Способ определения функциональной активности тимусзависимых лимфоцитов

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНИРЕСПУБЛИН С 191 а 01 ИЗЗ 48 ОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНЯТИИ САН М АВТОРСН) 3 891422/28-1 ) 26.04.85 ) 07,07.87. Бю ) Сибирский фи носится к и ения - повьпц взвеси лимотениеизобрособа.ритроци огии. Цел л, Р 25 лиал Всес аучного ц и сти с ногоранов ляют уют. онкологическ (72) И.И.Тют и А.Т.Адамян етк,С.Смолья абра част кото етокаклад ч озда 375(088.8)льский А.Л.,микробиологии 53 61 столическо уторова Н,М. и иммунологи М., 1979,мин в н ь да создаю 40 мин е ционных болезне с. 41-53. но берутивныхров отмла Т-акчем на м АЛЬФ ИСст чиснее а осле лимф тивн 157. И 54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕ ОИ АКТИВНОСТИ ТИМУС КРИТОВ ИЗОБРЕТЕНИ 22 51 А ты барана и центвают число розЗатем на верхнюывают манжету, ввление, превышаю0-30 мм рт.ст.у распускают и внение через 30 ия манжеты повтоопределения Т-аУ здоровых донопробы прирооцитов не ме1322151 776 Подписное род, ул. Проектная, 4 Изобретение относится к медицине,в частности к иммунологии.Целью изобретения является повышение точности способа.Способ осуществляется следующим 5образом.Из периферической вены берут кровьв количестве 5-6 мл в пробирку с гепарином 25 ед/мл. Суспензию лимфоцитов выделяют общепринятым методомв градиенте фиколл-верографин. Длявыявления Т-активных лимфоцитов к0,2 мл взвеси лимфоцитов добавляют0,2 мл взвеси эритроцитов барана ицентрифугируют 5 мин при 1000 об/мин,Число розеткообразующих клеток подсчитывают в нативном состоянии в камере Горяева. Затем на верхнюю частьплеча накладывают манжету сфигмоманометра, в которой создают давление,превышающее систолическое на 2030 мм рт.ст. Через 5 мин манжету распускают и вновь раздувают до указанных величин через 30-40 мин. Через5 мин манжету распускают и повторно25берут кровь для определения Т-активных лимфоцитов.При этом у здоровых доноров наблюдается прирост числа Т-активных лимфоцитов не менее чем на 15%. В тоже время у большинства больных(13 из 15) число Т-активных лимфоци"тов после пробы снижалось и толькоу 2 наблюдалось повышение не болеечем на 57. от исходного уровня. 35П р и м е р 1. Доброволец Л.,30 лет, здоровая. Исследование проводилось в условиях основного обмена.Сухой иглой пунктируют левую локтевую вену и забирают кровь в пробирку 40с гепарином. Иглу удаляют. На верхнюю часть правого плеча накладываютманжету сфигмоманометра, в которойсоздают давление 140 мм рт.ст. Через5 мин манжету распускают и вновь раздувают через 30 мин, Через 5 мин манжету снова распускают и забираюткровь для определения Т-активных лимфоцитов до пробы 46 после пробы 73.Величина прироста 587. 50П р и м е р 2, Доброволец А.,35 лет. Исследование проводилось вусловиях основного обмена. Локальнаягипоксия создавалась двукратно в течение 6 мин с интервалом 40 мин, Результат: до пробы содержание Т-активВНИИПИ Заказ 2856/39 ТиражПроизв.-полигр. пр-тие, г. Ужго,ных лимфоцитов 41%, после пробы 607Процент прироста 507,.П р и м е р 3. Больная К. Диагноз: рак молочной железы 111-В стадии, состояние после комбинированного лечения, Исследование проводилось аналогичным способом. Результат:процент Т-активных лимфоцитов допробы 78, после пробы 64. Величинаприроста составила отрицательную величину - 18%,Временной интервал 5-6 мин для соэ.дания локальной гипоксии являетсяоптимальным, так как за это времяпроисходит статистически значимоеснижение рО венозной крови на 7,91,68 мм рт.ст.Предлагаемым способом можно оценить функциональные воэможности Т-лим.фоцитов больного человека, посколькуу здоровых доноров наблюдается прирост числа Т-активных лимфоцитов неменее чем на 15% в то время, как убольшинства больных (807) число Т-активных лимфоцитов после пробы снижалось,Способ оценки функциональной активности Т-активных лимфоцитов позволяет за короткое время (1,5-2,0 ч),используя объективный критерий (снижение р 0 венозной крови), определитьфункциональную недостаточность тимус-,зависимых лимфоцитов у отдельногоиндивида, что невозможно осуществитьпри однократном исследовании. Это позволяет своевременно выявлять у больных скрытую иммунодепрессию, быстроосуществлять коррекцию функциональной недостаточности Т-системы иммунитета, используя соответствующиеиммуномодулятбры.Формула изобретенияСпособ определения функциональнойактивности тимусзависимых лимфоцитовчеловека путем выявления содержанияТ-активных лимфоцитов в венознойкрови верхней конечности, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с цельюповышения точности способа, содержание Т-активных лимфоцитов выявляютдо и после остановки кровотока и поразнице их содержания определяютфункциональную активность лимфоцитов,при этом остановку кровотока осуществляют дважды с помощью манжеты втеч ение 5 - 6 мин с интервалом 30- 40 мин.