Способ получения средства, оказывающего нормализующее влияние на процессы тканевого обмена и обладающего антитоксическим и антинекротическим действием

(22)Зно 21.09.78 (21) 2665950/28-13 (5)М. Кл. с присоелннением заявки М А 61 К 35/40 3 ЬвударстиеаЯ комитет СССР ав два ш юебратекиЯ н вткрыткЯ(23) ПриоритетОпубликовано 15. 07. 82. Бюллетень26 Дата опубликования описания 15,07.82(7) Заявитель имени А.И,.Караева нститут фиэиоло 54 ) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕДСТВА, ОКАЗЫВАОЦЕГО НОРМАЛИЗУЮЩЕЕЛИЯНИЕ НА ПРОЦЕССЫ ТКАНЕВОГО ОБМЕНА И ОБЛАДАЮЩЕГОАНТИТОКСИЧЕСКИМ И АНТИНЕКРОТИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ тения - получениа направленного Цель изобового средствия. Изобретение относится к медицне, а именно получению,тканевыхорганотерапевтических препаратовкоторые могут быть использованыв качестве лечебных средств. 1 ОЦель достигается тем, что способ получения средства, оказывающего нормализующее влияние на процессы тканевого обмена и обладающего антисептическим и антинекротическим действием, заключающийся в том,что измельченные свиные почки гомогенизируют, разводят физиологическим раствором при соотношении сырья к раствору 3:1, обрабатывают 0 54-ным 2 о раствором щелочи, устанавливают рН 7,8 - 8,2, температуру 37-38 С, затем добавляют смесь, содержащую, вес.4: Поджелудочнуюжелезу 8-12 Селенисто-кислыйнатрий 0,009 - 0,03Сульфит натрия 0,9 - 1,4 Метионин 2,3 - 3,1 Нипагин 0,5 - 0,8 и проводят ферментолиэ в течение 5-6 ч при 37-38 С, рН 8,0-8,5, полученный гидролиэат затем диализируют и переосаждают в ацетоне.П р и м е р . Свежезамороженные свинце почки в количестве 1 кг из-, мельчают на мясорубке и повторно замораживают на противнях в морозильной камере при (-15- (-гаоС где они могут сохраняться до использования. Затем замороженный фарш повторно измельчают на мясорубке для получения гомогенной массы. Измельченный материал загружают в реактор с паровым обогревом и механической.мешвлкой и заливают 1-ным раствором йаС 1 для создания оптимальных биохимических2758 10 20 25 30 35 45 50 55 3 94условий в соотношении 3 ч сырья кч,раствора. При постоянном перемешивании 0,5,-ным раствором йаОН устанавливают РН реакционной смеси 7,88,2 и температуру смеси 37-38 С. Одновременно в реакционную смесь вносят все компоненты, вес.Г:Поджелудочнаяжелеза 8,0 - 12,0Селенисто-кислыйнатрий 0,009 - 0,03Сульфит натрия 0,9 - 1,4Иетионин 2,3 3,1Нипагин 0,5 - 0,8Физиологическийраствор 28,0 - 32,0ферментолиз при установленной температуре и постоянном перемешиваниипроводят в течение 5 ч, время отвремени проверяя РН и при необходимости доводя его снова растворомйаОН до рН 8,0-8,5. Затем смесь подогревают до 85-90 оС, дают остытьдо комнатной температуры и сливаютв диализатор, состоящий из тонкойцелофановой трубки,Диализ противводопроводной водыс с 14-15 С проводят в течение 44 чдо установления в лизате уд.веса==1,34. С помощью диализа удаляютнеорганический селен. После диализализат разбавляют 4 объемами ацетонаи оставляют на отстой на 24 ч, Затем отстоявшуюся жидкость отделяютдекантацией. Осадок отфуговывают ивысушивают на воронке Бюхнера ацетоном и эфиром. Окончательное досушивание проводят в сушильном шкафупри температуре не выше 60 ОС, Высушенный пооошок дополнительно измельчают и просеивают, пробу сдают наопределение в ней содержания органически связанного селена, которое проводят флуорометрическим методомВаткинсона, в модификации Назаренко.Содержание селена в исследуемом препарате 0,64+0,05 мкг/г. Выход порошка с 1 кг свиных почек 100 г,Препарат представляет собой порошок, светло-коричневого цвета со специфическим запахом, плохо растворимв воде., не растворим в спирте 50-96концентрации, хлороформе, ацетонеи петролейнов эфире.фармакологиеские исследованияПредлагаемого препарата проводилиследующим образом,Опыты проводились на беспородныхбелых пабораторным крысах весом 4150-180 г. Животные были разбиты на5 групп: в 1-4 группах было по 12крыс, в 5 группе - 20 крыс. Для срав-.нения лечебного эффекта при профилактике и лечении токсического гепатита,экспериментально вызываемого четыреххлористым углеродом, брали по дваселеносодержащих препарата: селенитнатрия и предлагаемый авторами тканевый препарат, содержащий органический связанный селен.Крысы 1 группы ( интактная группа)находилась в течение 21 дня на обычной лабораторной диете,ФКрысам И группы через день подкожно вводили 1 раз в день 40-ный мдгляный раствор четыреххлористого углерода из расчета 0,2 ил на 100 гвеса животного. Всего было 6 введений. На 5 день после последней инъекции 40-ного масляного раствора былозабито 6 крыс, .а на 7 день - оставшиеся 4 крысы.Крысам Е группы вводили 40-ныймасляный раствор четыреххлористогоуглерода по той же схеме, что и крысам Й группы.Но одновременно с кормомживотным давали тканевый препарат,содержащий органически связанный селен из расчета 1,5 г препарата на100 г корма. Содержание селена виспытуемом препарате 64 мкг/г, После б инъекций 403-ного масляногораствора четыреххлористого углеродаживотньм продолжали давать корм сиспытуемым препаратом до окончанияопыта, Затем на 5 и 7 дни после ежедневной инъекции забивали по 6 животных,Крысам Й группы вводили 40/-ныймасляный раствор четыреххлористогоуглерода по той же схеме, что и крысам 11 группы, но одновременно с кормом животным давали селенит натрия.в количеСтве адекватном по содержанию селена до 21 дня. На 5 и 7 днипосле последней инъекции четыреххлористого углерода забивали по бживотных.юКрысам Ч группы ежедневно в течение 1 мес давали предлагаемыйтканевый препарат в удвоенной дозеиз расчета 3 г препарата на 100 гдиеты. Затем на 30 день животныхдекапитировали,Во всех группах определяли выживаемость печеночный индекс ПИ ( веспечени из расчета на 100 г живоговеса ) и содержание сульфгидрильных942758 формула изобретения Составитель С.ИалютинаРедактор Н.Киштулинец Техред Л. Пекарь. Корректор :" взят"оаЮ Е ЕЕ ЕЕ ВЕ 4В Заказ 4936/8 Тираж 714 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раущская наб., д. 4/5филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул.Проектная, 4 групп исключая У группу в печени методом амперометрического титрования по Кедровой, Расчет вели в микромолях на 100 г печени.Кроме того, у животных всех групп определяли сравнительную патоморфологическую картину печени; наличие некротических очагов, реакции клеток печени на гистологические красители ( базофилия, эозинофилия), стадии пикноза ядер, вакуолизация.Полученные цифровые значения обрабатывали статистически и исчисляли в процентах к исходной фоновой величине этих показателей у интактных животных, принятых на 1004.Проведенные исследования показали, что тканевый препарат, содержащий органически связанный селен, выдерживает развитие воспалительного процесса в печени, экспериментально вызванного четыреххлористым углеродом, является биологически более активным, чем селенит натрия. Препарат не токсичен. 25Использование предлагаемого способа дает возможность получать биологически активный тканевый препарат, содержащий органически связаный селен для профилактики и лечения гепатита, препарат предотвращает развитие токсических и некротических процессов, Предлагаемый способ предусматривает использование малоценныхотходов мясной промышленности - свиных почек,Способ получения средства,оказывающего нормализующее влияние на процессы тканевого обмена и обла" дающего антитоксическим и антинекротическим действием, заключающийся в том, что измельченные свиные почки гомогенизируют, разводят физиологическим раствором при соотношении сырья к рвствору 3 : 1, обрабатывают 0,5 Ф-ным раствором щелочи, устанавливая рН 7,8-8,2,температуру 37-38 ОС, затем добавляют смесь, содержащую, вес.4:Поджелудочнаяжелеза 8 -12Селенисто-кислыйнатрий 0,009 -0,03Сульфит натрия . 0,9 -1,4Метионин 2,3 -3,1Нипагин 0 5 -0,8 и проводят ферментолиз в течение 5-6 ч при 37-38 С, рН 8,0-8,5, полученный гидролизат затем диализируют и переосаждают в ацетоне.