Способ получения эритроцитарного диагностикума чумы

СсаЭ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК ИЯ ЭРИТРОЦИТ/г- ЧУ 11 Ы путем обтвором Форма- последующим из раствора сударствений противоыделением цен ч а ю щ и й выявления ка вариантов ты сенсибиго микроба.,отивовьг, 3,аммы чумного я применени в качестве сенситФракции Ч чумногМетодика выделготовления на ееного диагностикум ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И 0 ПОКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР"Ь Труды Азербайджанской ичумной станции, 1362, Баку,с. 281-2)2 Изобретение относится к медицинской микробиологии, в частности к спо собам получения эритроцитарных диагностикумое для индикации, идентификации возЬудителей чумного микроба и серологической диагностики вызываемых ими заЬолевзний,Известен спосоЬ приготовления анти генного эритроцитарного диагностикума для получения которого в качестве сенситина для эритроцитов применяют фракцию 1 Бейкера (капсульный антиген) без предварительной ее активации.Однако с помощью этого диагностикума удается идентиФицировать только капсульные (типичные) штаммы чумного микроЬа.Целью изоЬретения является получе" ние эритроцитарного диагностикума, ко торый позволяет идентифицировать как капсульные (типичные), так и Ьескап.Ж 597235 А 1Ц А б К 3 У 021)(57) С 1 ОСОБ ПОЛУЧЕННОГО ДИАГНОСТИКУМА ДЛЯработки эритроцитов раслина, а затем танина, сосаждением эритроцитови их сенсибилизации и влевого продукта, о т лс я тем, что, с цельюсульных и бескапсульныхчумного микроба, эритролизируют Фракцией 1 чум сульные (атипичные)микрооа.Эта цель достига на для эритроцитов микрооа,ния Фракции Ч и приснове эритроцитар" заключается в следующем.Фракциювыделяют из бескапсульно го и атоксичного варианта ЕВ при помо щи нарзс ающих концентраций анионного поверхностно"активного вещества " дезоксихолата натрия (ДОХ). После Ч-кратного воздействяя малых концент"аций ДОХ (от 0,00) до 0,32) на Ьак" ериальную массу и последующего удаления надосадочных жидкостей в ее остаток доЬавляют ДОХ до 1,284. В надосадочную жИдкость добавляют 5 ооъемов ацетона, осадок диализуют и лиофильно высушивают, Полученную такимСоставительТехред И,Моргентал Корректор Л. Пилипенко Редактор Е, Гиринская Заказ 2 Ч 33 Тираж ПодписноеВНИИПО Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г,ужгород, ул. Гагарина,101 35 Ю образом Фракцию Ч используют в качест" ве сенситина для эритроцитовДля получения диагностикума берут формалинизированные эритроциты барана, которые обрабатывают раствором та" нина в разведении 1:160000 в течение 1) мин при 37 С, Затем эритроциты осаждают путем центрифугирования в те" чение 5 мин при 2000 об/мин, Осадок эритроцитов трижды отмывают 20"30" кратными количествами Физиологического раствора рН"7,0 и доводят их до 2,4 концентрации этим же раствором, Необходимое количество фракции Ч разводят физиологическим раствором до концентрации 1000 мкг/мл и доба вля" ют ДОХ с таким расчетом, чтобы его конечная концентрация составляла 1 . После 15"20 мин контакта при комнат ной температуре смесь Фракции Ч и ДОХ добавляют в эритроциты из расчета 10 мкг на 1 мл 2,54 танизированных эритроцитов. После встряхивания эрит-. роциты помецают в холодильник при,а 1 б"18 ч, За 2 ч до конца сен" с:.б лиации ь эритроциты добавляют Формалин до А, Затем эоитроциты осаж" 23)4трижды промывают большими количествами нормальной кроличьей сыворотки, разведенной 1:2 з 0 Физиологическим раствором, Осадок эритроцитов доводят до 101 концентрации сахарозо"желатоэной средой (5: нелатозы + ,5 саха- розы на дистиллированной воде), разливают по 1-2 мл в ампулы или пеницилли" новые флаконы и подвергают лиофильному высушиванию в любом вакуум-сушильном аппарате. Остаточная влажность не должна превышать более 2,. Ямпулы и флаконы с высушенными эритроцитами эапаивают или герметичеСки закупоривают. Приготовленный ;аким образом ди" агностикум можно хр .ить при комнатной температуре.Предлагаемый способ обеспечиваег 20 идентификацию как ка сульных (типичных), так и бескапсульных (а",ипич" ных) атоксичных штаммов чумного мик" роба, Это позволяет с большой достоверностьюю применять его в практике эпизоотологического обследования природных очагов чумы, а также для инди" кации и идентификации типичных и де Фектных в антигснном отношении штам"