Реагент для определения уреазной активности энтеробактерий

СОЮЗ ССВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 9)Яда) 6 В 4 "- 12 4 1/5 ж меРЕ ин скои микро пользовано ренциации э пробирк; вносят б одорастворимый (лированной в ловыи мтимо 05 г ой ( реть иний 0,0 мл) орения,ливают дисти и встряхиваю полно го т оспир вносят иловог е гот сь дл приг цент нан оси ,02 при месиатной сыхания в в вид фи к. 4 диаметр см.отовые и комна еа ты хра ние трех л уреазнои актив агентаель мн СУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМРИ ГКНТ СССР ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ(71) Кишиневский государственньдици ский институт(54) РЕАГЕНТ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ УНОЙ АКТИВНОСТИ ЭНТЕРОБАКТЕРИЙ(57) Изобретение относится к м логик и может быть. ис-.я биохимической диффееробактерий, Цель изобИзобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано для биологической дифференциации энтеробактерий,Цель изобретения - повьппение точности определения,П р и м е р 1, Из листа бумаги спленочным гидрофобным покрытием вырезают диск диаметром чашки Петри(9-10 см), На пленочной поверхностирасчерчивают 20 квадратных эон площадью 1,5 ем 1,5 см, В первую пробирку берут навески порошков мочевины(7,7 мл) затем помещают на водяную9баню при 90 С для растворения мочевины и глюкозы, Во вторую пробирку .вносят поливиниловый спирт (0,5 г) изаливают дистилированной водой(10,0 мл), затем растворяют над пламенем горелки или в водяной бане, В ретения - повышение точности определения. Реагант содержит, мас,Ж: мочевина 0,9-1,1; глюкоза 1,5-2,5; поливиниловый спирт 0,4-0,6; бромтимоловый синий водорастворимый 0,04- 0,06 физиологический раствор забуференный с рН 5,4-5,6, Реагент наносят на лист бумаги с пленочным гидрофобным покрытием и высушивают, Для проведения определения уреазной активности на сухой реагент наносят каплю исследуемой культуры и по характеру окрашиванпх определяют степень активности ,изменение цвета из желто/го в зеленый и далее густо-синий),атем в первую прсбирку ,1 мл растворов поливин а и бромтимолового сине стряхивают, получая сме овления реагента, Для э аждой квадратной зоны н ят по 1 капле объемом 0 ингредиентов, оставляюттемпературе до полногопель и получения реагенсированных ьжкропленок нои температуре в т(срок наблюдения),Для определенияности микробов носи ают в чашку Петри, а на реФормула изобретения Составитель Г.СмирноваТехред М,Моргентал Корректор Н,Борисова Редактор М. Петрова Заказ 5517/30 Тираж 501 Подписное В 11 ИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб д, 4/5Производственно-издательский комбинат "Патент". г.Ужгород, ул. Гагарина, 101 3 150779агент наносят каплю излучаемой микробиой культуры, содержащей 3 - 5 мпрд иболее микробных клеток вмп фиэрас+твора эабуференного с рН 5,5 - 0,1,5Чапку закрывают и ицкубируют при37 С, При наличии уреаэоположительноймикробной культуры цвет капли переходит иэ желтого до густо-синего, афри наличии уреаэоотрицательной микфс бной культуры цвет к апли о ст ает сябез изменений,П р и м е р 2, Готовят реагент вСоответствии с примером 1, но компоНенты берут в следующих количествах;Нас.%;мочевина 0,9 глюкоза 1,5;1 оливиниловый спирт 0,4; бромтимоловый синий 0,04; эабуференный физиологический раствор (рН 5,4) остальное,Из 39-и исследованых культур однакультура - слабоположительная реакция1,зеленый цвет) семь культур - положительная реакция,(сине-зеленый цвет),31 культура - резкоположительная реакция густо-синий цвет), 25П р и м е р 3. Готовят реагент всоответствии с примером 1, но компоненты берут в следующих количествах;мас.%: мочевина 1,1; глюкоза 2,5; поливиниловый спирт 06; бромтимоловый 30синий 0,06, эабуференный физраствор(рН 5,6) остальное,Из 39-и исследуемых культур у всех39 выявлена резкоположительная реакция (густо-синий цвет).35 7При исследовании 39-и уреаэоположительных культур энтеробактерий ( 16 видов) с помощью известного реагента( СИБ с мочевиной) выявлено 25 культтур, с помощью реагента по изобретению - 39 культур,Таким образом, использование нового реагента позволяет повысить точность определения уреаэной активности микроор ганиз мов; Реагент для определения уреазной активности энтеробактерий, содержащий мочевину, индикатор рН, поливиниловый спирт и растворитель, о т л и ч а ю - щ и й с я тем, что, с целью повышения точности определения, он дополнительно содержит глюкозу, в качестве индй-. катора рН он содержит бромтимоловый синий водорастворимый, а в качестве растворителя - физиологический раствор забуференный с рН 5,4-5,6 при следующем количественном соотношении компонентов, мас,%:Мочевина . , 0,9-1,1 Глюкоз а 1,5"2,5 Поливиниловый спирт 0,4-0,6 Бромтимоловый синий 0,04-0,06 Указанный физиологический раствор Остальное