Способ количественного определения высших карбоновых кислот и n-ацилпроизводных аминокислот на их основе

(51)5 0 01 М 31/00 Жд"-:ТЕХФ",ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ О О (л 4 Комитет Российской ФедЕрации по патентам и товарнымзнакам(56) Суноэова Е.В., Трубников В,И. и Сакодынский К.Н, Газовая хроматография аминокислот, М.: Наука, 1976.Михалкин А.П, и Степанова Л,П. Определение высших карбоновых кислот в продуктах ацилирования 6-амино-гексановой кислоты методом гаэожидкостной хроматографии. Научно-технический реферат. сб, сер. горнохимическая промышленность, вып. 2, М НИИТЭХим, 1990. Изобретение относится к области аналитической химии, а именно к способу хроматографического разделения высших карбоновых кислот (В КК) и продуктов ацил ирования аминокислот и/или смесей аминокислот укаэанными карбоновыми кислотами,Известен способ хроматографического разделения ВКК и аминокислот с переводом их в относительно легколетучие производные по карбоксильной и аминогруппе. При этом время удерживания производного глицина в виде н-пентилового эфира М-гептаноилглицина с общим числом атомом углерода в соединении 14 составляет 29,4 мин,Ю 2 2000567 С(54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВЫСШИХ КАРБОНОВЫХ КИСЛОТ И й-АЦИЛПРОИЗВОДНЫХ АМИНОКИСЛОТ НА ИХ ОСНОВЕ(57) Изобретение относится к области аналитической химии. Сущность изобретения состоит в последовательной обработке анализируемой пробы диоксаном и сульфатом аммония, метилированием диаэометаном и хроматографированием полученной смеси, в обработке анализируемой пробы раствором фосфорной кислоты до рН 3, диоксаном, насыщенным раствором сульфата аммония, отбирают аликвотную часть органической фазы, обрабатывают ее сначала метанолом, затем метилируют диазометаном и хроматографируют полученную смесь. Известен способ определения ВКК впродуктах ацилирования 6-аминогексановой кислоты хроматографическим разделением анализируемой пробы на хромосорбес полиэтиленгликольсукцинатом, активированным ортофосфорной кислотой. Однакоданный метод определения ВКК не дает возможности одновременно при этом определять и М-ацилпроизводные аминокислот,Данный способ состоит в том, что анализируемую пробу (0,5 г) обрабатывают диоксаном (2 мл), насыщенным растворомсульфата аммония (1 мл), сильно встряхивают (2-3 мин) и после расслоения отбираютверхний слой, добавляют метанол и раствордиазометана в диоксане,2000567 Таблица 1 Стечень изалеченич /Ад/ и коэффициенты традуироаочные /кот/ индиат Ауальных карбоноаых кислотетаном Сщ 0,63 0,6 З 0,58 0.54 0.67 0,59 0.66 0,74 0,51 0,50 0,48 ПоЛноту извлечения ВКК и 1 ч-ациламинокислот определяют путем сравнения коэффициентов стандартизации (калибровочных коэффициентов), полученных на смесях индивидуальных соединений после их извлечения из водных растворов с последующим высаливанием (сульфатом аммония) и непосредственно в гидрофильном растворителе,Количественное определение анализируемой смеси проводили по методу внутреннего стандарта (триптопилфосфата) с использованием пламенно-иониэационного детектора на стеклянной колонке(100 х 0,3 см), заполненной инертным супером и 5 оОУ, при температуре колонки 110- 240 тС (5" С/л ин) и испарителя - 300 С,П р и м е р. Искусственно приготовленные смеси ВКК(Со-Св:2) - система А, реальных продуктов ацилирования гидролизатов белка, содержащих свободные-аминокислоты и короткие олигопептиды, указанными карбоновыми кислотами С 9-С 18,2 (система Б) и смеси продуктов ацилирования гидролиэатов белка кислотами коксового масла, в основном представленными карбоновыми кислотами С 12-С 14, в смеси с И-пальмитоилаланином, М-стеароилглицином и й-стеароала/1 анином (система В) последовательнообрабатывают как описано диоксаном, насыщенным раствором сульфата аммония иметилируют диазометаном,5 Массовую долю компонентов анализируемых смесей определяли как минимум подвум навескам и трем вводам пробы из каждой навески в испаритель хроматографа,Расчет доли компонентов проводили по ме 10 тоду внутреннего стандарта (трипропилфосфат) с оценкой коэффициентовстандартизации. Данные экспериментально подтвержденных результатов представлены в табл, 1-3."5 Формула изобретенияСпособ количественного определениявысших карбоновых кислот и 1 ч-ацилпроизводных аминокислот на их основе, включающий хроматографирование, о т л и ч а ю 20 щ и й с я тем, что анализируемую пробупоследовательно обрабатывают растворомфосфорной кислоты до значения рН 3, диоксаном, насыщенным раствором сульфатааммония, отбирают аликвотную часть орга 25 нической фазы, обрабатывают ее сначаламетанолом, затем метилируют диазометаном и хроматографированию подвергаютполученную смесь,2000567Таблица 2Воспроиэводимость результатов определения массовых долей карбоновых кислот в продуктах ацилирования гидролизата белкаа блиц Достоверность результатов методики определения массовых долей карбоновых кислот в продуктах ацилирования гидролизата белкаСоставитель С.Хованскаяедактор А,Кучеряковэ ТехредМ,Моргентал Корректор М.Максимиэ Заказ 3077 Тираж ПодписноеНПО " Поиск" Роспатента113035. Москва, Ж, Раушская наб 4/5Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул,Гагарина, 101