Способ количественного определения кислых полисахаридов

ОП ИКАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ Соеэ Советскик Социалистических ттеспублик(23) Приоритет 6 01 и 31/02 С 08 В 15/04 Государственяыи комитет СССР но дедам изобретений н открытияДата опубликования описания 1 Ь 0980(54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ КИСЛЫХ ПОЛИСАХАРИДОВ Изобретение относится к медицинской проьыаленности и касается анализа природных соединений, в особенности лекарственных соединений из растительного сырья.Известен способ количественного определения натрий-карбоксиметилцеллюлозы КМЦ ) осаждением сульфатом меди в виде ее медной соли, отделением осадка и титрованием не вступившего в реакцию избытка сульфата меди 11.Однако указанный способ является продолжительным и трудоемким, так как .требуется точное соблюдение кис лотности растворов вначале при рН 2,2-2,4 и затем доведение до рН 4,0-4,1; несколько часов занимаеч Фильтрование и прозвание получаемого аморФного осадка. Кроме того, 20 метод характеризуется нечетким изменением окраски раствора при титровании ввиду обильного осадка иодида меди, который адсорбирует крахмал, применяемый в качестве индикатора. Метод дает удовлетворительные результаты только при определении больших навесок КМЦ (0,5-1,0 г) и непригоден для полумикроопределений 0,01-0,1 г вещества), что необхо димо при анализе КМЦ и кислых полисахаридов (пектина, альгина) в смесях с другими веществами, например в лекарственной смеси с флавансидами (гранулы "флакарбин" и др.) .Цель изобретения - упрощение и ускорение анализа и повышение его точностиПоставленная цель достигается тем, что полисахариды (пектин, альгин и др.) осаждают 0,5-1,5-ным водным или метанольным раствором ацетата свинца, осадок отделяют центрифугированием и после промывания проводят комплексонометрическое титрование свинца раствором трилона Б в присутствии соответствующего для ионов свинца металлнндикатора.Способ осуществляют следующим образомОколо 20 мг КМЦ или других кислых полисахаридов осаждают 3-5-кратным весовым избытком раствора ацетата свинца, осадок отделяют центрифугированием, отмывают от маточного раствора и проводят комплексонометрическое титрование свинца растворяем трилона Б в присутствии индикатора ксиленолового оранжевого.+4,7 751,4 чищенна 3,83 955,+5 53 000 О П ри м е р 1. В центрифужную пробирку емкостью,25-50 мл помещают 10 мл исследуемого водного раствора :и прибавляют 5 мл 0,5-ного водного раствора уксуснокислого свинца. Смесь реагентов в центрифужной пробирке перемешивают стеклянной палочкой, которую затем проьывают 5 мл воды, присоединяя ее к центрифугируемой смеси. Через 20-30 мин взвесь цент рифугируют 5-10 мин со скоростью 5-6 тыс. оборотов в минуту, жидкость над осадком осторожно сливают в колбу для титрования, а осадок промывают взмучиванием с 20 мл водно-спиртовой смеси с помощью той,же палочки, промывая ее 5 мл указанной смеси. После. В случае определения КМЦ и кислых полисахаридов в смеси с флаваноидами или мешающими определению веществами смесь предварительно обрабатывают горячим спиртом.При анализе гранул "Флакарбин" кроме обработки смеси спиртом КМЦ осаждают иэ подкисленного уксусной кислотой водного раствора метанольным раствором уксуснокислого свинца в смеси с триэтаноламином. Это позволяет унифицировать реактив для последую щего осаждения кверцетина в метиловом спирте. Кроме того, определение КМЦ проводят титрованием свинца в осадке после растворения его в азотной кислоте. центрифугиронания проьывную жидкость осторожно сливают в колбу для титрования, туда же прибавляют 100 мл воды, 10 мп ацетатного буфера рН 5,5 около 0,5 мя 0,1%-ного водного раствора ксиленолового оранжевого и титруют 0,01 моль раствором трилона Б до изменения красно-фиолетового окрашивания в желтое. Разность между титрованием реактива и фильтрата соответствует расходу титранта на осах 1 ф даемый полисахарид.Результаты количественного определения КМЦ и кислых полисахаридов комплексонометрическим методом и из- .вестным способом представлены в 15 табл. 1.Таблица 1 П р и м е р 2. Определение КМЦ в гранулах "Флакарбинф. Около 1 г порошка растертых гранул точная навеска) в мерной колбе емкостью 50 мл обрабатывают 2-3 раза горячим этиловым спиртом, сливая спиртовый раствор через стеклянный фильтр пор 40. Фильтр промывают 10-15 мл горячей воды, которую помещают в мерную колбу, с промытой навеской препарата. Затем в эту же колбу прибавляют 20 мл воды и взбалтывают в течение 15-20 мин до получения однородного раствора и доводят водой до метки.10 мл полученного раствора помещают в центрифужную пробирку, прибавляют 2,5 мл разведенной уксусной кисда жи осамд ным и свинц лексо Источники информации,инятые во внимание при экспертиз 1. ОСТ 6-05-386-73 (прототип).Составитель Т.Мартинскаяедактор О.Колесникова Техред А.Щепанская Корректор Г.Назарова Тираж 1019 Поарственного комитета СССРэобретений и открытийЖ, Раушская наб., д. 4 Заказ 81 исно ВНИИПИ Гос по делам13035, Москва Патентф, г. Ужгород, ул. Проектная илиал лоты, 5 мл 1,5-ного метанольногораствора ацетата свинца с 10-нымтриэтаноламином, жидкость перемешивают и оставляют на 20-30 мин. Затемпроводят .центрифугирование и промывание осадка указанным способом. Осадокв центрифужной пробирке взмучиваютстеклянной палочкой с 1 мп разведенной азотной кислоты до растворенияосадка. Содержимое пробирки с помощью 70-80 мл воды количественно пеПреимуществом предлагаемого метоявляется простота, меньшая продолтельность, большая точность и воэ" можность проведения полумикроопределений КМЦ и кислых полисахаридов в исходных препаратах и в смесях с другими веществами( моносахаридами, флавоноидами, нейтральными полисахаридами и др.) . формула изобретения Способ количественного определея кислых полисахаридов из раствор реносят в колбу емкостью 200-300 мл, прибавляют раствор ацетата натрия до рН 5-6, и проводят тнтрованне 0,01 моль раствором трилона Б укаэанньдч способом.Результаты количественного определения КМЦ и кислых полисахарндов в искусственных смесях гранул "флакарбин" (состав смеси,: глюкоза 76, КМЦ и пектин 10, кварцетин и ликуразид 2) представлены в табл. 2.Таблица 2 ем расем осадо т лелью уи повьые провметаноа титрометричес вором соли металка и титрованиеми ч а ю щ и й срощения и ускоренияения его точности,дят 0,5"1,5-ным вод"ьным раствором ацетатванне проводят компким методом. осаждени отделени металла, что, с ц анализаени ли