Способ получения гидропероксидов полиненасыщенных жирных кислот

Номер патента: 1631086

Авторы: Бридня, Бутович, Кухарь, Цысь

ZIP архив

Текст

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНИХРЕСПУБЛИК 9) 011 имии ч И.А. и др. Иатерзного симпозиума пзимологии. Вильнюс4. иаль 1о ин 1988,(54) С 11 ОСОБ ДОВ ПОЛИНЕ 1 (57) Изобре нологии в логически ероксидов кислот (ПН величение чет бла тся к биотех ообам получениенасыщенных жирможет быть исбиологии, меди ства, а т е хроматограоичеся определения этихличных биологичес в ка станоедине дартов длний в ра ъекЦель изо хЬда целево способа,Способ з разбавленно слой гранул ганическоготения - увелич продукта и упр ние выключается во раствора ПНмодифицировасорбента, на опусканииК черезого неоротором им ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОЧНРЦТИЯМПРИ ГКНТ СССР СПИ САНИК АВТОРСКОМ(71) Институт биоорганическоАН УССР(56) Бутови6-го Всесоюженерной эн ПОЛУЧЕНИЯ ГИДРОПЕРОКСИ 1 АС 1 Н 1 ЕШЫХ ЖИРНИХ КИСЛОТ тение относится к биотехчастности к получению биактивных веществ - гидрополиненасыщенных жирных ЖК). Цель изобретения - выхода целевого продукта Изобретение отнологии, а именно к с гидропероксидов поли ных кислот (1 ПИКК), и пользовано в области цины, сельского хозя 51)5 С 12 Г 7/64, С 12 11 11/1 и упрощение способа. Способ основанна непрерывном пропускании со скоростью 0,5-15 л/мин раствора ПНЖКс концентрацией 0,01-0,25 ммоль/лчерез слой гранул модифицированногонеорганического оксида (ГП 10), на котором иммобилизована липоксигеназа,после чего следует концентрированиецелевого продукта на гидрофобизированном силикагеле и элюирование его органическим растворителем среднейили высокой полярности. Гранулы ГЯОимеют размер 0,1-0,25 мм, а количество липоксигеназы составляет 0,1-20 мгна 1 г МНО, Выход гидропероксидаПНЖК составляет 95-98 Х (по сравнениюс 70-75% по известному способу). Упощение способа достигается за сепрерывности процесса, а такжеодаря быстрому выделению целевооодукта,мобилизован фермент липоксигеназа. Эту операцию выполняют в щелочной среде, соответствующей наибольшей активности фермента, После этого полученный раствор направляют в следующую колонку, заполненную гидрофобизированным силикагелем, на котором целевой продукт-гидропероксид ПНЖК концентрируется. Десорбцию гидропероксида ПНЖК выполняют небольшим количеством органического растворителя, в котором полученный продукт может храниться.Раствор ПНИК с концентрацией 0,01- 0,25 мИ/л пропускают со скоростью 0,5-15 мл/мин на 1 г оксида, а липоксигеназу в количестве 0,1-20 мг им 1631086мобилизуют на 1 г неорганического носителя с размером гранул 0,1-0,25 мм,Использование данного способа позволяет упростить процесс, а также увеличить выход целевого продукта с 70-75 до 95-98 Х.П р и м е р 1, В колонку объемом 0,3 смз помещают 100 мг гранул "силохрома-С 80" размером 0,125-0,16 мм, на которых иммобилизована липоксигеназа в количестве 0,3 мг. Через колонку, присоединенную к жидкостному насосу, пропускают раствор линолевой кислоты с концентрацией 0,1 мМ/л в 0,1 И натрий-боратном буфере (рН 8,5). Скорость пропускания раствора линолевой кислоты поддерживают постоянной и равной 5 мл/мин на 1 г оксида.После этого полученный раствор прокачивают через вторую колонку, заполненную гидрофобизированным силикагелем, подсоединенную квыходу колонки с иммобилизованной липоксигеназой. После прокачивания через колонки необходимого объема раствора ПИК колонку с силикагелем отсоединяют и промывают 3 мл метанола. Выход гидро- пероксида линолевой кислоты составляет 98 Х, а степень чистоты, определенная Уф и ИК спектроскопией, составляет 95 Х.П р и м е р 2. В колонку объемом 0,3 смз помещают 100 мг гранул "силохрома С 1,5" размером О, 1-0,25 мм, на которых иммобилизована липоксигеназа в количестве 2,0 мг, через колонку, присоединенную к жидкостному насосу, пропускают раствор арахидоновой кислоты (рН 9) с концентрацией 0,01 ммоль/л. Скорость пропускания40 раствора арахидоновой кислоты поддерживают постоянной и равной 15 мл/мин на 1 г оксида.Затем полученный раствор прокачивают. через колонку, заполненную гидрофобизированным силикагелем С 18 и подсоединенную к выходу колонки с иммобилизованной липоксигеназой. После прокачивания через колонки необходимого объема раствора колонку с 50 гидрофобизированным силикагелем отсоединяют и промывают 5 мл этанола. Вы-, ход гидропероксида арахидоновой кисло, тд составляет 987 а степень чистоты 967 55П р и м е р 3. В колонку объемом 0,3 смз помещают 100 мг гранул "силохрома-С 80" с размером О, 125-0, 16 мм,на которых иммобилизована липоксигеназа в количестве 0,01 мг. Через колонку, присоединенную к жидкостному насосу, пропускают раствор линолевой кислоты (рН 8,5) с концентрацией 0,25 ммоль/л. Скорость пропускания арахидоновой кислоты через колонку составляет 0,5 мл/мин на 1 г оксида.Затем полученный раствор прокачивают через колонку, заполненную гидрофобизированным силикагелем-С 18, присоединенную к выходу колонки с иммобилизированной липоксигеназой, После прокачивания через колонки необходимого объема раствора колонку с силикагелем отсоединяют и промывают 5 мл этанола, Выход гидропероксида линолевой кислоты равен 97 Х, а степень чистоты 967,. Иммобилизацию липоксигеназы во всех примерах осуществляют по известным методам следующим образом.Аминспропилсилохром в количестве 1 г, модифицированный глутаровым альдегидом, перемешивают с 10 мл раствора липоксигеназы с концентрацией 0,1-2,0 мг/мл в 0,1 И фосфатном буфере с рН 7,5 йри 4 С в течение 2-12 ч. После отделения осадка фильтрацией или центрифугированием с последующей отмывкой 100 мл буферного раствора с 0,5 М определяют степень иммобилизации белка, которая равняется 85-90 Х.П р и м е р 4. Аналогичен примеру 1. Вместо "силохрома С 80" используют широкопористую окись алюминия. Выход 97 ХП р и м е р 5, Аналогичен приме;ру 1. Вместо "силохрома С 80" используют широкопористый окисленный титан. Выход 947П р и м е р 6. Аналогичен, примеру 1. Продукт синтеза вместо метанола элюируют этанолом, Выход 97 Х,П р и м е р 7. Аналогичен примеру 1. Продукт синтеза вместо метанола элюируют ацетоном. Выход 96 Х,П р и м е р 8. Аналоничен примеру 1. Продукт синтеза вместо метанола элюируют смесью диэтилоной эфир - гексан = 1/1. Выход 96 Х.Таким образом, применение способа позволяет увеличить выход целевого продукта с 70-75 (по известному способу) до 95-98 Х, а также упростить процесс получения целевого продукта. Упрощение сгособа достигаетСоставитель В. МуронецТехред Л. Сердюкова Корректор А. Осауленко Редактор М. Келемеш Заказ 524 Тираж 355 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГЕНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,10 5 1 бзся заменой гомогенного катализаторана гетерогенный благодаря которой:не требуется сложных процессов хими"ческого разделения катализатора ипродукта, так как катализатор удаляется простым фильтрованием; количество катализатора легко регулироватьв ходе синтеза; катализатор можноиспользовать многократно; синтез ведется в проточном режиме непрерывно,чем устраняется необходимость периодически останавливать реакцию для извлечения из реактора продуктов синтеза и введения новой порции исходныхреагентов,Предлагаемый способ позволяет отказаться от применения плительной идорогостоящей процедуры хроматографической очистки конечного продукта,используемой в известном способе.Формула изобретенияСпособ получения гидропероксидов,полиненасыщенных жирных кислот, вклю 108 б 6чающий окисление полиненасыщенныхжирных кислот в присутствии липокснгеназы в качестве катализатора и последующее вццеление целевого продукта, отличающийся тем,что, с целью увеличения выхода целевого продукта и упрощения способа,окисление проводят в непрерывном режиме путем пропускания водного раствора полиненасыщенных жирных кислот,с концентрацией 0,01-0,25 мМ/л через гранулы модифицированного неор-ганичекого оксида размером 0,1-0,25 ммсо скоростью 0,5-15 мл/мин на 1оксида, содержащих 0,1-20,0 мг липоксигеназы на 1 г оксида, а выделение целевого продукта проводят пропусканием полученного раствора через 20 слой гидрофобизированного силикагеляс последующим элюированием органическими растворителями средней и высокой полярности.

Смотреть

Заявка

4626056, 22.11.1988

ИНСТИТУТ БИООРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ АН УССР

БУТОВИЧ ИГОРЬ АНАТОЛЬЕВИЧ, КУХАРЬ ВАЛЕРИЙ ПАВЛОВИЧ, ЦЫСЬ ЕЛЕНА ВАЛЕНТИНОВНА, БРИДНЯ ВИТА ПЕТРОВНА

МПК / Метки

МПК: C12N 11/14, C12P 7/64

Метки: гидропероксидов, жирных, кислот, полиненасыщенных

Опубликовано: 28.02.1991

Код ссылки

<a href="https://patents.su/3-1631086-sposob-polucheniya-gidroperoksidov-polinenasyshhennykh-zhirnykh-kislot.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ получения гидропероксидов полиненасыщенных жирных кислот</a>

Похожие патенты