Способ получения слизи из васillus мuсilаginоsus

Сооз СттаетсиихСоциалистическихРеспублик ОП ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ ц 908797 К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(22) Заявлено 14.02.79 (21) 2724244/28 - 13с присоединением заявки лй(51) М. Кд. С 12 Р 1/04 йкударстввниый квинтет СССР ае млвм нвабрвтеннй н юткрытнйЛенинградскии орден исследовательский инс рудового Красного ут эпидемиологии и аявитель) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СЛИЗИ ИЗ ВАМОС 11.А 61 ИОЗОЗ ОЯ Изобретение относится к медицине, э именнок способам получения биологически активныхвеществ микробного происхождения,Известен способ получения слизи нэ 8 ас 1 -11 ца тпттс 1 аотоана путем культивирования продуцента на плотной питательной среде с по.следующим выделением целевого првдукта И).Однако известный св,соб позволяет нолучить только 30 - 40 мл препарата иэ 1 л среды,т, е. имеет низкий выход целевого продукта,Цель изобретения - повышение выходацелевого продукта. Поставленная цель достигается тем, что при осуществлении способа получения слизи из 8 ас 11 цв пас 1 а 9 поаца путем культивирова. ния продуцента на плотной питательной среде с последующим выделением целевого продукта, продуцент предварительно культивируют на среде, содержащей 100 - 200 мл мясопептонного бульона и 100-200 мл сенного отвара в течение 1.2 суток, а затем в течение 18-24 ч на плотной питательной среде, содержащей мясопептонный агар 100 в 2 мл; хлористый натрий 0,5 -1,0 г; сахар 1, твор фено.лэ 0,2 - 0,4 мл.При этом в качестве сахара используют глюкозу, сахарозу, мальтоэу или левулезу,Способ осуществляют следующим образом.В течение 1-2 суток культивируют Ва - с 1 1 па пас 1 эяповов на питательной среде, содержащей 100 мл мясопептонного бульона со 100 мл сенного отвара. Полученную культуру можно использовать не сразу, а хранить при комнатных условиях (6 мес. - срок наблюдения) во флаконах. При необходимос. ти берут 1 - 2 капли полученной бульонной культуры и засевают шпателем на питательную среду, разлитую по чашкам Петри, компоненты которой взяты в следующих. количествах: 100 мл мясопептонного агара, содержащего 0,5 г хлористого натрия; 1,5 - 3,0 г сахара;0,1 - 0,2 мл 5%.ного фенола.Особенностью посева является то, что засеянные чашки не переворачивают на крышку, чтобы избежать потери большого количест. ва слизи. Посевы культивируют в термостате прн 37 фС. Через 18 - 24 ч инкубации вся по908797 Составитель Ю, АлмазовТехред Э.фечо Редактор Е, Днчинская Корректор Г. Отар Заказ 749/27 Тираж 505ВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5 Подписное Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул, Проектная, 4 3верхность питательной среды в чашке Пе 1 ри покрывается тонкой пленкой. под которой содержится большое количество слизи. Если наклонить чашку Петри под углом 60 - 70, заметно как слизь под пленкой медленно5 перемещается по наклонной плоскости.Этот тест является критерием оценки результата образования слизи. Если посевы находятсл длительное время в термостате, то слизь подсыхает и перемещение жицкости под плен 1 ф кой не наблюдается. Аналогичная картина отмечается и прн недостаточной экспозиции культивирования или же при лосеве на плохо приготовленную питательную среду, Для сбора слизи с поверхности питательной среды, торцом 1 ч узкой стороны предметного стекла (стекло должно быть со шлифованными краями) всю слизь осторожно собирать на край чашки Петри, чтобы не снять поверхность агара, и слива. ют во флакон или колбу. Полученную слизь центрифугируют нри 6000 об/мин в течение 1 ч. Надосадочную густую жидкость изцентрифужных стаканчиков собирают вофлакон, осадок выбрасывают, Полученный препарат хранят в холодильнике или при от.сутствии холодильника, флаков со слизью, стерилизуют в автоклаве (1 атм - 20 ьпа) и" хранят при комнатной температуре, Из 1 л среды получают 100-150 мл слизи. 4Таким образом, предлагаемый способ позволяет повысить выход целевого продукта в 3-4 раза, т. е. до 100 - 150 мл слизи из 1 л среды, в то время как при применении известного способа 30-40 мл слизи. формула изобрет .ния1. Способ получения слизи из Вес 11 оа тцс -1 адаоама путем культивирования продуцента наплотной питательной среде с последующим выде.лением целевого продукта, о т л н ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повыщения выхода целевого продукта, продуцент предварительнокультивируют на среде, содержащей 100 - 200 млмясопептонного бульона и 100 - 200 мл сен.ного отвара, в течение 1-42 суток, а затем в течение 18 - 24 ч на плотной питательной среде, со.держащей мясопептонный агар 100 - 200 мл;хлористый натрий 0,5 - 1,0 г; сахар 1,5 - 3,0 г;5%.ный раствор фенола 0,2 - 0,4 мл.2. Способ по . , о т л и ч а ю щ н й с ятем, что; в качестве сахара используют глюкозу,сахарозу, мальтозу или левулеэу.Источтщки информации,принятые во внимание при экспертизе1, Справочник по микробиологическим и ви.русологическим методам исследования. Подред. М. О. Биргера, М "Медицина", 1967,с. 158.