Способ получения полимиксана

союз советскихСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 19/04 ЕТЕНИЯ 2 я МИКСАНА отехнолорида пол- получение СУДАРСТВЕН ЮЕ ПАТЕНТНОДОМСТВО СССРОСПАТЕНТ СССР) ИСАНИЕ И К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ 1(56) Авторское свидетельство СССМ 1698293, кл. С 12 Р 19/04, 198(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛИ(57) Изобретение относится к бигии и касается получения полисах,имиксана, Цель изобретения -Изобретение относится к биотехнологии и касается получения полисахарида полимиксана, находящего применение в кондитерской промышленности (при приготовлении кремов, желе), в парфюмерии (в производстве шампуней, косметических средств), в нефтехимической промышленности (для повышения нефтеотдачи пластов),Цель изобретения - получение полимиксана, не содержащего спор штаммапродуцента,Поставленная цель была достигнута в результате того, что в качестве продуцента использовали штамм Вас. роуауха 1459-Л, а выращивание его осуществляли на среде, содержащей источник аммонийного азота, например сульфат аммония.Исследованиями было установлено, что штамм Вас. роуауха 1459-Л не образует спор при культивировании на питательной среде, в которой в качестве источника азота использован источник аммонийного азота, Гри использовании в качестве источника азота источников органического и нитратного азота культура спорулировала, Реэультапрепаратов полисахаридов, лишенных спорового материала штаммов-продуцентов, что важно для пищевой промышленности и медицины. Сущность изобретения заключается в использовании штамма Вас. роуп)уха ВКПМ Ви выращивании этого штамма на питательной среде, содержащей в качестве источника азота только источник аммонийного азота, что приводит к утрате этим штаммом способности спорообразования, 3 табл. сф го исследования представлеие к ль ы и ово или на ты проведенноны в табл. 1.Выращиван у тур р д среде, аодержащей, мас гидролизованный кукурузный крахмал 3,0; однозамещенный и двухзамещенный фосфат калия по 0,05; сульфат магния 0,02; хлористый кальций 0,02. Культивирование проводили в течение 72 ч при температуре 28 й 1 С и рН среды 7,0 на круговой качалке, делающей 220 об/мин;Штамм Вас. роувуха 1459-В, применяемый в известном способе, образовывал споры при выращивании на всех исследованных средах.По сравнению с известным способом предложенный способ обеспечивает практически одинаковый выход полисахарида при несколько. меньшей длительности процесса. Сравнение предложенного способа с известным способом по основным показателям приведено в табл. 2.Поставленная цель - предотвращение загрязнения целевого продукта споровым материалом продуцента - достигается на,средах различного состава, содержащих источник аммонийного азота как единственный источник азота, и подтверждается, приводимыми ниже примерами. В равной мере может быть использован сульфат или 5 хлорид аммония. При использовании нитрата аммония возможно частичное спорообразование.Выделение полимиксана иэ культуральной жидкости осуществляют обычно ис пользующимися для этого приемами.Отличительные приемы предложенного способа - использование штамма Вас, роуауха 1459-Л и культивирование этого штамма на среде, содержащей источникам-. 15 монийного азота как единственный иСточник азота - для получения полисахарида, не содержащего спорового материала продуцента. ранее в технологии полисахаридов не использовались. Положительный эффект 20 достигается только при совместном испольэовании обоих этих приемов. о этим при-.чинам заявитель считает; что предложенный способ соответствует критериям существенных отличий,. 25Более подробно сущность предложенного способа поясняется следующими примерами.П р и м е р 1. Культурой Вас. роуауха 1459-Л, смытой с косяка картофельного ага ра, засевали среду, содержащую, мас.: гидролиэованный кукурузный крахмал .1,5 по РВ; кормовые дрожжи 0,75; одноэамещенный фосфат калия 0,05; двухэамещенный фосфат калил 0,05; сульфат магния 0,02; 35 хлористый кальций 0,02; углекислый кальций 0,75 и вода до 100.Предварительно среда была разлита в колбы емкостью 750 мл, в каждую колбу вносили по 200 мл питательной среды, 40Кульгивирование осуществляли на качалке при температуре 28 + 1 С и числе оборотов качалки 220 об/мин. Начальный рН среды составлял 7,2; выращивание продолжалось 17 ч, 45Полученная культуральная жидкостьбыла использована в качестве посевногоматериала для последующей ферментации, Ферментацию осуществляли в колбах объемом 750 мл, В каждую колбу было внесено 50 по 200 мл питательной среды, содержащей,мас,: гидролизованный кукурузный крахмал 3,0 по РВ; сульфат аммония 0 - 0,5, однозамещенный и двухзамещенный фосфат калия по 0,05; сульфат магния 0,02, хлористый кальций 0,02, углекислый кальций 0,75 и вода до 100.,Начальный рН среды 7,1, посевного материала вносили по 5 об,;6 в каждую колбу. Культивирование проводили на качалке при 220 об,/мин при температуре 28+ 1 С,ФЧерез 72 ч культивирования были получены следующие результаты, представленные в табл. 3,П р и м е р 2. Посевной материал был получен, как и в примере 1, но в аппарате объемом 1 куб, м.Культивирование осуществляли в аппарате объемом 6,3 куб; м при использовании среды следующего состава, мас,: гидролиэованный кукурузный крахмал 3,0; сульфат аммония 0,1; однозвмещенный и двухзамещенный фосфат калия по 0,05; хлористый кальций 0,02; сульфат магния 0,02 и вода до 1000. Культивирование длилось 40 ч при температуре 28 й 1 ОС. Кмоментузавершенияферментациисо- держание полисахарида в культуральной жидкости равнялось 9,2 г/л, вязкость культуральной жидкости -110 сП.,Споры в культуральной жидкости и в высушенном препарате полисахарида отсутствовали.Таким образом, предложенный способ имеет определенные преимущества по сравнению с известным способом, который одновременно может рассматриваться и как способ-прототип и как базовый объект сравнения.Формула изобретения Способ получения полимиксана путем культивирования штамма-продуцента вида Васаэ роувуха на питательной среде, содержащей источники углерода и азота, с последующим выделением целевого продукта, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью предотвращения загрязнения целевого продукта споровым материалом продуцента, в качестве продуцента используют штамм Васиэ роуауха ВКПМ В, а культивирование осуществляют на среде. содержащей в качестве источника азота сульфат аммония,1813784 Таблица блица Показатель О1 аб, услови б. условия опытно-про условия ытно-пр услови 17-24 2,00,2 О+ тимальныи О тсутста. ст и оабл и Накопление полимиксана настадии биосинтеза, г/л. тимальная длительностьцесса, культивирования Наличие спор в готовдукте, ф 5 от сухой и вестный способ 282: 70 02 До 10Предложенный спосо