Способ определения содержания тирозина в плазме крови

Номер патента: 1596250

Авторы: Дрозд, Носова, Обух, Филатова

ZIP архив

Текст

(мкМ),сфатногооресценцнм) обр стандартного обр0,5 - концентрацраствора тирозинВлияние рН финтенсивность флу( "юозас зца беэбел ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЬГГИЯМПРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ ИЗ А ВТОРСНОМУ СВИ(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАТИРОЗИНА В ПЛАЗМЕ КРОВИ(57) Изобретение относится к кл 1Изобретение относится к медицине, а именно к клинической биохимии, икасается способа определения содержания тироэина в плазме крови.Целью изобретения является сокращение времени анализа и повышениеч ительности способа.и м е р, 0,1-0,5 мп плазмы крови смешивают с равным объемом 20%-ной трихлоруксусной кислоты и под" вергают центрифугированию 10 мин при 300 об/мин 0,1 мл супернатанта смешивают с 3 мл 1/15 М Фосфатного буфера рН 6,8-7,2 и измеряют интенсивность флуоресценции при длине волны 300 нм, длина волны возбуждающего света 270 нм. Параллельно измеряют интенсивность флуоресценции контрольного и стандартного образцов. Контрольная проба содержит 3,05 мп буфера и 0,05 мл 20%-ной трихлоруксусной кислоческой биохимии и касается способаопределения содержания тирозина вплазме крови. Целью изобретения является сокращение времени анализа и повышение чувствительности способа.Способ заключается в осаждении белковиз плазмы крови раствором трихлоруксусной кислоты, их удалении центрифугированием, доведении рН надосадочной жидкости до 6,8-7,2 фосфатнымбуфером и измерении интенсивностифлуоресценции тирозина при длине волны Флуоресценции 300 нм и длине волнывозбуждения 270 нм. Чувствительностьспособа 0,1 нМ,ты, стандартная 3 мл буфера, 0,020%-ной трихлоруксусной кислоты0,05 мл стандартного раствора тина 0,5 мкМ.Содержание тирозина рассчитыпо Формуле:Т= 0,5 (мкМ),Т - концентрация тирозина в плме крови;- интенсивность флуорес онтр ольно го образца ;4" Диапазон Времялинейной анализа,зависи- мннмостинМ Чувстви- Воспротельность, изводи-,нМ мость,Способ редпааемыйрототип 0,1 2 0,1-500 12 30 3, 5 30-800 65 Данные, приведенные в таблице, показывают, что чувствительность способа повышается, время анализа сокращается, при этом воспроизводимость способа не снижается. Составитель М. МатвеевРедактор Н, Горват Техред И,дидык Корректор С Чер 2906 Тираж 51Государственного коми113035, Иоск За Подписно обретениям и открытиям прн ГКНТ ССРаушская наб., д. 4/5 тета по и ва, Ж,Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина, 101 ковой фракции плевала крови следующеерн тфЗю 5 бе 45,6 9,46,6 27,36,8 . 29,27,2 28,67,8 33,5 .109,2 44 э 5П р и м е р. Клиническое применение способа.При поступлении в клинику у больного А. из локтевой вены в гепарини" зированную пробирку взяли 2 мл крови.0,5 .мп отцентрифугированной плазмы перемещали с равным объемом 20%-ной трихлоруксусной кислоты. Центрифугировали 10 мин при 3000 об/мин, 0,1 мл супернатанта смешивали в кварцевой кювете с 3 мп фосфатного буфера рН 6,8. Контрольная кювета содержала 3 мп буфера и 0,05 мл 20%-ной ТХУ, стандартная - 3 мп буфера, 25 0,05 мп 20%-ной ТХУ и 0,05 мп 0,5 мкМ раствора тирозина. Измерили интенсивность флуоресценции образцов на спектрофлуориметре МРГ - 4 при 1 ц щ 270 нм и М ф=300 нм. Она составила для контрольного 2, для стандартного 54, для опытного 17,относительных единиц флуоресценции. Содержание тирозина в плазме крови больного А. рассчитали по формуле:0" К 1 7-2Т= в . 0 5 - 0 5=0 15 мкМСт-К54-2Сопоставление характеристик предлагаемого способа и прототипа представлено в таблице.Формула изобретенияСпособ определения содержания ти" резинка в плазме крови, включающий осаждение белков раствором трихлоруксусной кислоты и удаление их центрифугированием, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью сокращения времени анализа и повышения чувствительности способа, безбелковую фракцию плазмы растворяют в фосфатном буфере с рН 6,8-7,2, а содержание тирозина измеряют по интенсивности его собственной флуоресценции при длине волны 300 нм и длине волны возбуждения 270 нм.

Смотреть

Заявка

4485713, 23.09.1988

ВСЕСОЮЗНЫЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ БИОТЕХНОЛОГИИ

НОСОВА ИРИНА МИХАЙЛОВНА, ОБУХ СЕРГЕЙ ВЛАДИМИРОВИЧ, ФИЛАТОВА НАТАЛЬЯ ВИКТОРОВНА, ДРОЗД СЕРГЕЙ ФЕЛИКСОВИЧ

МПК / Метки

МПК: G01N 33/48

Метки: крови, плазме, содержания, тирозина

Опубликовано: 30.09.1990

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-1596250-sposob-opredeleniya-soderzhaniya-tirozina-v-plazme-krovi.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения содержания тирозина в плазме крови</a>

Похожие патенты