Способ определения псоралена

(51)5, С О 130 9 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЦТПРИ ГКНТ СССР ЕТЕНИЯ ПИСАНИЕ(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПСОРАЛЕНА(57) Изобретение относится к аналити/медицин неской.химии, в частности к способуопределения псоралена (ПЛ). Цельев, повышение селективности и экспресснос .ти определения, Определение ПЛ ведутразделением анализируемой пробы втонком слое силикагеля в подвижнойфазе (Ф) и детектированием разделенных зон компонентов в УФ - свете. Вкачестве Пф используют смесь гексанаН хлороформа при объемном соотношении компонентов 1:3, 3 табл. иго озд тво СССРб 4, 1983.армацевтичеоровье, 1978,Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способу определения псоралена методом тонкослой-. ной хроматографии, и может быть применено для определения псоралена в химических, биологических и клинических лабораториях при токсикологических исследованиях,Целью изобретенияние селективности и эопределения.Определение проводят следующим образом.Раствор препарата нли смеси псо лена и изопсоралена наносят на хро тографическую пластину "Силуфол" (150 х 150 мм) и хроматографируют восходящим методом 30-40 мин в система растворителей гексан-хлороформ ( 1:3)Зоны псоралена и иэопсоралена, выявленные под УФ-светом, количественно переносят с пластины в пробирки и-.89 является повышекспрессности ра- маск и доводя 0,05 сяе капил(71) Курский государствский институт(56) Авторское свидетелУ 1049809, кл,. С 01 Я 2Методы идентификацииских.препаратов, Киев,с.188-89. зкстрагируют псорален и изопсорален зткповым спиртом. К аликвотной части каждого из экстрактов прибавляют дисБ тиллированную воду, насыщенный водный раствор брома и 253;ный раствор гндроокиси аммония, Одновременно флуори- метрируют полученные растворы по отношению к стандартному раствору псорапена. Расчет содержания псоралена и изопсоралена в образце проводят по калибровочному графику. Чувствитель-. ность определения 0,01 мкг/мл. ЭП р и м е р 1. Определение пслена в таблетках по 0,01 г.Навеску порошка мелкоизмельчентаблеток препарата Псорален помещв юерщю колбу на 25 мл, содержащ20 мп хлороформа, растворяют навет объем раствора до меткимп полученного растворачяром на хроматографиче64на в искусственных смесях. Результаты приведены в табл.2.П р и м е р ы 4-12. Определение псоралена проводят аналогично примерам 1-3, но варьируя состав подвижно,", фазы. Результаты экспериментов приведены в табл. 3. Способ определения псоралена разделением анализируемой пробы в тонком слое силикагеля в подвижкой фазе на основе н-гексана, детектированием разделенных зон компонентов в УФ-свете, о т л и ч а ю щ и Й с я тем, что, с целью повьппения селективности и экспрессности определения, в качестве подвижной фазы используют смесь гексана и хлороформа при обьемном соот. кошении компонентов 13. Найдено, 7 42,0 57,8 44,2 42,9 46,0 57,5 42,1 43,2 145059 пластику, "Силуфол" и хроматографируют Одновременно со стандартом псоралена восходящим способом в системе раство-рителей гексан:хлороформ (1:3). Зоны псоралена и изопсорацена, выявленные в УФ-свете с величиной КГ для псоралена 0,55 и изопсоралена 0,70 количественно переносят в пробирки. В последние прибавляют 10 мл 967.-ного эти Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я лового спирта и выдерживают 5-10 мин, К 5 мп экстракта из каждой пробирки добавляют по 5 мп дистиллированной воды, О, 1 мл насыщенного водного раствора бро. ма и О, 1 мл 257,-ного раствора гидрооки си аммония, После добавления каждогоиз реактивов смеси перемешивают, а затем проводят Одновременную флуориметрию полученных растворов. Результаты десяти параллельных Определений приве 20 дены в табп. 1.П р и м е р 2, Определение псоралена в 0,17.-ном спиртовом растворе.0,1 мл 0,1%-ного раствора препа- Таблица 1 рата Псорален в 707-ном этнловом 25 Результаты определения псоралена спирте наносят на расстоянии 2,5 см и изопсоралена в таблетках по от края на хроматографическую пласти,01 г ну "Силуфол" (150 х 150 мм) фирмы "Сача 1 ег" (Чехословакия). Пробу наносят Нмр на воздухе калиброванной пипеткой объемом О,1 мл.соралена изопсораленаПластину высушивают на воздухе (активное вещест- (неактивное при 20-25 С в течение 5 мин и поме- о), вещество) щают в стеклянную камерудля разделения с притертой крьппкой, предвари 58 0У тельно насыщенную парами системы растворителей хлороформ-гексан, вэя,2 тых в соотношении 3: 1, в течение 30 мин при комнатной температуре и 55,8 относительной атмосферной влажности 40607. Хроматографируют восходящим ме , 57,1 тодом в течение 30-40 мин с достижением высоты поднятия фронта подвиж 54 0 ФУ ной Фазы 10 см. Для подготовления пОдВижнОЙ фазы используют растворите 45 42,5 ли класса Ч или ХЧ.Зоны псоралена (КГ = 0,55) и изо,2 44,8 псорапена (Ю = 070) выявляют в УФ- свете после высушивания пластины на 57 99 Открытом воздухе в течение 2-3 мин. Результаты аналогичны результатам в 9 . 56,8 примере 1.П р и и е р 3. В условиях приме- . 10 57,9 42,1ров 1-2 проводят определение псоралес1450596 Таблица 2Результаты анализа искусственных смесей псоралена иизопсоралена с известным содержанием иэомеровтавиа ищ ВФ Маю и Задано. г нсоралена изопсоралена псоралена изопсоралена 0,00493, Т а блица 3 Зависимость хроматаграфического разделения нсоралена и иэопсоралена от состава подвижной Фазы При- Состав подвижной мер Фазы гексан-хлороформ, об 7 ь КЕ оралена иопсоралеиаЗаказ 997 ВНИШЩ Го Тираж 496 Подписноерственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ ССС 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 роизводственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул . Проектная,0,00500 0,00400 0,00300 0,00800 0,00200 0,00500 О;00600 0,00700 0,00200 0,00800 0,00410 0,00310 0,00789 0,00200 0,00486 0,00592 0,00708 0,00210 0,00793 .