Способ получения тиминрибозида

Союз Советских Социалистических РеспубликЗависимое от авт. свидетельства12 р, 16 аявлено 14,Ч 111,1963 ( 852460/23-4) гсоединением заявк 1 ПК С 07 д Приоритет Государственныйкомитет по делаизобретенийи открытий ССС УДК Бюччетень Мо 19исания 28.Х 11,1964 публнковано 12.Х.1 ата опубликования Авторыизобретени. Будовский Елисеева, В. Н. Шиба Заявител ПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТИМИНРИБОЗ(реакция Манниха) при 90 С в течение 3 час, затем полученный 5- (диэтиламинометилен)- уридин элюируют на Дауэкс1 н. аммиаком.Выход 40 - 50%. Чистота продукта доказана 5 методами электрофореза, бумажной хроматографии и УФ-спект 1 гом. 5-(Диэтиламиномети.лен) -уридин гидрируют над РЮ в этаноле при 70 С и 1 атхг в течение 10 час, подкисляют муравьиной кислотой, отделяют на Дауэксот 10 непрогидрировавшего продукта. Выход 5-метилуридина 50%. Чистота продукта доказана методами электрофореза и бумажной хроматографии.Новый способ получения тиминрибозида от личается от известных тем, что для введенияметильной группы в 5 положение уридина используется реакция Манниха с последующим гидрированием полученного 5- (диэтиламин)- метиленуридина, Кроме того, выход на стадии 20 аминометилирования составляет 40 - 50 ого (визвестном способе оксиметилирования уридина 19%), при введении метильной группы по этому методу в уридине не образуется димеров и гидрирование протекает мягче. Выход 25 составляет 50 - б 0%. П р и м е р.зида из уа) Получе 0 дина. руд га Го 5 Подпис Тиминрибозид является составной частью растворимой РНК - основного переносчика информации при синтезе белка. Кроме того, синтез тиминрибозида позволит получить некоторые аналоги природных коферментов, играющих важную роль в превращениях углеводов. До настоящего времени источником получения тиминрибозида являлись либо растворимая РНК, содержащая ) 0,1% тиминрибозида, либо синтетические методы, например следующие:а) Способ рибозилирования тимина, заклгочающийся в конденсации дитимин-Нд с галоидным производным ацилированного сахара в толуоле или ксилоле с последующим удалением ацильной защиты гидролизом НС 1 в метаноле при комнатной температуре. Однако выход получаемых продуктов недостаточен -от 5 до 25%,б) Способ оксиметилирования уридина, заключающийся в конденсации уридина с формальдегидом при 50 С, отделении 5-оксиметилуридина от побочных продуктов на Дауэксс последующим гидрировапием над Р 10., в 50%-ной уксусной кислоте при 3 агхг в течение 9 час, Выход 5-оксиметилуридина не превышает 19%, 5-метилуридина - 18%.Предложен способ получения тиминриоозида, заключающийся в том, что уридин конденсируют с диэтиламином и формальдегидом олучение тиминрибодина5-(диэти,гагиггнохгетилен) -ури165461 Составитель И, В. ВихаРедактор Л. К, Ушакова Техред Ю. В. Баранов Корректор Т, В. Муллина Заказ 3213/2 Тираж 500 формат бум. 60 Р,90 Ч 8 Объем 0,16 изд. л, Цена 5 коп. ЦНИИГ 1 И Государственного комитета по делам изобретений и открытий СССР Москва, Центр, пр, Серова, д, 4Типография, пр. Сапунова, 2 К 500 мг (2 моль) 95%-ного уридина добавляют 2 мл (20 моль) диэтиламина и 7 мл воды н осторожно при встряхивании по каплям добавляют 1,2 мл (15 моль) 40% -ного раствора формальдегида, запаивают ампулу и греют на кипящей водяной бане 3 час. Ампулу вскрывают, реакционную смесь упаривают в вакууме, разбавляют водой до 300 - 400 мл, подкисляют муравьиной кислотой до рН 2 - 3 и пропускают через Дауэкс(Н+ - форма, объем смолы 100 мл). При этом элюируется непрореагировавший уридин, который может быть использован вторично. 5- (Диэтиламинометилен) -уридин элюируют 120 - 150 мл 1 н. раствора аммиака. Раствор упаривают, остаток переосаждают из метанола ацетоном. Получают 280 мг (42% от теоретического) 5- (диэтиламинометилен) -уридина, строение которого доказывается данными электрофореза (при рН 4 вещество имеет положительный заряд); бумажной хроматографией: К = 0,07 в системе. вторичный бутанол, насыщенный водой (йу уридина 0,23) и УФ-спектра (рН 12, )щах= 267 ммк; Еща = 6400; 1 дп 1 п = 245 ммк)п =4500)б) Гидрирование 5-(диэтиламинометилен)- уридина. 100 мг (0,3 моль) 5-(диэтиламинометилен)- уридина растворяют при нагревании в 2 мл воды, добавляют 8 мл этанола и 100 мг РЮ 2 и гидрируют 10 час при температуре 70 С 5 (1 атм). Раствор упаривают, разбавляют водой, подкисляют муравьиной кислотой до рН 2 - 3 и отделяют от непрореагировавшего 5-(диэтиламинометилен) -уридина пропусканием через Дауэкс(Н+ - форма, объем смолы 10 40 мл).Раствор упаривают, остаток высушивают,переосаждают из метанола ацетоном,Выход 38 мг (50%).Строение доказываетсяданными электрофореза (при рН 4 вещество 15 нейтрально), бумажной хроматографией: К0,35 в системе вторичный бутанол, насыщенный водой (Ку уридина = 0,23).Полученный препарат превращают в тиминрибозид-фосфат известным методом.20Предмет изобретенияСпособ получения тиминрибозида из уридина и формальдегида с последующим гидрированием полученного продукта над РЮ, отли чающийся тем, что, с целью упрощения процесса, уридин конденсируют с формальдегидом и диэтиламином и гидрирование ведут в этиловом спирте при температуре 70 С