Способ получения антибиотика

(61) Зависимый от патента(22) Заявлено 04.01.72 (21) 1733327/28 1 51) М. Кл, С 12 т 1 9/00 32) Прноритет 07.01,71(31) 181/733) Швейцария Государственный кветвт Соввта Мнннстроа ССС по делам нзобретвнвй н отнрытнй43) Опубликовано 25.09.75,Бюллетень35 (5 З) УЙК615,779.932 45) Дата опубликования описания 19.03.7,(088 8) И ностраАннемарн Клосснн Тале (ф нсИностранная фирмаСандос АГ (11 вейцарня) 1) Заявител(54 ЛУЧЕНИЯ АНТИБИОТИК 7" 1 эобре при 12-3С). На ицушныйа н свет ение относится. к фармацевтнчпенности,енный способ получения анти кои промьПреаложбнотнка эаСкае 1 отить аГеп еце шйтй субцнейпереевый ключается в том, что культуртоьовит Мыве ех тгаев%7,3877т на среце, соцержащей источ несколькося темныеково-корнчпоник н с.па шнваюли угле азота, минеральные соли т и к ро зле менты с и осл м выаеле- ьтуральной страт ет процукта нз к целия известнытем целев ми прнемамн. 10прн 12-37 Ссуток.мои Оьоаит) костя н ствляюие 6-1 Вырашиван и рН 5,7-6,0 Новый штав тече м виц лте еХ Гге жен в по ахта (Швейцария),тдана на хранение в К венной пробе часть которо ыл раттатпцтт.с ОГ А 9 т сцИ а 1 оп йевевф с 3 ъ для 11 ч 181 сп ) тате Иллинойс (США) поц 77,м вида Ьвс(отьцтп оеоаитп тмтги т на агаре из солоцового 25 Ощупей Йл 1 еЗ Ре(КООъеу п ОС 11 ьаЭее 1 орпяз 1в г. Пеория вномерол 1 ИЙЕ 3Новый н.тамст Гтев выращиваю н дрожжевого экстрактов (прецпочтительно при 27 ной среде он образует воэ белого-светло-серого цвет стратный мнцелий. Черезпосле ннкубацнн образуют тецнн, окрашенные в олив цвет. Обратная сторона ко окрашены в коричневый цв В чистой культуре, наприл 1 ер, иа солоцовом агаре при температуре 12-30 С гриб легко образует ипоцовые тела, а прн более высоких температурах в течение 8- 10 суток. В зависимости от условий культуры плодовые тела окрашены в зепеныйоливково-зеленый цвет, который переходят в темно-коричневый. Оня шарообдюны. Их диаметр 200-300 мкм. На верхушке плодовые тела имеют округлую пору. 1 х перицнй состоит нз коричневых клеток, спасшихся меанцркчески, Онн нл 1 еют ипотиун оболочку. Пору окружают многочисленные волоски коричнево-зеленого цвета, выхоцящне нз наружного слоя клеток, Г 1 о л 1 еле4856 О 2 МальтозуБобовую мукуПептонДрожжевой экстрах.КН РО2 4МЗО 4. 7 Н 2 ОС.(:,)3 2ЙаС 17 е 307 Н О4 22 ь С 1МиС 14 Н ОСь 305 Н ОСаС 1 6 Н О2 2 5010,01,00,50,5 0,5 0,5 0,10,05 0,01 0,010,0050,005 3удаления от поры их количество уменьшается.У основания их диаметр составляет цо4,5 мкм, кверху нх диаметр состанлнет до3 мкм. Они имеют ярко выраженную волны бстую форму, несут многочисленные шййыи во всю длину разделяются перегородками.Аски с растянутым основанием, по форме напоминающие булаву, выхоцят из Игвнутреннего основания перетеция, Аскизаключены в тонкую оболочку, которая разрушается до созревания аскопор (по восемь в кажцой аске), Аскопоры оцноклеточны, по форме они напоминают лимон с 1 бзаостренными оконцами, Сначала они бесцветны, а затем окрашиваются в красноватый, а в конце в темно-бурый цвет, Наоцном конце они имеют легко заметнуюпору прорастания. Длина спор 9-12 мкм. ширина 6-9 мкм,Новый штамм М 8 Е 3877 выращиваютна многих питательных срецах,Источником углерода цля нового штамма являются глюкоза, сахароза, крахмал, блактоза, цекстрин, источником азота - органические и неорганические аэотсодержещие соецинения, например, пептон, црожжевой и мясной экстракты, сульфат аммония, нитрат аммония, аминокислоты и обыч-,ные минеральные соли и микроэлементы,Для получения нового антибиотика жицкую питательную срецу заражают суспенэней спор нового штамма вица,СЬаеЬрчмтй фоьозмчи культуру инкубируют в течение 6-12 суток предпочтительно 10 суток) при температуре 12-37 С (предпочтительно приоо27 С) и значении рН 5,7-6,0.Выращивание провоцят в аэробных условиях в куль 40туре на поверхностном слое срецы или впогруженной культуре со встряхиванием,или в ферментаторах с вцуванием воздуха или азота и перемешиванием, После полуФб чения антибиотика его фильтруют и получают известными способами экстракпии и/или адсорбции иэ культуральной жицкости или из мицелия. Новый антибиотик выделяют из неочищенного экстракта хроматографическим путем, с помощью кристаллизации или путем противоточного распределения.Одним из методов является экстракциябб фильтра с помощью энтиленхлорица, но используют и цругие органические раствори- тели, например бензолхлороформ, бутилацетат, метиленхлориц, бутанол или уксусныйэфир. Затем из экстрактов уцаляют растворитель, например, путем перегонки, а остаток очищают хромотографическим путем наадсорбиругощих средствах, например глиноземе, силикагеле, силикате магния, илипутем противоточного распределения и/иликристаллизации,Новый антибиотик находит применениев качестве лекарственного средства.Он оказывает тормозящее действие наразвитие отека, обладает свойствами, прецотвращающимй язвы, оказывает иммуносунрессивное действие на иммунитет клеток.Новый антибиотик применяют как в чистой кристаллической или аморфной форме,так и в виде Неочищенного концентрата, атакже в соответствующих лекарственныхформах для орального, энтерального илипарэнтерального введения. П р й м е р, В ферменаторе 10 лпитательного раствора, содержащего на1 л (в г): и деминерализованную воду, заражается суспензией спор штамма ИЙВ 2 3877 и инкубируется с аэрацией 1,0 л воздуха (мин) л питательного растворев при перемещивании 300 об/мин в течение 10 суток при 27 С и значении рН 5,7. Затем раствор фильтруют, получают около 9 л культуральног о фильтра и около 1 кг мицелия, Культуральный фильтрат экстрагируют этиленхлорицом три )аза по 9 л, Затем органические фазы промыва 1 от воцой цва раза по 4 л, сушат иа сульфате натрия и упаривакт цосула, После