Способ определения ацетилсалициловой кислоты

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНИРЕСПУБЛИК 8012690 21 6 а)4 С ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ ного Крас ный медицев маколея68, с, 4рический анаких63. органичес 1970, с. 2 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(7 1) Курский ордена Трудного Знамени государствцинский институт(56) Государственная фарХ-е изд.М.: Медицина, 19Коренман И.М. Фотометлиз. Методы определениясоединений,- М.: Химия,(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АЦЕТИЛСАЛИЦИЛОВОЙ КИСЛОТЫ(57) Изобретение относится к областианалитической химии, в частности кспособу определения ацетилсалициловой кислоты в лекарственных формах ибиологических жидкостях. Целью изобретения является повышение избирательности, чувствительности и экспрессности определения. Для этогоанализируемую пробу растворяют вэтаноле и обрабатывают 5 Х-ным раствором борной кислоты в концентрированной серной кислоте в присутствиипропанола. Объемное соотношение ана-.лизируемый раствор: пропанол составляет 1:3-3,5. Затем добавляют концентрированную серную кислоту и измеряют относительную интенсивностьфлуоресценции полученного окрашенного раствора. 7 табл.Изобретение относится к медицине и фармации, а именно к способам определения ацетилсалициловой кислоты, и может быть применено для качественного и количественного анализа это.5 го соединения в биохимических, токсикохимических и фармацевтических исследованиях.Цель изобретения - повышение чув 10 ствительности и изибрательности определения и сокращение времени анализа.Способ осуществляют следующим образом.15Анализируемуя пробу растворяют в этиловом спирте 96 град, к 1 мл полу-, ченного раствора добавляют 3 мл пропилового спирта и 1 мл 57.-ной борной кислоты в концентрированной серной кислоте, а затем измеряют интенсивность флуоресценции полученного при этом раствора в ультрафиолетовом свете, спектр возбуждения флуоресценции лежит от 310 до 390 нм с максимумом возбуждения 345 нм, а спектр излучения флуоресценции лежит от 380 до 520 нм с максимумом 440 нм.Прямолинейная зависимость между интенсивностью флуоресценции и кон,центрацией ацетилсалициловой кислоты лежит от 0,1 до 45 мкг/мл (табл.1), Зависимость интенсивности флубресценции от количества пропилого спирта (концентрация ацетилсалициловой кислоты 10 мкг/мл) приведена в 35 табл. 2, Зависимость интенсивности флуоресценции от концентрации борной кислоты (концентрация ацетилсалициловой кислоты 10 мкг/мп, пропилового спирта 3 мл) приведена в табл, 3. Зависимость интенсивности флуоресценции от количества 5 Е-ной борной кислоты в концентрированной серной кислоте (концентрация ацетилсалициловой кислоты 10 мкг/мл, пропилового спирта 3 мл) приведена в табл. 4, Чувствительность предлагаемого способа равна 0,01 мкг/мл.П р и м е р 1. Качественное о ределение ацетилсалициловой кислоты. 50К 1-2 мг препарата мелкоизмельченных таблеток прибавляют 1 мл этилового спирта 96 град, затем 3 мл, пропилового спирта, 1 мл 5 Х-ного раствора борной кислоты в концентриро . ванной серной кислоте и 5 мл концентрированной серной кислоты, перемешивают, выдерживают 10-15 мин и измеряют интенсивность Флуоресценции, ультрафиолетовом свете со светофильтрам УФСнаблюдают голубую флуоресценцию.П р и м е р 2, Количественное определение ацетилсалициловой кислоты в таблетках по 0,5 г.Точную навеску (0,01 г) мелкоиэмельченных таблеток помещают в мерную колбу на 100 мл. Добавляют 70- 80 мл этилового спирта 96 град, тщательно встряхивают и доводят до метки этиловым спиртом. 10 мл полученного раствора переносят в колбу на 100 мл и доводят до метки 96 град этиловым спиртом. К 1 мл данного раствора прибавляют 3 мл пропилового спирта, 1 мл 5 Е-ной борной кислоты в концентрированной серной кислоте и 5 мл концентрированной серной кислоты. Перемешивают раствор, выдерживают 10-15 мин и измеряют интенсивность флуоресценции по отношению к стандартному раствору с содержанием ацетилсалициловой кислоты 10 мкг/мл.Результаты количественного определения ацетилсалициловой кислоты в таблетках по 0,5 г представлены втабл. 5. П р и м е р 3. Количественное определение ацетилсалициловой кислотыв лекарственном препарате "Аскофен", содержащем в одной таблетке, г; кислота ацетилсалициловая 0,2; фенацетин 0,2; кофеин 0,04.Точную навеску (0,02 г) мелкоиэмельченных таблеток помещают в мерную колбу на 100 ип. Добавляют 70- 80 мл этилового спирта 96 град, тщательно встряхивают и доводят до метки 96 град этиловым спиртом. 10 мл полученного раствора переносят в колбу на 100 мл и доводят до метки 96 град этиловым спиртом. К 1 мл данного раствора прибавляют 3 мл пропилового спирта, 1 мл 57.-ного раствора борной кислоты в концентрированной серной кислоте и 5 мл концентрированной серной кислоты. Перемешивают раствор, выдерживают 10-15 мин и измеряют интенсивность флуоресценции по отношению к стандратному раствору с содержанием ацетилсалициловой кислоты 10 мкг/мл.Результаты количественного определения ацетилсалициловой кислоты в таблетках "Аскофен" представлены в табл. 6.69006 10 20 25 30 35 40 45 50 3 12П р и м е р 4. Количественное определение.ацетилсалициловой кислоты в лекарственном препарате "Цитрамон", содержащем в одной таблетке, г: ацетилсалициловая кислота 0,24; фенацетин 0,18; кофеин 0,03; какао 0,03; лимонная кислота 0,02; сахар 0,5.Точную навеску (0,02 г) мелкоизмельченных таблеток помещают в мерную колбу на 100 мл. Добавляют О мл этилового спирта 96 град, тщательно встряхивают и доводят до метки 96 град этиловым спиртом, 10 мл полученного раствора переносят в кол. бу на 100 мл и доводят до метки 96 град этиловым спиртом. К 1 мл данного раствора прибавляют 3 мл пропилового спирта, 1 мл 5 Е-ного раствора борной кислоты в концентрированной . серной кислоте и 5 мл концентрированной серной кислоты. Перемешивают раствор, выдерживают 10-15 мин и измеряют интенсивность флуоресценции, по отношению к стандартному раствору с содержанием ацетилсалициловой кислоты 10 мкг/мл.РезультаТы количественного определения ацетилсалициловой кислоты в таблетках "Цитрамон" представлены в табл. 7.П р и м е р 5. Количественное определение ацетилсалициловой кислоты в биологическом материале (моча).К 1 мл мочи прибавляют 5 мл дистиллированной воды, 0,1 мл данного раствора наносят на хроматографическую пластинку "Силуфоль в 2". Высушивают на воздухе 5-10 мин. Затем помещают в камеру со смесью растворителей ксилол;бутанол (6:1) и хроматографируют восходящим методом. Когда фронт растворителей доходит до конца пластинки, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 10 мин, в ультрафиолетовом свете с длиной волны 254 нм устанавливают локализацию пятна ацетилсалициловой кислоты и пятно с К 0,55, отмеченное по стандарту ацетилсалициловой кислоты,.количественно переносят в пробирку, прибавляют 3 мл пропилового спирта, 1 мл 57-ного раствора борной кислоты в концентрированной серной кислоте, 6 мл концентрированной серной кислоты, перемешивают, выдерживают 10-15 мин и флуорнметрируют относительно стандартного растворас содержанием 0,5; 1,0; 5,0;10 мкг/мл.Предлагаемый флуориметрическийспособ определения ацетилсалициловойкислоты в 70 раз чувствительнее известного, а высокая избирательностьэтого способа позволяет использовать его в фармацевтических и контрольноаналитических лабораториях для качественного и количественного анализа в субстанции и примеси его в лекарственных препаратах, центральныхзаводских лабораториях для контроляпроизводства данного препарата и всанитарно-гигиенических исследованиях для обнаружения ацетилсалициловой кислоты в воздухе производственных помещений и при биофармацевтических, фармакокинетических исследованиях, при разработке оптимальных лекарственных форм, дозы и ритма назначения для оптимизации и ускорения лечения больных.Подобной реакции не дают и не мешают определению близкие по структуре соединения (бензойная кислота, винная кислота, глютаминовая кислота, никотиновая кислота, фолиевая кислота, аскорбиновая кислота, дегидрохолиевая кислота, амидопирин, аминазин, анальгин, анестезин, антипирин, апрофен, барбамил, бемегрид, бензилпенициллин, бутадион, викасол, гюпокоза, гризеофульвин, декалин, диазолин, дикаин, имизин, келлин, кардиамин, крахмал, ксероформ, лактаткальция, левомицетин, мезатьн, метацин, метионин, молочный сахар, неодикумарин, никотинамид, новокаин,новокаинамид, папаверин, пиридоксин,прегнин, промедол, саркализин, сульфацил, сульфадимезин, уросульфан,фенолфталеин, хингамин, цитизин,этазол), что говорит о высокой избирательности способа. Предлагаемый способ более экспрессен по сравнению с известным способом. На его осуществление требуется времени в 7,5 раз меньше, чем известным способом, так анализ предлагаемым способом осуществляют за 20 мин в то время как известным - 2,5 ч.1269006 Таблица 1 Концентрация ацетилсалициловой кислоты, мкг/мл 10 10 10 0,1 0,2 10 22 о,з 0,4 28 20 0,5 О,б 40 зо го 60 22 72 24 0,8 60 26 0,9 96 66 1 О Таблица 3 Таблица 2 Концентрация борно Относительная инкислоты, 7. тенсивность луо-.ресценции 20 0,5 32 1,0 40 60 1,5 79 2,0 80 60 2,5 78 3,0 3,5 80 4,0 60 10 30 5,0 32 Пропиловый спирт, Относительная инмл тенсивность флуо- ресценции Относительная интенсивность луоресценции7 1269006 Таблица 4 Количество 5 Е-нойборной кислоты вконцентрированнойсерной Кислоте,мл Найдено ацеОтносительная интенсивность флуоресценции Метрологическая характеристика Навеска,тилсалициловой кислотыв таблетке0,0256 0,0248 80 60 0,0250 0,2009 А1,2 Ж 70 15 72 Таблица 7 Метрологическая характе- ристика Найдено аце тилсалицило вой кислоты в таблетке, г Навеска, г 76 74 70 25 68 Х = 0,2361 О, 0220 0,0222 0,0218 0,0220 0,2349 0,2208 0,2370 0,2469 0,2409 Таблица 5 0,0039 Навеска,О, 0019 0,00552, 37. 35 0,0220 А = 0,0100 0,0114 Х = 0,4896= 0,0396 6- = 0,0198 40 р = 0,55 0,510 0,480 0,488 0,489 0,481 0,0107 Способ определения ацетилсалициловой кислоты путем растворения анализируемой пробы в этиловом спирте и обработки химическим реагентом с последующим анализом полученного ра-, створа, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения чувствительности и избирательности определения и сокращения времени анализа, обработку проводят последовательно 53- ным раствором борной кислоты в концентрированной серной кислоте и концентрированной серной кислотой в присутствии пропанола, при объемном соотношении анализируемого, раствора и пропанола 1 : 3-3,5 и анализ про" водят измерением относительной интенсивности флуоресценции 0,0112 0,0106 А - 1, 1 Х 45 Таблица 6 Найдено аце- тилсалициловой кислоты в таблетке, г Метрологическая ха- рактеристиНавеска,ка 0,0250 0,0254 Найдено аце- Метрологичестилсалицило- кая характевой кислоты, ристикаг 550,1911 Х = 0,1996" 0,2026 6 = 0,0018 Продолжение табл, 6 0,2058 б= 0,0009 0,1976 Эр= 0,0024 Формула изобретения