Способ приготовления реагента для выявления рецепторов

Номер патента: 1218524

Авторы: Каральник, Тимофеева

ZIP архив

Текст

(19) (И) 61 К 39/00 И ВТОРСКОММ СВИДЕТЕЛЬСТВУ 5/28-1383 09.87. Бюл. 1) чно-исследават емыологии; мик нных болезней ский кожновен 35ельс.робио ко ийонеилогии и Уно-иссле-,гический(71) Нау тут эпид инфекциб дователь институт (72) Б;В (53) 615 .(56) Нови бораторно(54)(57) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ РЕАГЕНТА ДЛЯ ВЬИВЛЕНИЯ С, РЕЦЕПТОРОВ путем трехкратной сенсибилизации эритроцитов гемолизином и комплементом, о тл и ч а ю щ и й с я тем, что, с це,льй цовышения стабильности реагента при сохранении егоспецифичности и высокой чувствительности выявления С рецепторов, перед сенсибилиэацией эритроциты фиксируют ацетальдегидом, а сенсибИлизацию осуществляют гемолнзином млекопитающих и цельным комплементом морской свинки или мьппи, причем при первой и второй сенсибилиза.- циях гемолизин применяют в разведении в 3 раза меньшем, а при третьей - в 6 раз меньшем гемолитического титра.1218524 Составитель М.ВасильевРедактор Т.Янова Техред М.Дидык Корректор С.Шекмар Заказ 4358 Тираж 594 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4. Изобретение относится к биологии и медицине, а именно к приготовлению реагентов для иммунологических,исследований.Цель изобретения - повышение ста" бильности реагента при сохранении его специфичности и высокой чувствительности выявления С рецепторов.Способ поясняется следующим примером.П р и м е р 1. Эритроциты фиксируют ацетальдегидом, для чего смешивают равные объемы 16-18 взвеси эритроцитов,и 7,0-7,2 Е нейтрального раствора ацетальдегида, содержащих 0,857 хлорида натрия. Смесь выдерживают в течение 24,ч при 20 С. Затем эритроциты трижды отмывают эабуференным рН ,0-7,2, 0,853-ным раствором хлорида натрия или раствором Хенкса и суспендируют в таком же растворе до получения 50 Х-й взвеси. Смешивают равные объемы, взвеси фиксированных эритроцитов и гемолитической сыворотки в разведении, в три раза менъшем ее гемолитического титра. Смесь выдерживают в течение 18-22 мин при 37-39 С и к ней добавляют два объема неразведенного цельного комплемента, морской свинки или мьппиСмесь выдерживают в течение 14-16 мин при 37 о39 С, после чего к ней добавляют два объема гемолитической сыворотки в прежнем разведении, По окончании экспозиции в течение 18-22 мин при 37- 39 С к смеси прибавляют два объема цельного комплемента. Полученную таким образом смесь выдерживают 14-. 16 мин при 37-39 С. После этого всмесь вносят восемь объемов гемолитической сыворотки в разведении в 6 разменьшем ее гемолитического титра.Смесь снова выдерживают в течение18-12 мин при 37-39 С, после чего внее добавляют восемь объемов неразведеиного комплемента и экспонируют втечение 14-16 мин при 37-39 С. Все используемые разведения гемолитической сыворотки готовят на забуференном рН 7,0-7,2, 0,857.-ном ра 1 б створе хлорида натрия или на раствореХенкса. Смеси при каждой экспозициипериодически перемешивают. Сенсиби, лизированные эритроциты трижды отмылвают таким же рас,вором при центрифугировании (1000 об/минв течение 1416 мин), Отмытый эритроцитный"реагевтсуспендируют в таком же растворе ипо подсчете клеточной концентрациихранят при 3-5 С.25 Таким образом, способ позволяетповысить стабильность реагента придлительном хранении (срок годностисоставляет 3 года что превышает срокгодности реагента, приготовленногоЗО по известному способу1 О дней,более чем в 100 раз) при сохранении специфичности и высокой чувствительности выявления С рецепторов: процентклеток, выявляемых при помощи реагента, приготовленного по данному спосо 35бу, в день изготовления содержащихСщ рецепторы, составляет 10,49 й 0,62

Смотреть

Заявка

3695345, 21.11.1983

НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЭПИДЕМИОЛОГИИ, МИКРОБИОЛОГИИ И ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ, НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ КОЖНО-ВЕНЕРОЛОГИЧЕСКИЙ ИНСТИТУТ

КАРАЛЬНИК Б. В, ТИМОФЕЕВА Л. И

МПК / Метки

МПК: A61K 39/00

Метки: выявления, приготовления, реагента, рецепторов

Опубликовано: 23.09.1987

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-1218524-sposob-prigotovleniya-reagenta-dlya-vyyavleniya-receptorov.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ приготовления реагента для выявления рецепторов</a>

Похожие патенты