Способ отщепления галоидов от аминоацилполимеров

1 ц 77702 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз Советских Социалистических Республик(45) Дата опубликования описания 07.11.80 Государствеииый комитет СССР по делам изабретеиий и открытий(72) Авторы изобретен и Р. П. Евстигн А, Желтухина, Е, И. Филиппо нкой Знамени инстит В. Ломоносова осковский ордена Трудового Краси химической технологии им.) Заявит ОБ ОТЩЕПЛЕНИЯ ГАЛОИДОМИНОАЦИЛПОЛИМЕРОВ Наиболее близки ется способ отщепл ацилполимеров дей или триэтиламина створимости ацетат дят в смеси димети лом. Максимальная калия, достигаемая у явля- аминокалия ния раю прово- метаноацетата мол/мл. емо да о тато учш акци а с ция ,25 м к заявля ения галои ствием аце 4. Для ул а калия ре лформамидконцентра при этом, 0 амино ступи Изобретение относится к способу отщепления галоидов от аминоацилполимеров - промежуточных продуктов в синтезе биологически активных пептидов, которые могут найти применение в биологии и медицине.В настоящее время широко распространен синтез пептидов на твердой фазе 1, 2. В качестве якорной группы для присоединения первой аминокислоты к полимеру используют галоидалкильную группу. Специфической проблемой такого метода пептидного синтеза является присутствие на полимере избыточных галоидалкильных групп, которые могут реагировать с незащищенными боковыми функциональными группами синтезируемого пептида с образованием побочных продуктов. Поэтому необходимо удалить остаточный галоид из полимера после присоединения к нему первой аминокислоты.Известен способ отщепления остаточного хлора от аминоацилполимеров действием уксусной соли 1,5-диаза-бицикло 4,3,0-нонена, причем достигается почти количественное отщепление галоида 3. Недостатком этого способа является проведение процесса при нагревании (50 С), что может привести к разложению защищеннойкислоты на полимере, и трудонодоость реагента. О Недостаток метода состоит в плохой растворимости этих реагентов в диметилформамиде. Добавка метанола ухудшает набухание полимера и снижает вследствие этого эффективность отщепления галоида.Так, после обработки тетрапептидилполимеров (с исходным содержанием галоида 1,1 - 1,0 ммольг полимера) 23-кратным избытком упомянутых реагентов остаточный галоид составил 0,7 - 0,3 ммол/г поли мера.Цель изобретения - повышение эффективности отщепления галоида и упрощение процессаПоставленная цель достигается описы ваемым способом отщепления галоидов отаминоацилполимеров действием на аминоацилполимеры солей уксусной кислоты в среде органического растворителя, заключающимся в том, что в качестве солей ук- О сусной кислоты используют избыток 0,75 -10 0,8 М раствора ацетата цезия в диметилформамиде.Предпочтительным вариантом способа является использование ацетата цезия в 13 - 15-кратном избытке по отношейию к хлору на полимере.Ацетат цезия, в отличие от известных реагентов, хорошо растворим в диметил-. формамиде, без добавок спирта. Зто дает возможность применения более концентрированных его растворов без снижения набухания полимера, Так, после обработки аминоацилполимеров с содержанием хлора 1,3 - 1,4/о (0,37 - 0,4 ммоль/г) 13 - 15- кратным избытком ацетата цезия в. диметилформамиде остаточный хлор составил 0,2 - 0,5% (0,06 - 0,15 ммоль/г) без изменения степени посадки аминокислоты на полимер избытки ацетата цезия даны по отношению к остаточному хлору на полимере). Концентрация отщепляющего реагента при этом была в 3 раза выше (около 0,75 ммоль/мл), чем в прототипе, а общий избыток . реагента примерно в 1,7 раза ниже.П р.и.м ер 1. К. 3,5 г. К-.т.рет.-бутилоксикарбониллейцилполимера (1) с содержанием лейцина 0,5 ммоль/г и хлора 0,37 ммоль/г Вос.ец-(Р) прибавляют 3,78 г (19,80 ммоль) ацетата цезия в 25 мл диме-. тилформамида и оставляют на 80 ч, из них слабо перемешивают 40 ч. Р) - полимер Меррифилда, хлорметилированный сополимер стирола с 2% дивинилбензола).Смолу отделяют, промывают ЗХ 20 мл диметилформамидом, ЗХ 20 мл метанолом, 2 Х 15 мл эфиром, сушат. Содержание лейцина, определенное количественным аминокислотным анализом образца соединения (1), после обработки - 0,5 ммоль/г, хлора - 0,06 ммоль/г Вос.ец-(Р) .Пример 2. К 3,53 г Р-трет.-бутилового эфира И-трет.-бутилоксикарбониласпартилполимера (11) с содержанием аспарагиновой кислоты 0,45 ммоль/г, хлора 0,40 ммоль/г, Вос-Азр (Вц)-(Р) прибавля 15 20 25 30 З 5 40 45 ют раствор 3,53 г (18,37 ммоль) ацетата цезия в 25 мл диметилформамида и оставляют на 72 ч, из них слабо перемешивают 35 ч, Смолу отделяют и промывают, как в предыдущем примере. Содержание аспарагиновой кислоты в соединении (11) после обработки 0,452 ммоль/г, хлора 0,15 ммоль/г Вос-Лвр(Бц) - (г ),Формула изобретения 1. Способ отщепления галоидов от аминоацилполимеров действием на аминоацилполимеры солей уксусной кислоты в средеорганического растворителя, о т л и ч а ющий ся тем, что, с целью повышения эффективности отщепления галоида и упрощения процесса, в качестве солей уксуснойкислоты используют избыток 0,75 - 0,8 Мраствора ацетата цезия в диметилформамиде.2. Способ по п. 1, отличающийсятем, что ацетат цезия берут в 13 в 15 кратном избытке по отноошению к хлору наполимере.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе,1. Мишин Г. П., Коршунова Г. А Швачкин Ю. П. Успехи и проблемы твердофазного пептидного синтеза. Успехи химии,1974, т. 43, вып. 2, с. 2014 - 2043.2. Стюарт Дж., Янг Дж. Твердофазныйсинтез пептидов. Пер, с англ. Под ред.Ю. П. Швачкина, М Мир, 1971.3. ЬцгцЫ К., Епдо К., Ап ппргочед а11 осптеп 1 о 1 К-рго 1 ес 1 ед агп 1 по-асЫ апдрер 1 Ые 1 о сЬ 1 огогпейу 1 а 1 ед ро 1 уз 1 угепес 11 ипу 1 Ьепгепе гез 1 п, сЬегп. РЬагегп Вц 11.,1977, 25, Мо 5, 1143 - 1146.4. НагцаЫ уа 1 цта, Н 1 гоЫ 1 саюа 1 ап 1, Н 1 с 1 еЬ 1 го Юа 1 апа 1 е, з 1 цйез оп Рер 1 Ыез.ХХИ 1, Ясрейез 1 з о 1 йе Оесарер 1 Ые, АСТН(5 - 14) аз ап Ехагпр 1 е о 1 Рер 1 Ыегадгпеп 1сопдепза 11 оп оп йе 1 оЬ 1 гпег зцррог 1, СЬетп.РЬагет Вц 11,. 1970, 18, Мо 7, 1333 (прототип).