418757

ОПИСАН ИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ щ 418757 Союз Советских Социалистических Республикт, свидетельстваависимое от М. Кл. б 01 п 1/28 Заявлено 05.Ч 11.1972 ( 1805350 м заявкис присоедине асударствеииеа комитетСовета Министров СссРио делви изобретенийи открытий иори.03.74, Бюллетеньубликовано 1-018,84 (088,8 Дата опубликования описания 14,08.7 вторызобретения Ю. А. Малашхия и Л. билисский государственный институттиани ршенствования врачей аявитель СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АУТОАЛЛЕРГИИ ПРИ ИНФЕКЦИОННЫХ ПОРАЖЕНИЯХ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫИзобретение относится к медицине.Известен способ определения аутоаллергин при инфекционных поражениях нервной системы, например при менингитах, путем центрнфугирования свежевзятой цереброспинальной жидкости, приготовления мазков, их фиксации, окрашивания и изучения клеточного состава мазка.Целью изобретения является повышение точности диагпосцирования специфической аутоаллергии.Предлагаемый способ характеризуется тем, что на окрашенный мазок наносят антиген мозга, помещают его во влажную среду с последующим термостатированием при температуре 37 С в течение 20 - 25 ыш, промывкой, добавлением люминесцентной сыворотки, повторным термостатироваием при той же температуре в течение 30 мин и определением клеточных противомозговых аутоантител в лимфоцитах,П р и м е р. Свежую спиномозговую жидкость (не позже 2 час после взятия ликвора 2 - 3 см) центрифугируют (1500 об/мин в течение 15 - 20 мин). Из осадка готовят препараты: один мазок опытный и два контрольных.Опытный препарат готовят следующим образом. Мазок сушат при комнатной температуре, фиксируют реактивом Май - Грюнвальда или метиловым спиртом в течении 3 - 5 мин (препараты следует помещать в фиксирующие жидкости очень осторожно), после этого дважды промывают в дистиллирован ной воде. К опытному мазку добавляют антиген мозга (прпготовленньш обычным способом 10% -ньш водно-солевой экстракт ткани мозга) и укладывают во влажную камеру, которую затем помещают в термостат при тем пературе 37 С на 20 - 25 мин. Вынутый изтермостата мазок дважды промывают дистиллированной водой, к нему добавляют люминесцентную сыворотку в разведении 1: 32, после чего препарат вновь помещают в термо стат при температуре 37 С на 30 мин, Приготовленный мазок еще раз промывают в дистиллированной воде; па него наносят каплю высококачественного иммерсионного масла и изучают под люмипесцентным микроскопом.20 К одному контрольному препарату вместомозгового антигена добавляют антиген печени, а к другому контрольному препарату антиген не добавляют.На опытных препаратах, если имеется ауто иммунное поражение нервной системы, в большинстве случаев обнаруживают флуоресценцию цитоплазмы (редко ядра) лимфоцитов, в то время как на некоторых лимфоцитах флуоресценцию не определяют. В контрольных пре паратах количество флуоресцирующих лимфоРедактор Т. Каранова Корректор Е. Миронова Заказ 1808/15 Изд. Мв 550 Тираж 651 Подписное ЦН 1 ЛИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, Ж, Раушская наб., д. 4(5Типография, пр. Сапунова, 2 цитов очень мало по сравнению с опытными препаратами и их флуоресценция слабая, Для дифференциации неспецифического свечения лимфоцитов от специфического производят подсчет флуоресцирующих клеток как в опытных, так и в контрольных препаратах. В каждом мазке считают по 100 клеток, которые делят на две группы. К первой группе относят нормальные нефлуоресцирующие клетки, ко второй группе - разной степени светящиеся клетки. Для сравнения результатов иммуноморфологического исследования клеток спиномозговой жидкости полученные данные подвергают обработке по показателям свечения лимфоцитов (ПСЛ) по следующей формулеПСЛ .=100 где Н - число флуоресцирующих лимфоцитов в опытном мазке,Н - аналогичное число их в контрольном мазке,100 - число сосчитанных клеточных элементов (лимфоцитов).Этой же формулой пользуются при повторных исследованиях у одних и тех же больныхдля определения динамики, Показатель свечепия лимфоцитов рассматривают как результат специфического действия мозговых анти- генов.Величины ПСЛ от 0 до 0,1 оценивают как 5 отрицательную реакцию ( - ) лимфоцитов намозговой антиген; от 0,1 до 0,2 - как слабо положительную (+) ; от 0,2 до 0,4 - положительную , выше 0,4 - резко положительную10Предмет изобретенияСпособ определения аутоаллергии при инфекционных поражениях нервной системы, например при менингитах, путем приготовления 15 мазка цереброспинальной жидкости, его фиксации и окрашивания с последующим микроскопированием, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности диагносцирования специфической аутоаллергии, на окрашен ный мазок наносят антиген мозга, помещаютего во влажную среду с последующим термостатированием при температуре 37 С в течение 20 - 25 мин, промывкой, добавлением люминесцентной сыворотки, повторным термо статированием при той же температуре в течение 30 мин и определением клеточных противомозговых аутоантител в лимфоцитах.