2, 7-бис-(3 -карбокси-1, 2, 4 -триазол-5 -азо)-1 окси-8-аминонафталин-3, 6-дисульфокислота в качестве реагента для обнаружения белков в полиакриламидных гелях

)5 С 09 В 39/00, 0 ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН НИЯ БЕЛКОВ В ПОЛИАКРИЛАМИДНЬГЕЛЯХ(57) Изобретениенической химии,ческому азосое2,7-бис-(3 -карбо1-окси-аминонлоте (БКТААК), кэована в качествния белков в иБКТААК требуетдля обнаружениярасхода уксуснокрасителя по срасителями амидочлубым К 250. 1 тд Никитина ,В.Игнатова опублик. 1988 2, р, 595-602. ,2 ,4-ТРИА- ИНОНАФТАЛОТА В ОБНАРУЖЕБКТААК получают аэосочетанием дизотридэолкарбоновой кислоты с дш-кислотой о дое стадии: сначала дш-кислоту обрабатываот в кислой срде иэбылгком диаэотриазолкдрбонооои кислоты, высдждаот продукт и сочетают с диазотриаэолклрбоновой кислотой в щело ной среде.БКТААК взаимодействует с белками. Реакцию БКТААК с белками можно использовать для обнаружения белков в полииакриламидных гелях.П р и м е р 1. 3,2 г (0,01 М) аш-кислоты растворяют при слабом нагревании в 200 мл дистиллированнои воды. Смесь быстро охлаждают, интенсивно перемешивая, и по каплям добавляют охлажденый раствор 2,1 г (0,015 М) диаэотридзол карбоновой кислоты о смеси 22 мл коцетрировдной НО и 7,5 мл воды. Все это д лается при охлаждении льдомРеакционную снатной температуршивается в т нон фор ь достигается синтединения 1,2,4-триазонением его в качествеения белков,Поставленная це зом нового бисаэосое ла (БКТААК и приме реагента для обнаруж месь Остоляют при ком е нд 10-12 ч С "есь окрд омно-красный цоет ГОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТг 10 ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИПРИ ГКНТ СССР К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬС(53) 547,556.433 (088.8) (56) Патент ПольшиМ 144250, кл. С 07 С 143/70,ВосЫт 1 а, 1960, ч,1, р. 39 В 1 осЫпа, 1975, ч. 631, М (54) 2,7-Бис-(З-КАРБОКСИЗОЛ-АЗО)-1-ОКСИ-АМ ЛИН,6-ДИСУЛЬФОКИС КАЧЕСТВЕ РЕАГЕНТА ДЛЯ Изобретение относится к области органической химии, в чэстности к новому химическому аэосоединению ряда1,2,4-триазола, конкретно 2,7-бис-(3-карбокси,2,4 -триаэол-дзо)-1-окси-вми/ гафталин,6-дисульфпкислоте (БКТААК),кос с-н фмулы .,- , и н-нн 1,Я.Д,н 0,ь ни - с-соон-с.нн-нкоторая может быть использована в качестве редгента для ускоренного обнаружения белков о полиакриламидных гелях,Цель изобретения - синтез 2,7-бис-(З-карбокси,2 ,4 ф-триазол-азо)-1-окси.аминонафталин-З,б-дисульфокислоты и ееиспользование в качестве красителя длябелков относится к области оргав частности к новому химидинению ряда триазола - кси,2 ,4-триазол 5 -аэо)- афталин-З,б-дисульфокис оторая может быть исполье реагента для обнаружеолиакриламидных гелях. в 90 раз меньше времени белков и в 10 рдэ меньше й кислоты для отмывания вненио с известными краерным 10 Б или кумасси гобл.1675308 Моноазокраситель высалиоают с помощьюИЛС, Осадок 1)астооряк)т п 10 мл 5%-нойГ 4 а 011, фильтруог рост ос)1) и действие 1 концен)рирооаной 11 С 1 осаждают и отделяютосадок крг)с 31 тел 31, Осадок повторно раство 5ряк)т о 10 мл 5)-ного раствора 1 чаОН, фильтру ю 1 11 к полу 1 и 3)ному растоОру и ри. - с,;- 11 . /311,о1 Л 1 - и Краситель Время огмыоания фона од 77)-ной ук лоты, мБКЭ ААК Ал 1 идо черный 10 Б К/масси /олубой Р,-)окпз 2) /5 В 1111,11131 ГОСугп)С 1 31 ра)к Г)311 3 О К О Л13035. Мог ета по и а, Ж,льский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул Гз/арина, 10 н)иапо/1 гт 1)О 3)нс) 1 тдБ КТАЛ К - 2, 7-631 с (3)ка ГКОКИСЛО)П. П р и м е р 2. Использование БКТААК в качестве реагента для обнаружения белков в полиакриламидных гелях (ПААГ).Электрофорез белков (гистонов, рибо 31 уклеазы, и др.) в полиакриламидных гелях проводили по методу Паниума и Чокли в трубках диаметром 5 мм и высотой 100 мм.После электрофореза гели окрашивали 0,2-ным раствором красителя БКТААК в смеси этанол:вода;СНзСООН в соотношении (5:5:1), а также для сравнения окрашивали и 0,2%-ным раствором амидо черного 10 Б и кумасси голубого Р, Гели окрашивали в течение 6 ч.Применение БКТААК для обнаружения белкоо в полиакриламидных гелях поэоолязг определять белки при концентрации 10- 109 М и не требует многократной отмывки геля от избытка красителя, что очень удобно при серийных анализах белков.В случае известных красителей - амидо черного 10 Б и кумасси голубого Р, требуется длительное время и большой расход уксусной кислоты для отмывки полиакриламидных гелей от избы) ка красителя, что значигельно удлиняет время анализа белков.В таблице приведены сравнителы)ые да)131 ь 1 е предлагаел 1 ого красителя с известным.Формула изобретения2,7-Бис-(3 -карбокси,2,4 -триазол/ / / / -а зо)-1-о к си-а мин он афт алин,6-дисул ьф Окислота формулыНООС- С -1 ч11 ЪС-М= Л/ л/=3/- Л) - ) )ННО,5 5 ОР- С П1 ЧН - 11в качестве реагента для обнаружения белков о полиакриламидных гелях,Подписноебретениям и открытиям при ГКНТ СССушская наб 4/5