Способ выделения рибоксина

ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИ ЕТЙДЬСТВУ Союз Советских Социалистических Республик(22) Заявлено 061277 (21) 25511с присоединением заявки Йо/23-0 С 07 Н 19/16//А 61 К 31/70 Государственный комитет СССР ио делам изобретениИ и открытиИ(53) УДК 547,963. .3,07(088.8) ата опубликования описания 30058(71) ЗаявительВсесоюзный научно-исследовательский технологический инстит антибиотиков и ферментов медицинского назначения(54) СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ РИБОКСИ Изобретение относится к усовершен. ствованному способу выделения рибок- сина (инозина), применяющегося для лечения сердечно-сосудистых заболеваний. 5Известен способ выделения рибок- сина иэ раствора смеси нуклеотидов, включающий образование металлокомп- лекса введением 0,8-ного раствора серебра с последующим отделением ме О талла пропусканием через подкисленную суспензию комплекса сильного тока сероводорода, и выделение целевого продукта проводят отделением осадка сульфида серебра, нейтрализацией 15 раствора полученного после отделения осадка сульфида серебра раствора гидроокисью бария, осаждением избыточного бария сульфатом натрия, упарива нием раствора и кристаллизацией целе вого продукта из 80-ного зтанола(1).Известный способ имеет следующие недостатки: использование соли дорогостоящего металла, недостаточно пол. ное комплексообразование рибоксина 25 с серебром в присутствии большого количества примесей, осаждение комплекса и его разлЬжения в кислых растворах в течение продолжительного.времени (происходит гидролиз рибоксина)ЗО 2что приводит к низкому качеству и к большим потерям целевого продукта (выход целевого продукта 8 + 2 с содержанием гипоксантина 5 -и гуаноэина 20).Цель изобретения - упрощение процесса, увеличение выхода и качества целевого продукта.Цель достигается использованием н качестве комплексообраэователя водорастворимых солей меди, подкислением раствора до рН 4,0-5,0, добавлением раствора щелочи дорН 8,3-8,7, отделением металла комплекса от рибоксина добавлением порошка щавелевой кислоты до рН 2,7-3,8, охлаждением до 2 + 2 С и выделением целевого продукта зкстракцией горячей водой тем,пературы 80-95 С, что позволяет повысить выход целевого продукта до 4,20- 4,53, получить целевой продукт с содержанием гипоксантина не более 2 и гуаноэина не более 3, заменить дорогостоящий реагент комплексообразования (соли серебра) на доступный (соли меди) и сократить число стадий выделения.Способ выделения рибоксина иэ растворов смеси нуклеотидов, согласно настоящему изобретению, заключается в(ракты помещают в емкость, где рибоксин из раствора выделяют вымораживанием.П р и м е р 2. Берут 800 л нативного раствора с содержанием всех нуклеотидов 11 г/л, в том числе рибокси.на 9 г/л. Содержание остаточного сахара в нативном растворе 0,9, В,нативный раствор добавляют порошок перхлората меди Сц(СЕО) ) в соотношении 2:1. Далее аналогично примеру 1.П р и м е р 3, Берут 800 л нативного раствора с содержанием всех нуклеотидов 11 г/л, в том числе рибоксина 9 г/л. Содержание остаточногосахара в нативном .растворе 0,9. В 15 нативный раствор добавляют порошокмеди азотнокислой Сц(ИОз)д 1 в соотношении 2:1. Далее аналогично приме"1.П р и м е р 4. Берут 800 л натив ного раствора с содержанием всех нуклеотидов 9 г/л, в том числе рибокси"на 8 г/л, Содержание остаточного сахара в нативном растворе 2,8 г/л. Внативный раствор добавляют порошокмеди сернокислой в количестве 21,6 кгпри соотношении 3:1. Далее аналогично примеру 1.П р и м е р 5Берут 100 л нативного раствора с содержанием всех нуклеотидов 12,5 г/л, в тОм числе рибоксина 7 г/л, гуаноэина 3,0 г/л и гипоксантина 2,5 г/л. Содержание остаточного сахара 1,4. В нативный раствор добавляют порошок меди сернокислой в соотношении 2:1 к общему содержанию иуклеотидов. Измеряют рН ираствором 30-ной серной кислоты доводят до значения 4,5. Раствором40-ной щелочи подщелачивают до рН5,3 + 0,1. При этом выпадает осадоккомплекса меди с гипоксантином. Осадок отфильтровывают, вес осадка17 кг. Фильтрат далее обрабатываютаналогично примеру 1.П р и м е р б. Берут 80 л нативного раствора с содержанием всехнуклеотидов 12,5 г/л, в том числерибоксина 7 г/л, гуанозина 3,0 г/ли гипоксантина 2,5 г/л. Содержаниеостаточного сахара 1,4, В нативныйраствор добавляют порошок меди сернокислой в соотношении 2:1 к общемусодержанию нуклеотидов. Измеряют рНи раствором 30-ной серной кислотыдоводят до значения 4,5, Раствором40-ной щелочи подщелачивают дорН 5,2. Выпавший осадок комплексамеди с гипоксантином отфильтровывают, фильтрат продолжают подщелачивать до рН 7,5. Выпавший вторичноосадок, являющийся комплексом медис гуанозином, отфильтровывают, фильтрат далее обрабатывают аналогичнопримеру 1.формула изобретения1. Способ выделения рибоксина иэ Время подщелачивания 40 мин. Суспензию выдерживают 30 мин и выпавший комплекс меди с рибоксином отфильт р ровывают, Выход рибоксина на этой стадии 98-99. Вес комплекса 139 кг при влажности 80. Полученный комплекс промывают водой течение 20 мин, из расчета 3 л воды на 1 кг комплекса и снова отфильтровывают. Комплекс меди с рибоксином переносят в реактор, снабженный рубашкой с рассолом и мешалкой, со скоростью вращения 100 об/мин. Включают рассол и мешалку и начинают засыпать порошок шаве О левой кислоты. После выделения первой порции щавелевой кислоты вводят рН - метрический датчик и далее щавелевую кислоту добавляют до значения рН 2,7- 3,5, Количество загруженной щавелевой 45 кислоты - 11 кг. Суспензию рибоксина с оксалатом меди при включенной мешал. ке охлаждают до температуры 2 + 2 С и выдерживают до остаточной концентрации рибоксина в растворе не более О 15 г/л, Время выдержки 3 ч. Суспенэию отфильтровывают. Фильтрат с содержанием рибоксина и оксалата меди переносят в друк-фильтрэкстрактор. В экстрактор добавляют горячую воду с температурой 80 С в количестве 46,5 л, Перемешивают в течение 15 мин и отфильтровывают. Концентрация рибоксина в Фильтрате 80 г/л. После Фильтрации в экстрактор заливают вторую порцию горячей воды в количестве 15 л. 60 Концентрация рибоксина в фильтрате 43,5 г/л. При третьей экстракции концентрация рибоксинЪ в растворе 11 г/л. Выход рибоксина на стадии экстракции составляет 60. Первйй и второй зкст введении в раствор смеси нуклеотидов водорастворимой соли меди, предпочтительно сульфата меди, предпочтительно в мольном соотношении к общему содержанию нуклеотидов 2:1, в добавлении кислоты до рН 4,0-5,0, в добавлении раствора щелочи до рН 8,3-8,7, предпочтительно дробное подцелачивание до рН 5,5-7,1 с удалением промежуточного осадка, последующее отделение металла проводят добавлением к комплексу порошка щавелевой кислоты до рН 2,7-3,8, охлаждением до 2 +2 С и выделение целевого продукта осуществляют экстракцией горячей водой температуры 80-95 С с после- цующим вымораживанием экстракта.П р и м е р 1. Берут 800 л нативюго раствора с содержанием всех ну:леотидов 11 г/л, в том числе рибокина 9 г/л. Содержание остаточного сахара " в нативном растворе 0,9. В танивный раствор добавляют порошок меди сернокислой (СцЯО 5 НдО) в количестве 17,6 кг. Измеряют рН и раствором 30-ной серной кислоты доводят до значения 4,5-5,0, раствором 40-ной щелочи (МаОЙ) подщелачивают до рН 8,6. раствора смеси нуклеотидов, включаю744003 растворимой соли меди используютсульфатмеди. 0 15 Составитель Л. НикулинаРедактор Т. Никольская Техред .Н.Бабурка Корректор,А. Гриценко Тираж 495 Подписное ЦИНИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5Заказ 3653/2 филиал ППП Патент, г, Ужгород, ул. Проектная, 4 щнй образование металлокомплекса с послеующим отделением металла и выделением целевого продукта, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью упрощения процесса, увеличения выхода и качества целевого продукта, образование металлокомплекса осуществляют введением водорастворнмой соли меди, подкислением до рН 4,0- 5,0, добавлением раствора щелочи до РН 8,3-8,7, последующее отделение металла проводят добавлением к комплексу порошка щавелевой кислоты до рН 2,7-3,8, охлаждением до 2 + 2 С и выделение целевого продукта осуществляют экстракцией горячей водой температуры 80-95 С с последующим вымораживанием экстракта.2, Способ по п. 1, о т л и ч а ющ и й с я тем, что в качестве водо-. 3. Способ по п. 1. о т л и ч а ющ и й с я тем, что водорастворимую соль меди вводят в мольном соотношении к общему содержанию нуклеотидов 2:1,4. Способ.по п. 1, о т л и ч а ю - щ и й с я тЬм, что добавление щелочи до конечного значения рН 8,3-8,7 проводят дробно до рН 5,5-7,1 с уда-. лением промежуточного, осадка. Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Патент ФРГ 9 1133730,кл. 12 р 7/11, опублик. 1956 (прототип) .