Способ определения остатков пенициллина в молоке

(51) М. Кл. 6 01 1 х 1 33/04 Гасударственный комитет до делам нзооретений и открытий(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОСТАТКОВ ПЕНИЦИЛЛИНА В МОЛОКЕИзобретение относится к молочной промышленности и касается н ализа молока, в частности способа определения в молоке остатков пенициллина, применяемого при лечении животных.Известен способ определения пенициллина в молоке, предусматривающий отделение жира в исходной пробе молока, фильтрацию, экстракцию, фильтрацию и очистку экстракта, выпаривание, растворение фильтрата и тонкослойно-хроматографическое определение пенициллина путем нанесения его раствора на пластину, разгонку хроматограмм в смеси растворителей и проявление хроматограмм 1.Недостаток способа состоит в том, что он длителен, трудоемок и не может быть применен для ежедневных серийных анализов.Цель изобретения - ускорение процесса и повышение точности определения.Поставленная цель достигается тем, что в исходной пробе осуществляют осаждение белков молока ацетоном в соотношении 1:2, отделение жира ведут экстракцией его хлороформом и полученный после выпаривания фильтрат растворяют в этиловом спир 2те, а при тонкослойно-хроматографическом определении пенициллина его спиртовой раст вор наносят на силуфоловую пластинку, для разгонки хроматограмм используют смесь растворителей этилацетат-уксусная 5кислота в соотношении 40:20, при этом проявление хроматограмм осуществляют парами йода.Предлагаемый способ позволяет определить минимальное количество пенициллина в молоке не ниже 0,5 мг/л.о Способ осуществляют следующим образом.В коническую колбу с притертой пробкой помещают 25 - 50 мл молока и приливают двойной объем ацетона (50 - 100 мл).Закрыв колбу пробкой, тщательно перемешивают содержимое, Спустя 3 - 5 мин отфильтровывают белок через складчатый фильтр в делительную воронку со шлифом, К фильтрату добавляют 70 мл хлороформа, встряхивают 2 - 3 мин. После разделения 2 о слоев нижний слой отбрасывают, а верхнийфильтруют через бумажный фильтр в кругло- донную колбу. Фильтрат упаривают на ротационном испарителе при 90 - 95 С. Сухой остаток в колбе растворяют в 5 мл эти787986 К 1 е обнаруж онтроль молока наруже О,О 2,0 Как видно из табл бы молока, не содер дают на силуфоловых но-коричневого цветаПри содержании руживаются четкие т интенсивность окрас с увеличением конц нтрольные пропеницилина не нках пятен тем ицы, к жащи пласт ературе и проявляю ляется на хромато емно-коричневого цв Сравнивая величин его окраски со станпенициллина, уста ию его в пробе моло 0,5 мг/л обнаоричневые пятна, орых возрастает ии пенициллина. мно-к и ко нтрац редлагаемыи способроведение анализа и рмула изобретен лового спирта. Аликвоту из этого раствора наносят на хроматографическую силуфоловую пластинку, помещают ее в камеру для хроматографирования и разгоняют в подвижном растворителе (этилацетат-уксусная кислота в соотношении 40: 20). После того, как фронт растворителя достигнет верхнего края пластинки, ее вынимают из камеры, подсушивают на воздухе при комнатной температуре и проявляют в парах йода. При содержании пенициллина в молоке не ниже Пример 1. В коническую колбу емкостью 100 - 150 мл помещают 25 мл исследуемого молока, содержащего 0,5 мг пенициллина, приливают 50 мл ацетона, тщательно перемешивают. Спустя 5 мин полученную смесь фильтруют через бумажный фильтр в делительную воронку емкостью 350 мл, приливают 70 мл хлороформа и встряхивают содержимое воронки 3 мин. Нижний хлороформенный слой сливают, а верхнюю фазу через бумажный фильтр фильтруют в круглодонную колбу емкостью 200 мл со шлифом, Фильтрат концентрируют на ротационном испарителе при 95 С. К сухому остатку приливают 5 мл этилового спирта.Из полученного спиртового раствора пенициллина 0,01 мл наносят на хроматографическую силуфоловую пластинку. Затем пластинку помещают в камеру для хроматографирования и разгоняют в подвижном растворителе этилацетат-уксусная кислота в соотношении 40:20. После того, как фронт растворителя достигнет верхнего края пластинки, ее вынимают, подсушивают на возду 0,5 мг/л он проявляется на пластинке в виде пятен темно-коричневого цвета.Способ апробирован в лабораторных условиях путем искусственного загрязнения молока водным раствором пенициллина, В каестве контроля используют обычное сырое цельное молоко.В таблице приведены результаты определения пенициллина в молоке по предлагаемому способу (проведено по три определения для каждого опыта). хе при комнатнои темп в парах йода,Пенициллин прояв грамме в виде пятен т та К-- 0,83 - 0,85, пятна и интенсивность дартными растворами навливают концентрац ка, равную 05 мг/л.Таким образом, п позволяет ускорить п повысить его точность Способ определения остатков пенициллина в молоке, предусматривающийотделение жира в исходной пробе молока, фильтрацию, экстракцию, фильтрацию и очистку экстракта, выпаривание, растворение фильтрата и тонкослойно-хроматографическое определение пенициллина путем нанесенения его раствора на пластинку, разгонку хроматограмм в смеси растворителей и проявление хроматограмм, отличающийся тем, что, с целью ускорения процесса и повышения точности определения, в исходной пробе осуществляют осаждение белков молока ацетоном в соотношении 1:2, отделение жира ведут экстракцией его хлороформом и полученный после выпаривания фильтрат растворяют в этиловом спирте, а при тонко787986 Составитель И. ПриваловаТехред А. Бойкас Корректор М. Демчнк Тираж.1019 Подписное Редактор Т. ВеселоваЗаказ 8390/74 ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий13035, Москва, Ж - 35, Раушская наб., д. 4/5 филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4слойно-хроматографическом определении пенициллина его спиртовой раствор наносят на силуфоловую пластинку, для разгонки хроматограмм используют смесь растворителей этилацетат-уксусная кислота в соотношении 40: 20, при этом проявление хроматограмм осуществляют парами йода. Источники информации,принятые во внимание при экспертизе. Чоп . Нагпапп, А. Тое, А. ВцФдеп цпп Ф, НееэсЬеп,/п 1 егэцсЬцпдеп цЬег МасЬ- ъе 18, 8 о 11 егцпд цпд деп 11 г 1 егцпд чоп Ап 11 Ь 1 о 1 йагцсО 81 апдеп 1 п дег М 1 сЛ.-М 1 сЬ- го 18 зепзс 11 ай, 1975, ч. 30, 8. 1 - 7.