Способ получения амилолитических ферментных препаратов

,Дя" но-исследователтов брожения о СССР6,.В Л ЛУЧЕНИЯ АМИЛОРЕПАРАТОВ,нное культипоследующим афильтрацией т ир м, что выделение рировании выпари ющиисят та при концен ем осуществля центрирование рата. ни онодновременферментного паисГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СЯСПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЬТИ ОРСНОМУ СВИДЕТЕЛ(71) Всесоюзный научский институт продук(54)(57) 1. СПОСОБ ПоЛИТИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТНЫХ Ппредусматривающий глубивирование продуцентов сконцентрированием ультрили выпариванием, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью утилзации сахаров культуральной жидк ти с получением наряду с ферментными препаратами спирта, а также повышения удельной активности целевых продуктов, полученную культуральную жидкость с биомассой или без нее сбраживают спиртовыми дрожжами Бассйагощусев сегечдздае до содержания остаточных сахаров 0,5-17. и концентрации спирта 3-5 Х, а концентрированию подвергают ферментноспиртовый раствор с выделением спирта из раствора.2, Способ по и. 1, о т л и ч аю щ и й с я тем, что выделение спир та при концентрировании ультрафильтрацией осуществляют из ультрафильтрата перегонкой.3. Способ по п. 1, о л и ч а -Гзобретение отцос:11 ся к спиртоВой и 111 крОбиолсгическОЙ прогьшсген - .:ости. а именно к способам получения аминолитических фермецтных пре 1арс 1 ТОБ о 5 11 зв стпы способы полуения амилолитических фермецтных препаратов,предусматривающие ультрафицьтрацио культуральной жигцкости с послецуюшей сушкой полученного концентрата б распьпением 1.Пз 1;звестных способов наиболееблизким по тсхнической сущности яв:Яется спОсОб получения амилолити" ческих фермецтных препаратов пре усматривягоги 1 Глуоинное к 5 льтиВиро. - .аИге продуцентов отделение биомас;,1 0 . СтпьтГ 1)ацг НОИ КгтгСОСТ 1 1 КОН- центрирование выпариванием цо сирогообразного состояния, илп вьгсуши- :) Ванием на распылителг;цой сушилкепо:1 учением П 01)ОВКосбразного препа- рата или угпьтрафипьтра.;ней с получением ко;цс)нтрата. с.одержашего ферл гь 2 )е;.;)статком этОГО способа. 5 В 5101 О ., гто 13 кльтуп) ал Гной жидко с т и ," с а о г с 51 г а:;:) 1) ";; о 1, О з я ) и 511 т о 3 "-, с:,ха;)с)загЛгТэзгг 5.ггягопеса ср:" г; , , "у )а 311 с 7.С 1 о)Оцэг 11 ИК 0сг) рь,.о затр .1 Н)те-. 1 в Огге с с) 1:О.- Ц" 1 и,.рс;,аци. 133 ицбо;гг,кой ц.:коса .И 13 н о с т 1 С) изобпеа" н 15, ч". ц:ц за.;.15 с:1)а)О 3 ку,)ьт ральО:. жЦ- О -1 с. ПО)у чецис., Ои этом нар)гд; с 1 ергецтнь и пг. 1 аг) ата нс-и;)а) т;:.к)ко 1013 ьг)пег ц;г-ИгНОС";т Е)Е;Ь.;- у)13"об" по г учения ахи) .:гтггче ских е р" аег Л 5)5-Нсе ку,:ьтгв. роьание; ро"цу,ецтов с :Оаед 5 ю н .г сонГОНТРИР)- аи ггьт ао.Пьпанис)и н;и: 13 ьпсг .а. СО. ии бзз цез " .б; а 11 вас спир.:ар 3 0,5-;% и гсо - :тг:.ции сп:р. а 3 )%, 3 .:Он сна"зиоованию . Одвег)а"-,Р,1;Дг)ПИЛ Га ИЗ раст ГО)э,е-г) ется р 1 концетргровс") а ггтьтпаьг - :1 ей гирт Выделять": гоге)3 ттспту и-:")егоцсой. Ппи лонцентрирОвании выпариванием мОжнО выделение спирта осуществлять одноВременно с концентрированием ферментного препарата.Сущность предлагаемого способазаключается в следующем.Осун;ествляют глубинное культивирование микроорганизмов-продуцентов амилолитических ферментов на питательной среде, содержащей источники углерода, азота и необходимые минеральные соли. при температуре 30- 35 С ц рН 3,8- 5,0 в течение 72-144 чОдо получения культуральной жидкости, содержащей амилолитическую активность 5 - 25 ед ЛС ц 1 мл и гл 1 окоа)11)а.Пую ак.гццность 20 - 200 ед ГЛС и 1 млВ к;гьтуральцой жидкости после рг 1) Г;с пзбг;.;у бсМассИ.гги 1 с. ОтДеляя ,оследн:шо вводят дро)юки Басс 1 агогггус:ез сете л з).ае и сбражива 1 от в течение 2)-. -. До содержания остаточных сахаров О., 5-1% и конЦентГ)аГии спегр - та 3 - 5 об,%, После этого полученн-,по е;,ентно-.Пиитов)о5)есь кон:н рггру; 1;у) ем улг Тра 1)илг;тг)ации1 с рс:.3 анетатцеллюл знь,: егбраны слс).гуче:11 С 5)пырауильтг)ов, содержа,-ГХ Сгт;Гт и ;ОЦЦЕ) тРата,. СОДЕРжаЩЕГО фЕТ)МСПТ.С г)Огг)е -сно из1 расг)1 тьтра. а пс) регопкойа концецтрирОВаь го. Срмегт 1.снольз 5 от на ехнолОГи ческие нужды Р )и конгецтрггрсвации.)ГОт -, - ) 66 гг;тх)Р)о )т Эм С УС ПЕ С кон" егтрагрей сухих веществ 16-20 Б.)Г)п.тленная с улг,т 5) ральная жидкость и.; ет . л 1 экоамилазн 5 ло акт.13 ность ГлС 150 ец/."л сбраживаемых сахаров Е 5%,От,ецяют биомассу фильтрованием, .э.те з культуральную жидкость ,)базляют дроюСи Яассггагошусез сете )сз 1 аесбра,;наот культуральную жггтгкость В течение 24 ч цо соцержания ",.:,Грс)53 до 0,9% и концецтра- Я с".; И,)"а 10 ) .) Эи %Д:,ггее ферментно-спиртовый раст- )Ог)тт трч рсва 1 т упЬтт лфИ 1 Ьра.- цией че)ез аГетатьте)глюлозную мем"у 1-100 3 гладипор" ПолуЧЕ;Пнй КОНЦЕЦТРат ССтЕР;ит С)ЕОМЕНТглокоаггилазь 1 с ак;ивцо(тьго 100 ед ГЛС997455 1 О 20 40 Предложенный способ Наименование показателя Прототип Оф 5-1 ф 0 8,5-10Азр, Гагагае 1000 130 Азр. аашог 1 0Азр. Гасагае 300Азр, ачашог 1500 0 АС, ед/мл ГлС, ед/мл ГлС,ед/мл 0 350 18003-5 Концентрация спирта, Е ВНИИПИ Заказ 113/3 Тираж, 523 Подписное Филиал ППП "Патент", г.Ужгород, ул,Проектная, 4 в 1 г препарата, который испбльэуется на осахаривание, Ультрафильтрат содержит спирт концентрацией 2,5 обЛ который направляют на перегонку.П р и м е р 2. Осуществляли глу- бинное культивирование Азр. ачашбгна среде следующего состава,%:Кукурузная мука 2,5Кукурузныйэкстракт 0,7Мел 0,2Магнезит 0,15-0,2Аммиачная селитра О,5Барда До 100 15Полученная культуральная жидкость имеет:Амилолитическую активность (АС) 10 ед/млГлюкоамилазную активность (ГлС) 30Остаточных сахаров 6,87Биомассу не отделяют от культу- ральной жидкости, а всю ее сбраживают. Вводят дрожжи ЯассЬагошусез 25 сегечзае и сбраживают смесь в течение 22 ч до содержания остаточных сахаров 0,57. и концентрации спирта 3,0 об.7. Затем смесь фильтруют и ферментно-спиртовый раствор концентрируют выпариванием.Получают концентрат с активностью по АС = 100 ед/мл и по ГлС =300 ед/мл. Спиртовый раствор соби 1 рают в спиртоловушке и конденсируют. В предлагаемом способе утилизируются сахара культуральной жидкости с получением при этом наряду с ферментными препаратами спирта, аР Содержание моно- и дисахаров вкультуральной жидкости, 7Активность препаратовАС, ед/мл также повышается удельная активностьферментных препаратов.Зто достигается совокупностьюуказанных в формуле признаков, аименно сбраживанием культуральнойжидкости спиртовыми дрожжами с получением концентрата, содержащегоферментные препараты, и ультрафильтрата, содержащего спирт.Культуральная жидкость поступаетна концентрирование очищенной отмоно- и дисахаров, что предотвращает процесс от инфицирования, так какблагодаря наличию этих сахаров (глюкозы, фруктозы, сахарозы, мальтозыи т,д.) создаются благоприятные условия для развития посторонней микрофпоры и потерям ферментативной активности,В связи с уменьшением исходнойконцентрации сухих веществ в культуральной жидкости за счет сбраживания углеводов создаются условия дляполучения концентратов с более высокой удельной активностью. В таблице приведены сравнительные данныеактивностей ферментных препаратовпрототипа и предлагаемого способа,а также моно- и дисахаров в культуральной жидкости,Зкономический эффект за счет получения дополнительного количестваспирта составляет около 30 тыс. рубпо заводу производительностью2000 дал спирта в сутки, При осуществлении предлагаемого способанаряду с получением дополнительного количества спирта увеличиваетсяактивность ферментных препаратов иуменьшается их объем,1