Средство для инактивации вирусов при изготовлении противовирусных препаратов

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛ ИСТИЧ ЕСКИРЕСПУБЛИК(515 А 39/12//С 127/ ОПИСАНИЕ МЗОБРЕТЕК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(54) СРЕДСТВО ДЛЯПРИ ИЗГОТОВЛЕНИИПАРАТОВ, 7) Прменее .:ера этиле; иминадг. .чактивац. вирусов при изготовлении противовирусныхрепаратов,ИНАКТИВАЦИИ ВИРУСОВПРОТИВОВИРУСНЫХ ПРЕ" сследователь ников,3, 3016:витез олиХию ческаяс, 30,ивающег ммуноге при эт и. л.а вещество док тупным и Гпсч рае 4 ии.Это достига ра этиленимина длсов при произаодпрепаратов,Димитр этиленимина получают прлимеризации этиленимина,Димер этиленимина характеризудотатоцно высокой (по срар;енипростейшими производными и гомолми этиленимина) температурой кип(130 С) и образованием стабильногогидрата в в-.дных растворах,В связ, с этим, несмотря на сравнитель:; высокую токсичность в безводн. состоянии, связанную с прису- твием в молекуле этилениминогоцикла, водные растворы димера малоопасны в обращении,и по"в 4 етсяю сога енияф ОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕВЕДОМ;".ТВО СССРГОСПАТЕНТ СССР)(502),Изобретение относится к инактивации вирусов и, в частности можетбыть использовано для инактивации вируса ящура при изготовлении противоящурных вакцин,Известны способы инактивации щура путем его обработки химиц"скимиреагентами, например 1-ацетилэтиленимином, Ы"этилэтиленимином,Известно, что Б-эт.,лэтиленимин вконцентрации 005 инактивирует вирус ящура типа 0 в культуральной жид"кости (вирус репродуцирован в первич"ной культуре клеток почки телят) втечение 11 ч при 37 С и 52 ц при220. В обоих случаях наблюдается ли"нейный спад ин 9 екционности,Однако 11-ацетилэтиленимин являет"ся крайне нестабильным, а общими недостатками указанных препаратов являются труднодоступность и слабая инактивирующая активность,Цель изобретения - получение средства для инактивации вирусов, сбеспевы,о.уюпродогвительную, -1.й 2- С.12 1 Н 2)Н 2 С а - . = О.У 76 2570ф СоставительРедактор Е.Нефедова Техред М.Моргентал Коектор О,Мандзич Заказ 2830 Тираж Под с, ноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям , открытиям при ГКНТ СССР113035, Мссква, Ж, Раушская на , д. 4/5 ю Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Уж.род, ул, Гагарина, 101Благодаря восприимчивости к нуклеофильным реагентам для нейтрализации димера этиленимина используюттиосульфат натрия. Нейтрализациейпрепарата после инактивации вирусадостигается дополнительное повышениеиммуногенности и увеличение срокагодности вакцины,Для инактивации берут 1-84-ныйводный раствор димера этиленимина вколичестве 1 о об/об,Инактивацию вируса ящура ведут вфосфатном буферном растворе при рН7,4-76 и 25-26 С в течение 6-24 ч.Остаток димера этиленимина нейтрализуют 24"ным раствором тиосульфата натрия из расчета 15 мл на литрсуспензии с доведением рН до 7,4,5 5 М раствором 11 С 1,П р и м е р, Димер этиленимина(130 С), растворяют в дистиллирован ной воде, сьсбодной от уг.гекислого газа, до концентрации 2. Водный раствор сохраняют в стеклянной, герметически зммытоб таре при 2-10 С,.для пр отвления суспензии папи" низи.о иного вируса используют ушкро." ьча;.;.р,ц:игькеся н более года при -20 "С, Сус нэи;. " . -,го вируса в фосфатном ,;Фере в отн "и 1:10 после очистки хлороформом дол- на иметь титр инфекционности не менее 1 Омышиных ЛД 50 мл и быть активной в РСК в цельном виде на 4 креста и выше, Тушки крольчат разма- лывают на коллоидной мельнице в смеси с 1/15 М фосфатным буферньщ раст" вором рН 7,3-7,4 в соотношении 1:10и после 2 ч экстрагирования при - 8 С в суспензию добавляют 5 об.ь хлороформа. Для тщательного перемешивания смесь пропускают через коллоидную мельницу и центрифугируют или сепарируют. Суспензия после очистки должна содержать не более 0,25 гЛ бело ка. Суспезию негр вают до 26 С и добавляют ор . объемный 1 раствора димера этиленимина, Продолжительо ность инактивации 24 ч при 26 С с периодическим перемешиванием, После инактивации в сусп=нзию добавляют 2 М раствор тиосульфата натрия до концентрации 0,03 М (15 мл на литр суспензии), Полученный препарат охолаждают до 4"8 С и используют для приготовления вакцины, Если рН суспензии после нейтрализации димер поднимается выше 7,6 то в суспензию добавляют 5 М НС 1 до получения рН суспензии, равной 7,5-7,6.Для приготовления гидроокиси алюминиевой вакцины берут 63-мую ГОА, разводят пополам дистиллированной водой, мелют на коллоидной мельнице, доводят рН до 7,4-7,6 20-ным раство" ром едкого натрия и стерилизуют, Рецепт составления вакцины следующий: к 700 мл суспензии добавляют 300 мл ГОД, 00 мл глицерина и 5 мл 101-ного раствора сапонина.11 рименение димера этиленимин-. по"каЗЫВавту ЧТО СКОРОСТЬ ИндКТИВдЦ.свируса значительно выше в кравис с скоростью инактиваци.-, вируса приприменении известных производныхэтиленимина.