментов отсутствовал.5Определение процента лизиса дрожжевой биомассы осуществляли следующим образом: каждую пару грибов и дрожжей, например, А 11 еясЬсг 1 геггеяСг 1 я ВКМ Ги Сапд 1 йа па 1 гояа ВКПМ Ъ, выращивали совместно в колбах на качалке при оптимальных температурах, рН, составе питательной среды, источнике углерода времени выращивания, Биомассу известным способом отделяли от культуральной жидкости и определяли содержание протеолитических ферментов в культуральной жидкости. Для этого в две пробирки с буфером и мертиолатом добавляли по 1 мл суспензии дрожжей С,тпа 1 Тояа ВПКМ У, затем в одну из пробирок (контроль) вносили 1 мл воды, а в другую (опыт) 1 мл культуральной жидкости. Измеряли исходную оптическую плот-, 25 ность суспензий в обеих пробирках при длине волны 580 нм, затем помещали их на водяную баню при 40 + 0,5 С на 1 ч, после чего опять измеряли оптическую плотность. 30Расчет процента лизиса субстрата проводили по формуле:(В, - Вг) х 100 ЛУгде 1)- начальная оптическая плотность;1) - конечная оптическая плот 7ность100 - переводной коэффициент длявыражения результатов в процентах.В табл, 1 приведены данные, показывающие, в .каких случаях совместное выращивание грибов и дрожжей может быть осуществлено, 45 Пары, грибы - дрожжи подбирали по признаку отсутствия лизиса между ними, что позволяет и грибам и дрожжам нормально развиваться и накапливать биомассу при совместном культивиро 50 вании,По этому .признаку были отобраны пары грибов и дрожжей, способные существоватьвместе; Аярег 8111 ця Гцпц. - дагця ВКМ Р 1020 и йодогогц 1 а ацгогх 51 аса ВКМ-Уили дрожжи СапйЫа гцеояа ВКПМ У; А 11 еясйег 1 геггеягг 1 я ВКМ Г 6062 и Сапс 1 Ыа гцРояа ВКПМ У; Брогогг 1 сЬцш рц 1 чег 11 епгшп ВКМ Г .1764 и дрожжи СапдЫа гцяояа ВКПМ Уили Койогогц 1 а ацгог 1 аса ВКМ-У,Оптимальное соотношение величининокулятов грибов и дрожжей в подобранных парах находится в диапазонеот 3: 1 до 1: 1. Выход за эти соотношения приводит к понижению содержания белка в готовом продукте; приувеличении доли дрожжей в смеси микроорганизмов (соотношение грибов//дрожжей - 1:1,5) уменьшение содержания сырого протеина в продукте связано с тем, что дрожжи в таком количестве начинают подавлять развитиегрибного мицелияф, увеличение содержания грибного мицелия в смеси (соотношение 4 1) приводит к уменьшениюсодержания белка в продукте, так какв грибном мицелии белка содержитсяменьше, чем в дрожжевых клетках.Способ осуществляют следующим образом.Измельченную солому смешивают сводой в соотношении 1:50, вносят соли: азотно-кислый аммоний, азотнокислый натрий в количестве 0,7-0,8 г/лкаждую :и однозамещенный фосфорно 4кислый калий 1 г/л. Для активациивносят 0,05 глюкозы и 0,4 кукурузного субстрата.Среду инокулируют подобранной парой штаммов гриба и дрожжей в соотношении от 3:1 до 1:1 по массе. Общий засев инокулята составляет 4 от всего объема среды. Смесь грибови дрожжей культивируют глубинным способом 12 ч при рН 6-7, температуре40-42 С и аэрации 1,5 л/л ч. ЗатемрН снижают до 4,5-5,5 и культивируютеще 12 ч. Снижение рН после 12 чкультивирования необходимо для создания оптимальных условий для развития дрожжей и дополнительного накопления дрожжевой биомассы, тогдакак рН 6-7 в начале процесса преимущественно способствует накоплениюбиомассы грибов.После окончания процесса выращи"вания культуральную жидкость плазмолиэируют в течение 1 ч при 90 С, азатем сушат при 50-60 С.Основные характеристики готовогокормового продукта приведены втабл, 2-4,Переваримость соломы 30 Х, переваримость корма 75-80 .1479509 Т а б л и ц а 1 Количество, 7., лизированных клеток дрожжами Грибы К.аегог 1 аса С.цг 11 я С,ясогп 1 С.гцяояаВКМ УВКПМ ВКПМ ВКПМУУУС. тпа 1 г о я аВКПМ УА 11. геггеяггхяВКМ Р Бр, рц 1 чег 11 епгцшВКМ Г 1764Аяр. Хцпп 8 аЬдяВКМ Р ТгхсЬос 1 егша ч 1 гЫеВКМ Р36 Лизис отЛизис от- Лизис отсутствует Лиэис отсутствует Лизис отсутствует 1519 27 сутствует Лиэис отсутствует Лизис от 30 сутствует 1040 24 П р и м е р 1. Солому измельчаютдо размера частиц 2-4 мм, смешиваютс водой в соотношении 1:50, добавляют 0,8 г/л ИаБО, 0,8 г/л ИНИОз,1 г/л КНРО1000 мг/л, глюкозу0,05 мас.ь. и кукурузный экстракт0,4 мас,7. Среду стерилизуют в течение 30 мин при 1 атм. В полученнуюстерильную среду вносят грибы ЯрогоггсЬцш рц 1 чег 11 епгцш ВКМ Р 1764 идрожжи СапдЫа гцяояа ВКПМ Увсоотношении :1, Общая величина засева 4 об,7. Выращивание ведут 12 чпри 38 С, рН 6,7. После этого рН снижают до 4,5-5,5 и продолжают выращивание еще 12 часов. После окончанияпроцесса суспензию плазмолизуют 1 чпри 80 С и высушивают нри 50-60 С.Получают продукт с содержанием сырого протеина 237., содержание липидов1,57,П р и м е р 2. Способ выращиванияосуществляют, как в примере 1, но вкачестве посевного материала используют грибы Аяр. Гцш 1 агця ВКМ Р и дрожжи Вос 1 огогц 1 а ацгогаса ВКМУв соотношении 1:1, Культивирование ведут при 42 С. Получают продукт с содержанием сырого протеина ЗО267, липидов 1,87.,П р и м е р 3. Выращивание осуществляют, как в примере 1, но в качестве микроорганизмов используют грибы А 11 еясйег геггеясг 1 я ВКМ Р и дрожжи СапйЫа та 1 гояа ВКПМ У.Получают продукт с содержанием сырого протеина 277, содержание липидов 1, 57.Таким образом, применение предлагаемого способа обеспечивает величение содержания сырого протеина в корме от 3,5 1 в соломе) до 27 Е, Предлагаемый способ позволяет также сократить длительность культивированиядо 1 сут,Формула изобретения Способ получения белковой биомассы, предусматривающий выращивание микроорганизмов в условиях аэрации на питательной среде, содержащей солому в качестве источника углерода, источник азота и минеральные соли, до максимального накопления белка в биомассе, о. т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышениявыхода продукта за счет более высокой скорости роста и степени конверсии сырья, в качестве микроорганизмов используют консорциум штаммов гриба Аярегр.11 ця Гцппагця ВКИ Ги дрожжей Койоогц 1 а ацго 1 хаса ВКИ У, или Сапд Ыа гцяоя а ВКПМ У, или гриба А 11 еясйег 1 геггеягья ВКМ Р 6062 и дрожжей СапйЫа гц 8 ояа ВКПМ У, или гриба БрогоггхсМцш рц 1 чег 11 епгцш ВКМ Ри дрожжей СапйЫа гцяояа ВКПМ У, или йодогогц 1 а ацгогаса ВКМ У, при этом штаммы грибов и дрожжей вводят в среду в соотношении от 3: 1 до 1:1 по массе.- 1479509 Таблица 2 ОБЦРР, % Витамины, мг/кг Содержание, % Продукт Питательность1 кг продукта,корм. ед. 3,0 1,2 0,2-0,3 отсут.0-28 10-18 О, 7-0,8 0,32 Соло тсут ормовой ОБЦ - относительная биологическая ценность, % к казеин аблица 3 инеральный состав, г/ Продукт СаМя Ге Еп Мп Сц 6 154 Р,О, К Г Оэ 19 Ою 017 Ор 11 19,3 3 60 Ор 60 Ов 030 Оэ 03 Ов 007 1,7 аЬлнц Содерввнне внннокнслотр Е от АСЬ од тн Трнптфвн онн 09 Ор 08 " Ор 19 Ор 1 Ор 12 Ор 14 О, П Ор 1 2 Ор 5 Ор 08 Ор 8 Ор 5 Орб Орб Ор 2 Ор 9 Ор 12 Ор 07 О0,9 0,5,2 О ь Л.Минеева Состав М.Недол Редак к Заказ 2504/25ВНИИПИ Государствен о113 Р Тираж 50ного комитета по из035, Москвар Ж,тениям ская н низводственно-издательский комбинат 11 атент , г.уж ул. Гагарина,101 оломаормовойродукт Солона Кормон продук Общий белок Истинныйбелок Г одписноеткрытиям при ГКНТ СССРд 4/5