Способ получения 3-кето-с19-стероидов

д гуду Союз СоветскихСоциалистическихРеспублик изоьеетенияИ ПАТЕНТУГ Заеиси 1 мый от патента-М.Кл. С 120 13/00 Заявлено 15.Х.1969 ( 1371168/31-16) Приоритет 07.11.1969,%Р 120/137723, ГДР Гррудавстерниый ирмитетСовета Министров бббрве дряан изебретеиийи еткрытий Опубл,ковано 29,Ч 1.1973. Бюллетень36 УДК 615,45 (088.8) Дата опубликования описания 41974 Авторыизобретения Иностранцы Курт Шуберт, Вннфрид Шуманн и Клере ХерхольдЗаявитель Иностранное предприятие Дойче Академи дер Виссенштафтен цу БерлинСПОСОБ ПОЛУЧЕН ИЯ 3-КЕТО-С 19-СТЕРОИДОВ Изобретение относится к ооласти снтеза стероидных Гормбнов.Ранее Л 4.3-кетостероиды микробиолог неским путем не получали.Целью изобретения является упроцене способа путем изыскания микроорганизмов, обеспечивающих введение кислородной связи в 3 - положение З-дезокси-С-стероидов.Достигается это тем, что 3-дезокси-С-стсроиды, папример, ненасыщенные в кольце А 3-дезокси-С-стероиды растворяют в орган- чеоком растворителе, например,в ацегоне, оорабатывают аэробной культурой рода СогупеЬас 1 епцгп з(гер 1 оп 1 усез, процесс фарментации ведут 10 - 100 час и выделяют целевой продукт известными приемами.Лэ-дезокси- С 19- стероиды обрабатываюг культурой СогупеЬас 1 ег 1 цгп зрес.Л 4-3-дезокси- С 19- стероиды обрабатывают культурой Ягер 1 огпусез зрес.Лв,5-3-дезокси-С 19.стероиды обрабатывают культурой СогупеЬас 1 ег 1 цпт врес,П р и м ер 1. 20 колб объемом 500 .ил, содержащих по 50 я,г питательной среды (10 а декстрозы, 10 г бактериологического пептона, 10 ял казеинового гидролизата, 2 г дрожжевого экстра,кта и 6 г хлористого натрия в 1000 мл водопроводной воды), засевают 11 -3-дневной культурой Ягер 1 огпусев ьрес.1 МЕТ 109, вырагценной на ахаре с овсяной мукой. Культивирова лие цравсяят при 28 С и ветряквани. Через 48 час в сред) добавляют 100 яг Л 4-андростен-опа, растворенного в 10 .ил ацетона, и продолжают встряхивание в еще 48 час, Затем культуру многократно экстрагируют эфиром, промывают экстракт 0.1 н.едким натром дистиллированной водой, сушат отгоняют растворитель. Кристаллический остаток очищают тонкослойной хромато 1 о графией на силикагесле Д (Грайц-Делау) с добавлением флуоресцирующего индикатора в снес бензола с эфиром (2:3). Ультрафиолетовуюоложтельную зону элюируют смесью эфира с хлороформом (1:1). После упарива ня элюата выделяется кристаллический оса.док .У-адростен,17-диона.П р м е р 2, Колбы с питательной средойзасевают, как это описано в,примере 1, двухсуточной культурой СогупеЬас 1 ег 1 цгп зрес.20 Б,б 985, выращенной на агаре с мяоной водойи 2% глицерина. Культивирование проводят на вибрационном столе при 37 С, Через 48 час в среду добавляют 100 лгг 5 д-Л-андростен- -она .в 1 О,и.г смеси хлороформа с ацетоном (1:31 продолжают встряхивание еще 72 час.Затем культуру многократно экстрагируют хлористым метиленом, экстракт промывают 0,1 н. едким натром и дистиллированной водой, сушат упаривают в вакууме. Экстракт предварительно очищают хроматографией на391873 Предмет изобретения Составнгель С. Щенева Корректор В, Жолудева Техрсд 3. Тараненко Р дактор Н. Спиридонова Заказ 654 Изд, 4 925 Тираж 467 Подписное 11-ИП 1 осударственного комитета Совета Министров СССР по делам паобретений и открытий Москва,Ж.35, Раушская наб., д. 45Обл. тпп. Костромского управтспии издательств, полиграфии и книжной торговли колонке с силикагелем 0,2 - -0,5 гял (МЕКСК). Тонкую очистку производят методом тонкослойной хроматографии иа снликагеле с флуоресцирующим индикатором в смеси беизол с эфиром (2:3), ;люирование производят смесью эфира с хлороформом (1:1). После упарнвания элюата выделяются кристаллический Л 4-андростен,17-дион.П р и м е р 3. Колбы с питательной средой засевают, как это описано в примере 1, двух. суточной культурой СогупеЬас 1 егшп 1 зре;.1093, выращенной на агаре с мясной водой и 2% глицерина. Культивирование проводят на вибрационном столе при 28 С. Через 48 час в среду добавляют 100 лг Лав-андростсн- -17-она в 10 мл смеси хлороформа с ацетоном (1:3) и продолткают встряхивание еще 144 -- 192 час. Затем культуру многократно экстрагируют эфиром, экстракт, промывают 0,1 н. едким натром,и дистиллированной водой, сушат и упаривают, Очистку проводят, как это было описано в,примере 1 получая Л-андростен,17-дион. 1. Спосоо получения 3-кето-С 19-стероидовнапример, Л 4-3-кетостероидов, отличающийсятем, что, с целью упрощения способа, 3-дезокси-С 19-стероидь, например, ненасыщенные вЛ кольце 3-дезокси-С 19-стероиды растворяюти органическом растворителе, смешивающемо ся с водой, например в ацетоне, обрабатываютаэробиой культурой рода СогупеЬас 1 ег 1 цп4 герогпусез, процесс ферментации ведут10100 час и выделяют целевой продукт изиестнымн приемами.5 2. Способ по п. 1, отличающиися тем, чтоЛ"-3-дезокси-С 19-стероиды обрабатывают культурой СогупеЬас 1 ег 1 цгп зрес,3. Способ по п. 1, отличающийся тем, чтоУ-дезокси- С 19-стероиды обрабатывают20 культурой 51 гер 1 огпусез зрес.4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что,Л"5-дезокси-С 19-стероиды обрабатывают культурой СогупеЬас 1 ег 1 цгп зрес.