Способ окраски эритроцитов на гистологическом препарате

СОЮЗ СОВЕТСНИХцЫВлю 1 неснипРЕСПУБЛИН 09 01) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТЮ(56) 1. Лилли Р, Патогистологическая техника и практическая гистохимия. М., "Мир", 1973, с. 11.2. Сандуляк Л.И. Эритроциты как депо и система транспорта инсулина. Доклады Академии наук СССР, 1974, 219, 4, с. 1020-1022.(54)(57) СПОСОБ ОКРАСКИ ЭРИТРОЦИТОВ НА ГИСТОЛОГИЧЕСКОМ ПРЕПАРАТЕ, включающий обработку в фиксаторе, промывку и протраву с последующей зщэ С 01 Я 1/28 А 61 В 10/ОО докраской красителем, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью выявления инсулинотропных эритроцитов, фиксацию проводят в течение 15- 30 мин нри 60-65 С, причем в качестве фиксатора используют состав, содержащий бихромат калия, хромат калия и фосфат натрия однозамещенный при следующих соотношениях компонетов, мас. 7.:Бихромат калия 15,0-15,5Хромат калия 1,0-1,5фосфат натрия однозамещенный 1,5-1,6Вода Остальное а в качестве протравы используют 1 Х-ный раствор фосфорно-вольфрамата натрия.Изобретение относится к медицине, а именно к области цитохимических исспедований крови.Известен способ окраски эритроцитов, включающий их обработку в фиксаторе и докраску красителем Романовского-Гимза 1 .Однако данный способ не позволяет выявить инсулинотропные эритроциты.Наиболее близким к предлагаемому по технической сущности является способ окраски эритроцитов на гистологическом препарате, включающий обработку в фиксаторе, промывку и протраву в фосфорно-вольфрамовой кислоте с последующей докраской красителем 2 .Однако данный способ также не позволяет выявить инсулинотропные 10 20 эритроциты. Приготавливают мазок крови, просушивают на воздухе, после чего обра. батывают фиксатором, содержащим бихромат калия, хромат калия и фосфат натрия однозамещенный при следую 50 щих соотношениях компонентов, мас.%:Бихромат калия 15,0-15,5Хромат калия 1,0-1,5Фосфат натрия однозамещенный 1,5-1,6 55Вода ОстальноеФиксацию проводят в течение 15- 30 мин при 60-65 С. Целью изобретения является выявление инсулинотропных эритроцитов.Поставленная цель достигается тем, что согласно способу окраски эритроцитов на гистологическом препарате, включющему обработку в фиксаторе, промывку и протраву с последующей докраской красителем, фиксацию проводят в течение 15-30 мин при 60-65 С, причем в качестве фиксатора использу 30 ют состав, содержащий бихромат калия, хромат калия и фосфат натрия однозамещенный при следующих соотношениях компонентов, мас. %:Бихромат калия 15,0-15,5 З 5Хромат калия 1,0-1,5Фосфат натрия однозамещенный 1,5-1, 6Вода Остальное а в качестве протравы используют 17-ный раствор фосфорно-вольфрамата натрия.Способ осуществляют следукщим образом.После промывания в воде мазки об рабатывают 17-ным раствором фосфорно-вольфрамата натрия. После чего вторично промывают в воде, просушивают, докрашивают фуксином Пфейфера и исследуют под микроскопом.Инсулинотропные эритроциты имеют под микроскопом ярко-синюю окраску.При фиксации в течение меньше 15 мин или больше 30 мин и температуре ниже 60 С и выше 65 С эритроциты имеют либо слабую синюю окраску, либо не окрашиваются совсем.П р и м е р 1, Мазки крови просушивают и обрабатывают фиксатором, содержащим бихрсмат калия, хромат калия и фосфат натрия однозамещенный при следующих соотношениях компонентов, мас. 7.:Бихромат калия 15,0Хромат калия 1,0Фосфат натрия однозамещенный 1,5 Вода Остальное Фиксацию проводят в течение 15 мино,при 60 С. Мазки после промывания в воде обрабатывают 1%-Мым раствором фосфорно-вольфрамата натрия, после чего вторично промывают в воде, просушивают, докрашивают фуксином Пфейфера и исследуют под микроскопом.Инсулинотропные эритроциты имеют ярко-синюю окраску. П р и м е р 2. Мазки крови просушивают и обрабатывают в фиксаторе, содержащем бихромат калия, хромат калия и фосфат натрия однозамещенный при следующих соотношениях компонентов, мас7.:Бихромат калия 15,5Хромат калия 1,5 Фосфат натрия однозамещенныйВода 1,6Остальное Фиксацию проводят в течение 30 мин при 65 С. Мазки после промывания в воде обрабатывают 1%-ным раствором фосфорно-вольфрамата натрия. После чего вторично промывают в воде, просушивают, докрашивают фуксином Пфейфера и исследуют под микроскопом.Инсулинотропные эритроциты имеют ярко-синюю окраску.Предложенный способ позволяет выявить инсулинотропные эритроциты.1105468 Составитель Л,СтебаеваРедактор Л.Веселовская Техред Т.Маточка Корректор И.Эрдейи Заказ 5533/17 Тирак 464 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР е по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раущская наб., д. 4/5Филиал ППП "Патент", г.Уагород, ул.Проектная, 4 Кроме того, применение данного фиксатора позволяет сохранить структуруэритроцитов,Дацко способ нашел применение/в диагностике диабетических состояний у людей,