Состав для выявления сенсибилизации эритроцитов

(19) (1 507 К 39/00 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ 14,5-15, 2,10-2,2 та 3010,1 ниая й.е ИБобовая кислоОистиллироваводаСыворотка кроАВ (Е) группь 24 м Остальное до 1 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ(71) Научно-производственное обьединение Белорусского научно-исследовательского института переливания кровя(54)(57) СССТАВ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯСЕНСИБИЛИЗАЦИИ ЭРИТРОЦИТОВ с использованием высококоллоицной среды, о т л и ч а ю ц( и й с я тем, что,с целью повышения точности способа,в качестве коллоидной среды используют конглютинирующую смесь, .соцеркашуюфиколл, ИюСМ; цистиллированную воду,борную кислоту и сыворотку крови человека АВ (1 Ч) группы при следующемсоотношении ингредиентов, г:1 . 1080Изобретение относится к мецицине, а именно к иммуногематологии.Известны составы для выявления сенсибилизации эритроцитов с использованием высококоллоицных срец, включающих .растворы желатина, полиглюкина, альбуми-на, поливинилпирролидона С 1и Г 2 1,Однако известные составы не обеспечивают высокую точность выявления сенсибилизации эритроцитов. . 0Цель изобретения - повышение точно сти выявления сенсибилизании эритроци товаУказанная цель постигается тем, что в составе для вьпгвления сенсибилизации эритроцитов с использованием высококоллоицной срецы в качестве коллоицной срецы используют конглютинируюшую смесь соперкащую фиколл, М 1."9, борную кислоту, дистиллированную воцу и сыво вротку крови. человека АВ ( й) группы при следующем,соотношении ингредиентов у геФиколл . 14,5 "15,0Яс СЮ 2,10-2,25 25.Борная кислота ЗОБО,1Оистиллированнаявоца, 245 250 млСыворотка кровиАВ (1 Ч) группы Остальное до 1 лСыворотку крови человека группы . АВ (ф) получают из крови 8-10 цоноров, Конечная концентрация фиколла вконглютннируюшей смеси цолжна быть неболее 15 и не менее 14,5 г/%, Выборуказ анных концентраций обусловлен тем,35что при более высоком соцеркании фиколла в конглютинирующей сМеси (15,516 г/%) отмечается появление неспецифической агглютинации эритроцитов, апри концентрации фяколла ниже 14,5 г/%снижается чувствительность метоца. Время, необхоцимое цля приготовления конглютинирующей смеси, включая поцготовку исхоцных растввров, не превышает 1 ч.Порядок приготовления конглютинирук- щей смеси: готовится 250 мл 60%-ногораствора фиколла на 0,85%-ном,растворехлористого натрия; в него вносится 30 гборной кислоты и после ее растворенияцобавляется цо 1 л обшего обьема сыворотки крови АВ (Й.) группы.Применение указанной конглютинирующей смеси основывается на способностисенсибилизированных эрнтроцитов образовыаать агглютииаты в высокомолекулярных коплоицных срецах. В качестве коллоица раствора используют фиколл,высокопопимергое вещество, получаемое 710сополимеризацией сахарозы и эпихлоргип рина.Для выявления сенсибилмзации эритро- цитов с использованием прецлагаемой конглютинируюшей смеси на плоскость наносят оцну каплю этой смеси и в неедобавляют оцну каплю исслецуемых эриьроцитов. Для анализа может быть использованв свежая кровь, взятая из пальцаили из вены, или эритроциты 3 фракциикроен.из пробирки; Смесь тщательно пе-.ремешивают и, периодически покачиваяплоскость, выцерживают в течение 3 мин,после чего туца же вйосят четыре-цятькапель физиологического раствора хлориотого натрия, Затем пластину вновь интенсивно покачивают .еше 2 мян, .послечего учитывают реакцию. Образованиев капле агглютинатов эритроцитов(положительная проба) свнцетельствует о сенсибилизации послецних.П р и м е р . Исслецуют пробирку, .с кровью больного с циагнозом гемодитическая анемия неясной этиологии.На плоскость наносят оану каплюконглютинируюшей смеси и в нее ввоцятодну каплю исслецуемых эритроцитоввзятых из 3 фракции кровя после образования кровяного сгустка, тщательноОперемешивают и выцерживают при 18 Св течение 3 мин. По истечении этоговремени цобавляют четыре капли физиологического раствора хлористого натрия,вновь перемешивают круговыми покачиваниями пластины и через 2 мин учитывают результат. Проба оказалась по-ложительной - в капле отчетливо вицныагглютинаты эритроцигов, что свицетельствует об их сенсибилйзации. Аналогичные результаты получены при исслецованин этого образца крови в прямой пробе Кумбса,Наличие сенсибилизации эритроцитов 90 образцов крови опрецелено с по мощью прецлагаемой смеси и оааовре менно пробы Кумбса. Во всех случаях получено совпацение результатов: в 52спучаях -, положительных, в 32 - отрица тельных,30 образцов эритроиитов, выцеленньииз крови больных с анемиями разногогенеза, новорожценных с желтухой (подозрение на гемолитическую болезньноворожценных), и эритроцитов, сенсибилизированных антисыворо гкамн разной спе цифичкости, были проанализированы. иа наличие сенсибилизации параллельно с3 1050710 .использованием известных конглютини- ., рующей сМеси и в пробе Кумбса. Полуруюших сред, предлагаемой конглютини- ченные данные представлены в таблице.Н Проба Кум Предлагаемыйспособ Нет Проба с жеда- тиной 15. Не роба с полиглю 17 кином Проба с подивинилпирролндоном 1 т с албуми 17 Составйтедь Г. КрюкоРедактор Т. Мермелштейн Техред Ж,Кастелевич орректор 1 М. Шароши.М Заказ. 8523/7 . Тираж 713 ВНИИПИ Государственного комй по делам изобретений и отк 113035, Москва, Ж, Раушскаяодписн та СССРтий бд. 4/5 иал ППП Патент, г. УжгородЪ тная, 4 аНаличие сенсибилизации эритроци- .тов в результате присутствия белка наих поверхности оценивалось до даннымпробы Кумбса, положительная реакдияв которой свидетельствовала о сенсибиливадии эритроцитов.Как видно из приведенных данных,методы выявления сенсибилизацииэритроцитов с помо 1 цью коллоидныхрасъфф 35-воров желатина, полигдюкина, доливинилпирролидона, альбумииа менее чувствтельны и специфичны, чем проба Кумбса.Предлагаемая конглютинирующая смесь 1 обеспечивает получение результатов, по своей чувствительности и специфичности полностью идентичных пробе Кумбса.Таким образом,. использование предлагаемой конглютинирующей смеси для выявления сенсибилизации эритроцитов . увеличивает точность (чувствительность и специфичность) определения сенсибилизации эритроцитов с применением коллоидных сред почти в два раза, делая их тождественными получаемым в пробе Кумбса.