Способ очистки рибонуклеазы

Номер патента: 259790

ZIP архив

Текст

Союз Соеетских Социалистических РеспубликЗависимое от авт. свидетельствал. 6 а, 22 О аявлено 31.Х,1964 ( 9277 23 присоединением заявки МПК С 1 Приоритет Комитет оо делам обретений и открытири Сосете МинистровСССР К 663,478,2,663.14публиковано 22.Х 1.1969. Б ата опубликования описан юллетеньза 197я 11 Л.1970 Лвчорыизобретения ф. Ю. Рышка, Л. Б. ПН. Беленький, В, Н. ЦигагтковС. Хохлов нская, Н Чамин и Заявите СПОСОБ ОЧИС ОНУКЛЕАЗ Известен способ очистки рибонуклеазы диализом и кратковременным кипячением. В результате диализа теряется до 50% продукта.Предлагаемый способ состоит в том, что рибонуклеазу, загрязненную солями, низкомо лекулярными веществами и некоторыми ферментами, обрабатывают фенолом, затем осаждают спиртом, осадок экстрагируют водой, нерастворимую часть отделяют и после лиофильной сушки получают 90 - 98 о 4 рибонуклеазы. 10 Чтобы получить химически чистый препарат, полученный продукт очищают гелевой фильтрацией на сефадексе 6-25 или 6-50. етственно: 3,6 г (6%), активно ть 6%; 02 г(3 оо) активноность 1%,Пример 3,трагир ют трицентрифугируюрибонуклеазы стивность 80%;0,1 г (3%), нерактивность 1,5экстрактов оченбез опалесценциПр им еч анчения отчетливо мера 1 эксЭкстр а кты ат. Выход (66% ), акность 15%;0,1 г (3%), 1-го и 2-го имы в воде 3 г осадка из при раза 15 мл воды.и лиофильно суш оответственно: 2 г 0,5 г (18%), акти астворимая часть %. Лиофилизаты ь хорошо раствор и рибонуклеаз мл воды. До перемешиваю рхний слой эк фенола. Объе нтр ифугируют, ий осаждают ок промывают каторе. Выход ,бги 032 г,с исходного, т. П р и м е р 4, 2 г лиофичизата (экстракт 1 примера 3) растворяют в 20 лтл 0,2 М уксусноп кислоты и наносят на колонку 4 Х 110 см, наполненную сефадексом 6-25. Первые 40 мл элюата отбрасывают, следующие 100 лтл со,держат 1 г высокоочищенной рибонуклеазы в виде ацетата,П р и м е р 5. 2 г лиофилизата растворяют в 0,1 М растворе пиридина или 0,05 растворе аммиака. Первые элюаты отбрасывают (400 мл), а рибонуклеаза выходит в виде свободного основания (100 лтл). Препараты, получаемые в примерах 4 и 5, применяют как химически чистые для биохимических исследований; яют 10 г рибонуклеазы ируют аналогично приэкстракту (90 мл) доно 35,10 и 10 мл спирП р им ер 1. Навеск 1 г растворяют в 200 50 мл водного фенола, и центркфугируют. Ве ют еще два раза 25 мл экстракты повторно це слой удаляют, а нижн объемом спирта. Осад и сушат в вакуум-экси соответственно 2,93 г, 1 ющий 95% активности ка трехкратная,П р и м е р 2. Раствор в 200 мл воды. Экстраг ,меру 1. К полученному бавляют последователь ы 105 и 15 бавив по т 15 лгин страгирудиненныеверхний 20равным спиртом по весу оставляе, очист е. Спирт добавляют до ивыраженного осадка.259790 Предмет изобретения Редактор Б. Б. Федотов Текред Л, Я. Левина Корректор С. М. Сигал Заказ 960/2 Тираж 500 Подписное ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР Москва Л(-35, Раушская наб д, 4/5 Типография, пр. Сапунова, 2 Способ очистки рибонуклеазы, отличающийся тем, что, с целью упрощения технологического процесса, повышения выхода и качества делевого продукта, рибонуклеазу подвергают обработке фенолом и спиртом, полученный осадок экстрагируют водой, экстракт лиофильно сушат и полученный продукт филь труют на сефадексе,

Смотреть

Заявка

927742

МПК / Метки

МПК: C12N 9/22

Метки: рибонуклеазы

Опубликовано: 01.01.1970

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-259790-sposob-ochistki-ribonukleazy.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ очистки рибонуклеазы</a>

Похожие патенты