Способ устранения антикомплементарных свойств агарового геля

ОП ИСАНИЕИЗОБРЕТЕН ИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Сов э Советски кСоциапистическикРеспубпик 1 1737449 1(21) Припри СССР до делам навбретеннй н отйрытнй(54) СПОСОБ УСТРАНЕНИЯ АНТИКОМПЛЕМЕНТАРНЫХ СВОЙСТВ АГАРОВ ОГО ГЕЛЯции 0,1-3 мг н 1 О до 1Изобретение относится к методам Медико-биологических исследований, а именно к использованию химического реагента для инактивации препаратов агара, предназначенных для гелеобра 5 зующих сред, и может применяться в практике экспериментальной и клинической иммунологии при проведении реакций иммунного гемолиза в агаровом геле, лежащих в основе различных имму нологических методов исследований.Известен способ устранения антикомцлементарных свойств агарового геля путем добавления к раствору геля химического реагента 1.1.15Однако известный способ является сложным по технологии и предусматривает использование дорогостоящих импортных реактивов.Цель изобретения - упрощение способа.20Эта цель достигается тем, что в качестве химического реагента используют поли-( И, й -диэтилпиперидиний хлорид,5-диметиленсульфонил) и бав.втяют его в концентра а1 мл 1%-ного геля.П р и м е р 1. Для выявления анти-, телк эритроцитам барана проводят реакцию радиального иммунного гемолиза в геле, приготовленном из коммерческих препаратов агара; бактагаров Ж 1 со " и "ГйгсА" и отечественного неочншенйого агар-агара. К горячим 2%-ным водным растворам агара добавляют равные объемы раствора Хенкса 2-кратной концентрации, содержащего полиаминсульфон вколичестве 0,1- 3 мг на 1 мл конечного 1%-ного геля. После внесения эрипроцитов раствор агара заливают на предметные стекла и в круглые лчнки диаметром 3 мм, проделанные в застывшем геле, вносят стандартную гемолитическую сыворотку. Пластинкио с гелем выдерживают при 4 С в течение суток (для диффузии антител), затем их заливают комплементом и на 1 ч помещают в термостат при 37 С. Прозрачныеозоны гемолиза наибольшего диаметра3 737449 1,до 1,5 см) в пластинках геля, приго- вь тавпенных на основе агара "217 со" илифГОо 1 с, образуются при использовании к полиаминсульфона в концентрациях О, 1- р 1 мг/мл среды. В агар-агаре аналогичные 5 к зоны гемолиза появляются щт содержа- г нии цолиаминсульфона в среде в концентра- и ции около. 1 мгмл. ва 10 В контрольных пластинках агара, не содержащих поликатион, зоны иммунного гемолиза не выявлякгся.П р и м е р 2. В селезенках мышей СВА, иммунизированных эритроцитами барана, определяют количество" антителообразующих клеток по Ерне.К 2%-ному водному раствору агара добавляют рйвный объем раствора Хеикса 2-кратной концентрации, содержащий полиаминсульфон из расчета 0,1-1 мг на 1 мл конечного, 1%-ного геля, В агар вносят (при 45 С) суспензию спленоцитовэритроцитов барана, и смесь разливают в чашки Петри, Чашки помещают в термостат при 37 С на 60 мин, затем заливают раствором комплемента и йвкубируют в течение 1 ч.В пластинках геля, содержащего антителообразующие клетки, в присутствии поликатиона в концентрациях от 0,1 до 1 мг на 1 мл ф1 являются отчетливо видимые эоны точечного гемолиза 1 бляшхи), число оторых хорошо воспроизводится в пааллельных опытах. В контрольных чашах, не содержащих полиаминсульфон, емолитические бляшки трудноразличимы, х число значительно меньше и сильнорьирует даже при большом избытке комплемента.Изобретение позволяет упростить способ эа счет замены дорогостоящего импортного реактива отечественными 15 формула изобретения Способ устранения антикомплементарных свойств агарового геля путем добавления к раствору геля химического20 реагента, о т л и ч а ю щ и й с я тем,что, с целью упрощения способа, в качестве хймического реагента используютполи-( М, Я -диэтилпиперидиний хлорид,5-диметиленсульфонил) и добавляют25 его в концентрации 0,1-3 мг на 1 мл1%-ного геля.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Х"ТгопБрГаоЬй 1 оо Яем 1 юя ",30 1974, М 18, р. 130-191.Составитель С. Малютина 3 Редактор Н. Хубларова Техред М. Петко Корректор Г. Назарова Заказ 2603/8 Тираж 522 Подписное ЦНИИНИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 филиал ППП "Патент, г. Ужгород, уп. Проектная, 4