Способ получения аминокислотного препарата для парентерального питания

еетенто.тека р;т И Е 1 ц 777903 О П Союз Ссеетских Сациалнотическик Ресиублик) Приоритет -СССРие делам изобретеи открытий 1. Бюллетень46описания 15.12,81 УДК 615.361(71) Заявйтел нинградский ордена Трудового Красного Зн аучно-исследовательский институт гематоло ереливания крови и 3-я Ленинградская горстанция переливания крови меныиидская Я АМИНОКИСЛОТНОГО ЕРАЛЬНОГО ПИТАНИЯ(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИ ПРЕПАРАТА ДЛЯ ПАРЕН 1 Изобретение относится к медицине.Известен способ получения аминокислотного препарата для парентерального ;-"питания путем кислотного гидролиза белка с последующей очисткой образовавшегося гидролизата, коррекции рН до 6 - 7, термической обработки целевого продукта, его стерилизующей фильтрации и розлива 11.Однако известный способ не позволяет получить аминокислотный препарат с высо ким выходом и свободный от пептидов, очищенный от побочных продуктов гидро- лизина, стабильный при хранении и сбалансированный по аминокислотному составу.Целью изобретения является повышение 15 выхода и качества препарата. Эта цель достигается тем, что гидролиз белка ведут при 125 - 135 С в течение 6 - 7 ч, очистку осуществляют последова- .2 О тельным пропусканием гидролизата через анионит и катионит при одновременной коррекции рН на катионите, далее к полученному продукту добавляют Ь-триптофан и Е-изолейцин в концентрации 0,6 - 2,2 г на 1 л препарата, а термическую обработку и розлив целевого продукта ведут в атмосфере инертного газа.П р и м е р 1. К 200 мл цельной крови, эритромассы или сгустков крови прибавляют 200 мл 2 н. соляной кислоты, Гидролиз проводят в запаянных стеклянных ампулах при 125 в 1 С в течение 6 - 7 ч, После гидролиза ампулы охлаждают, и гидролизную смесь отфильтровывают, Очистку кислого гидролизата от ионов хлора, гумминовых веществ и аммиака проводят путем последовательного пропускания раствора через анионит и катионит, Для этого в колонку, заполненную 500 г анионита ЭДЭП, подают 1800 мл кислого гидролизата с общим азотом 1,2 - 1,3%. Скорость заполнения смолы гидролизатом 40 мл/мин. Первые порции фильтрата отбрасывают. При содержании азота в вытекающей из колонки жидкости 0,2 - 0,4% (рефракция 1,337 - 1,338) уменьшают скорость потока до 25 мл/мин и подсоединяют колонку с катионитом КРСП. При рефракции вытекающей из колонки с катионитом жидкости 1,337 - 1,338 фильтрат начинают собирать в приемник. Азотистые про-, дукты элюируют 0,3 н. раствором едкого натра. Конец процесса ионного обмена устанавливают по показателям рН и общего азота в приемнике (рН 6 - 7, общий азот 0,7 - 0,8%, что соответствует рефракции раствора 1,3435). Объем полученного раствора 1980 мл. В полученный очищенный раствор добавляют аминокислоты Е-трип777903 Таблица Аминокислотный препарат Единицы измерения полученный попредложенному способу известный Средние данные 10 серий Общий азот, %Аминный азот, %Глубина расщепления, % рНАммиак, мгЦветность, ед. экст.Натрий, мэкв/л .- Калий, мэкв/лХлор, мэка/лЕ:триптофан, г/лг-изолейцин, г/лВыход азотистых продуктов (пообщему азоту), % 0,760,4256,07;0826,90,08134,118,9193,40,0150,353 0,78 0,62 78,3 6,91 4,7 0,04 32,1 10,0 33,6 0,7 2,0 72 4П р и м е р 3, К 20,0 л цельной крови,эритромассы или сгустков крови прибавляют 20,0 л 2 н. соляной кислоты. Гидролиз проводят в реакторе при 125 в 1 С в те чение 6 - 7 ч. После гидролиза смесь охлаждают и фильтруют. Для очистки кислого гидролизата от ионов хлора, гуминовых веществ и аммиака раствор сначала пропускают через анионит ЭДЭП, и собирают фильтрат в приемник. После очистки " на анйоните фильтрат пропускают черезкатионит КРСП.В колонку, заполненную 7 кг анионита,подают 25 - 26 л кислого гидролизата с общим азотом 1,2 - 1,3%, Скорость заполнения смолы гидролизатом 500 - 600 мл/мин.Первые порции фильтрата отбрасывают, Присодержании азота в вытекающей из колонки жидкости 0,2 - 0,4% (рефракция 1,337 - 1,338) уменьшают скорость потока до 200 - 250 мл/мин и начинают сбор фильтрата в приемник. Азотистые продукты элюируют 0,3 н. раствором едкого натра.Конец процесса ионного обмена устанавли нают по показателю общего азота в приемнике (0,7 - 0,8%, что соответствует рефракции раствора 1,344). Объем полученного раствора 28,05 л./Полученный щелочной раствор, очищен ный от избытка ионов хлора и гуминовыхвеществ, подают на колонку с катионитом (объем раствора 28,05 л). Скорость потока через катионит 200 - 250 мл/мин. При рефракции вытекающей из колонки с катиони том жидкости 1,337 - 1,338 фильтрат начи- .нают собирать в приемник. Азотистые продукты элюируют дистиллированной водой.Конец процесса ионного обмена устанавливают по показателям рН и общего азота в 40 приемнике (рН 6 - 7, общий азот 0,7 - 0,8%, , что соответствует рефракции раствора1,3435). Объем полученного раствора 28,0 л,777903 Формула изобретения Составитель С, МалютинаТехред Л, Куклина Редактор Б, федотов Корректор И. Осииовская Заказ 20/35 Изд,650 Тираж 694 Подписное НПО сПонскъ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/53 на, Хврьк. фил, пред. Патент В очищенный раствор добавляют аминокислоты Е-триптофан и Л-изолейцин из расчета 0,7 и 2,0 г соответственно на 1 л рас.твора.Препарат стерилизуют путем автоклави"- 5рования в атмосфере азота и последующего фильтрования через фильтр Миллипор.,Результаты сравнительного анализа состава препаратов, полученных с применением предложенного способа и известного, 10приведены в таблице.Из таблицы видно, что предложенныйспособ позволяет получить раствор с глубиной расщепления белка не менее 75%,т. е. практически смесь свободных аминакислот, При этом возрастает выход азотис-тых продуктов 1 свободных аминокислот) с53% в известном способе, до 72% - в пред-,лагаемом, Более чем в 5 снижается со,держание аммиака, значительно уменьшается содержание натрия и хлора, кон-. -центрация которых в новом препарате непревышает их концентрациив плазме кро-ви, Содержание изолейцина и триптофана вновом препарате увеличено в 6,5 и 2 раза 25соответственно,Препарат стабилен при хранении. Имеющиеся данные свидетельствуют о том;-что"йтечение трех лет хранения препарат полностью сохраняет свои физико-химические 30и биологические свойства,Таким образом, полученный по предложенному способу аминокислотный препарат практически не содержит пептидов, побочных продуктов гидролиза белка - гуминовых веществ, аммиака, сбалансирован по аминокислотному и минеральному составам, стабилвн при хранении. Способ получения аминокислотного пре-. парата для парентерального питания путем кислотного гидролиза белка с последующей очисткой образовавшегося гидролизата, коррекции рН до 6 - 7, термической обработки целевого продукта, его стерилизующей фильтрации и розлива, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью повышения выхода и качества препарата, гидролиз белка ведут при 125 в 1 С в течение 6 - 7 ч очистку осуществляют последовательным пропусканием гидролизата через анионит и катионит при одновременной коррекции рН на катионите, далее к полученному продукту добавляют 1.-триптофан и 1.-изолейцин в концентрации 0,6 - 2,22 г на 1 л препарата, а термическую обработку и розлив целевого продукта ведут в атмосфере инертного газа.Ф Источник информации, принятый во внимание при экспертизе:1. Чаплыгина 3. А., Тхоржевская 3. С., Сенчило Е. А, Проблемы гематологии, 1973, 18, 7, 15.