Способ получения 5-фосфорибозилпирофосфат-синтазы
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Текст
СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 0 51)4 С 1 ПИСАНИЕ ИЭОБРЕТЕ 54) (57) ОЗИЛПИР ивающий ени жив мегои Кф 33 ена Тру ударствЛенин Н П вогоный ю акси),- 3. Во СЬев 19 ДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ ССЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫ К д ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ(71) Белорусский ордКрасного Знамени гоуниверситет им. В. И(56)Ячз.тгег В., Т .,1969, ч. 244, 2854,МеСЬодз п Епгутпоч. 71, 58,( СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 5-ФОСФОРИБ ОФОСФАТ-СИНТАЗЫ, предусматр экстракцию фермента из печ отных с последующим выделение э экстракта, отличащ и й с я тем, что, с целью упрощения и ускорения процесса, экстракцию проводят иэ гомогената сырой печени натрий-фосфатным буфером при рН 7-8, а фермент выделяют из экстракта путем прогревания при 50 о60 С в течение 3-7 мин, фракционирования сульфатом аммония, взятым в количестве 180-240 г/л, и подкисления ферментосодержащего раствора ук- а сусной кислотой до рН 4-5.еПредлагаемый способ полученияФРПФ"синтазы из печени животныхустраняет необходимость полученияацетонового порошка При этом значительно снижается трудоемкость процесса, сокращается число стадий,исключается необходимость использовать горючие и взрывоопасные вещества (ацетон), исключается необходимость проводить процесс при низкихтемпературах (-10 С), кроме того,продолжительность процесса сокращается с 7,5 до 3,5 ч,Составитель О. СкородумоваТехред Л,Олейник Корректор И, Эрдейи Редактор Н. Гунько Заказ 4787/29 Тираж 490 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035 ,Москва., Ж, Раушская наб., д, 4/5Производственно"полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 1 12556Изобретение относится к ферментной промышленности, а именно к способу получения 5-фосфорибозилпирофосфат-синтазы (ФРПФ-синтазы), и может быть использовано при производстве ФРПФ-синтаэы и 5-фосфорибозилпирофосфата (ФРПФ),Целью изобретения является упрощение и ускорение способа получения ФРПФ-синтазы. 1 ОСпособ заключается в том, что в результате исключения ряда операций фермент выделяют из экстракта, приготовленного из сырой печени путем гомогениэирования ее в натрий-фос фатном буфере, с последующим прогреванием экстракта и поэтапным фракционированием сульфатом аммония и уксусной кислотой, Все операции по получению ФРПФ-синтазы проводят при 20 1-4 С.П р и м е р. 250 г свиной печени гомогенизируют в 500 мл 0,1 М натрий-фосфатного буфера (рН 7,4) с 3 мМ восстановленного глутатиона 25 (буфер А) при 1-4 С, Гомогенат центрифугируют 20 мин при 23000 8. Надосадочную жидкость (экстракт печени) помещают в колбу и прогревают при 55 С в течение 5 пвн, после чего 3 О раствор быстро охлаждают до 4 С и снова центрифугируют 15 мин при 7000 , Все последующие операции 39 2проводят при 4 С. К полученной надосадочной жидкости добавляют сульфат аммония (из расчета 209 г/л), выпавший осадок отделяют центрифугированием (15 мин при 7000 я) и растворяют в 100 мл буфера А. Смесь центрифугируют еще раз при 7000 в течение 15 мин, собирают надосадочную жидкость и устанавливают рН 4,6 путем добавления по каплям 1 М уксусной кислоты. Смесь центрифугируют 1 О мин при 23000 я, осадок собирают и растворяют в 100 мл буфера А, затем устанавливают рН 7,4. Полученный раствор ФРПФ-синтазы име" ет активность 5000 мЕ (1 мЕ = 1 нМ ФРПФ/мин), Продолжительность процесса выделения 3,5 ч. Хранят раствор ФРПФ-синтаэы при -10 С.о
СмотретьЗаявка
3847892, 28.01.1985
БЕЛОРУССКИЙ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМ. В. И. ЛЕНИНА
ОЛЕХНОВИЧ ИГОРЬ НИКОЛАЕВИЧ, МАКСИМОВА НАТАЛЬЯ ПАВЛОВНА, ФОМИЧЕВ ЮРИЙ КОНСТАНТИНОВИЧ
МПК / Метки
МПК: C12N 9/00
Метки: 5-фосфорибозилпирофосфат-синтазы
Опубликовано: 07.09.1986
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-1255639-sposob-polucheniya-5-fosforibozilpirofosfat-sintazy.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ получения 5-фосфорибозилпирофосфат-синтазы</a>