Способ получения микросклероциев

п 11 430154 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ Союз Советских Социалистических Республик(32) ПриоритетОпубликовано 30.05.74, Бюллетень20Дата опубликования описания 02.11.74 5) 1. Кл. С 121 с 1,осударственныи комнтеСовета Министров СССРпо делам изобретенийи открытий 53 ) УД К 632,911.63. Муромцев тут сельскохозяйственнойдовательский институт 71) Заявитель Всесоюзный научно-исследовательский инст микробиологии и Всесоюзный научно-иссл защиты растений) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ОСКЛЕРОЦИ ои мик- льтивиыть ис ероцие Изобретение относится к техническ робиологии, в частности к способам ку рования микроорганизмов, и может б пользовано для получения микроскл в фитопатогенных грибов.Известен способ получения микросклероциев путем выращивания фитопатогенных грибов УегИсИсит ЮаЫсае на стерилизованном овсе.Цель изобретения - интенсификация процесса получения микросклероциев и повышение выхода целевого продукта.Это достигается путем выращивания гриба У. даййае глубинно на жидкой питательной среде, в состав которой в качестве основного компонента вводят картофельную мезгу в количестве 0,5 - 5,0%, а в качестве дополнительного источника азота - 0,1 - 0,5% рыбной муки.П р и м е р. Исходный штамм У. Иаййае, выращенный в пробирке на агаризованной среде Чапека, переносят в колбу емкостью 750 мл, содержащую 150 мл стерильной жидкой питательной среды - кукурузная мука 1%, рыбная мука (казеин, альбумин) 0,2%, КНгРО 4 0,1%, КС 1 и Мд 504 7 Н,О по 0,05%, рН 7,5 (до стерилизации), и выращивают на качалке (180 - 220 об/мин) в течение 24 час при 24 - 26 С,При необходимости получения инокулюмав больших количествах полученной культурой засевают бутыль емкостью 5 л, содержащую 1 л аналогичной питательной среды, и про должают выращивать при тех же условиях,Полученным таким образом посевным материалом инокулируют малый ферментер емкостью 50 - 100 л. Норма засева 5 - 10%, Культивируют на среде - мезга картофельная О 1,5% (крахмал 1%), рыбная мука 0,1%,КНРО 4 0,1%, КС 1 и Мд 504 7 Н 20 по 0,05% - при 24 - 26 С с аэрацией воздуха 0,1 - 0,5 об/мин и непрерывном перемешивании при давлении в аппарате 0,5 - 0,7 ати в течение 5 24 час.Производственное выращивание культурыосуществляют в ферментаторах емкостью от 0,5 до 3 м", снабженных борбатером и мешалкой (250 - 300 об/мин), Коэффициент заполне- О ния аппарата 0,7, норма засева 10%. Составпитательной среды:мезга картофельная сухая 2% (крахмал 1,5 - 2%), рыбная мука (нитрат натрия) 0,3%, КН 9 РО 4 0,1%, КС 1 и Мд 504 М Х 7 НО по 0,5%, рН до стерилизации устанав ливали 40% КаОН, равным 7,6 - 8,0.В качестве пеногасителя используют кашалотовый жир, подсолнечное масло или другой сходный пеногаситель в количестве 0,02% к объему питательной среды. Стерилизация ЗО 90 мин при 2 ати. Выращивание культуры430154 Предмет изобретения Составитель Г. Муромцев Техред Л. Богданова Корректор М. Лейзерма Редактор Л. Ксенофонтова Заказ 2760/16 Изд.1686 Тираж 456 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, Ж-З 5, Раушская наб д. 4/5Типография, пр. Сапунова, 2 3производят в течение 96 - 120 час. Образование микросклероциев начинается на 72-ом час роста культуры, Выращивание ведут при непрерывном перемешивании и избыточном давлении в аппарате 0,5 - 0,8 ати. Аэрация 0,5 - 0,8 об/мин. Биомассу отделяют от нативной жидкости одним из известных способов и промывают водой в пятикратном объеме от количества взятой культуральной жидкости. Выход чистых микросклероциев от общей биомассы гриба составляет около 50% (по сухому весу). Сушка полученных таким образом микросклероциев осуществляется при температуре в пределах от 20 до 80 С.Весь технологический процесс, не считая стадии подготовки инокулюма, занимает шесть-семь суток, вместо полутора-двух месяцев по известному способу.Предлагаемый способ при значительной экономической эффективности обеспечивает получение стандартного инфекционного начала возбудителя вертициллезного вилта для создания контролируемых инфекционных фонов в селекционных учреждениях, что позволяет ускорить выведение новых вилтоустойчивых сортов хлопчатника. 1. Способ получения микросклероциев фитопатогенного гриба, возбудителя вертицил лезного вилта хлопчатника ЧегйсПЫит ЫайЙае, включающий выращивание его на питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли, отличающ и й с я тем, что, с целью интенсификации 15 процесса и повышения выхода целевого продукта, гриб выращивают глубинно на жидкой питательной среде, в состав которой в качестве основного компонента вводят картофельную мезгу, а в качестве дополнительного ис точника азота - рыбную муку.2. Способ по п. 1, отличающийся тем,что картофельную мезгу вводят в количестве 0,5 - 5%, а рыбную муку - 0,1 - 0,5%.