Штамм aspergillus niger iii, используемый для получения целлобиазы

Номер патента: 1721092

Опубликовано: 23.03.1992

Авторы: Аксенова, Иванов, Игнатова, Ковалева, Кожухарова, Плескач, Фель, Фирулина

МПК: C12P 21/08

Метки: активность, антитела, гибридных, гликопротеиду, головного, естественных, животных, киллеров, клеток, культивируемых, мusсulus, миелина, мозга, моноклонального, продуцент, угнетающего, человека, штамм

...гибридомной среды с удвоенным количеством ГАТ. Клоны гибридомных клеток появлялись на 5-7-е сутки после слия ния в 50-70 лунок. В эти сроки начинают .замену среды ГАТ. Тестирование наличия в среде МонАт к МАГ проводили иммуноферментным.методом через 12-18 сут после слияния. Идентифицированные клетки-про дуценты клонируют на питающих слоях макрофагов, культивируют ин.витро или замораживают жидким азотом в смеси 900 эмбриональной сыворотки и 10 ОМНО.Получение асцитной формы гибридомы.25, Мышам линии Ва 1 Ь/с вводят внутрибрюшинно по 0;5 мл пристана, Через 8-10 дней этим мышам внутрибрюшинно вводят культуру гибридомных клеток в растворе 0,14 М МаС 1 на 0,2 М фосфатном буфере рН .30 7,2 по 1 х 10 клеток на мышь. Через 7-8 суту мышей...

Номер патента: 1438241

Опубликовано: 20.03.1996

Авторы: Болдырева, Добрынин, Коробко, Кравченко, Недоспасов, Турецкая, Филиппов, Чувпило, Шахов, Шингарова

МПК: C12N 1/21, C12N 15/28

Метки: escherichia, бактерий, днк, кодирующая, некроза, опухоли, плазмидная, полипептид, полипептида, продуцент, рекомбинантная, ртnf, свойствами, фактора, человека, штамм

1. Рекомбинантная плазмидная ДНК pTNF 33, кодирующая полипептид со свойствами фактора некроза опухоли человека, с мол.м. 2,93 MD и размером 4,85 т. п.о., содержащаяPst I / Pvu II-фрагмент ДНК плазмиды pGA 23 с тандемом промоторов A2 и A3 ранней области бактериофага T7, с геном дигидрофолатредуктазы и частью гена -лактамазы размером 1,83 т.п.о.,Pst I /Xho I-фрагмент ДНК плазмиды pTNF 3 с геном хлорамфениколацетилтрансферазы, терминатором транскрипции фага l, частью гена -лактамазы и частью гена фактора некроза опухоли человека, кодирующего аминокислотную последовательность 4 (Ser)-157 (Leu) размером...

Номер патента: 1561510

Опубликовано: 30.07.1994

Авторы: Болдырева, Добрынин, Коробко, Недоспасов, Панина, Турецкая, Филиппов, Чумаков, Шахов

МПК: C12N 1/21, C12N 15/19, C12P 21/02

Метки: escherichia, бактерий, днк, используемая, кодирующая, конструирования, лимфотоксина, плазмидная, полипептид, рекомбинантная, свойствами, человека, штамм

1. Рекомбинантная плазмидная ДНК pLT 9, кодирующая полипептид со свойствами лимфотоксина человека, с мол.м. 2,64 мДа и размером 4,06 т.п.о., содержащаяHind III - Kpn I - фрагмент ДНК плазмиды p 6А23 с тандемом промоторов A2 и A3 ранней области бактериофага T7, геном -лактамазы и терминатором транскрипции фага лямбда размером 3, 4 т.п.о.;Kpn I - Hind III - фрагмент с синтетическим сайтом инициации трансляции и полусинтетическим геном лимфотоксина человека размером 0,64 т.п.о.;генетический маркер - ген -лактамазы, детерминирующий устойчивость клеток E.coli к пенициллиновым антибиотикам;

Номер патента: 1709731

Опубликовано: 30.07.1993

Авторы: Бумялис, Давыдов, Добрынин, Коробко, Филиппов, Чумаков, Шингарова, Янулайтис

МПК: C12N 15/12, C12N 15/77

Метки: escherichiacol, plt21, бактерий, днк, кодирующая, лимфотоксина, плазмидная, полипептид, полипептида, продуцент, рекомбинантная, свойствами, человека, штамм

...лимфотоксинэ человека . промывку смолы смесью тетрагидрофуранвплазмидой р Т 21 трансформируют момпв-пиридий- вода(5;3:2). После окончания синтентные клетки Е.со Ы 20050, . теза защитные группы удаляют последоеаПолученный таким образом цтамм тельной обработкой тиофенолятомЕ,со 3620050/р Т 21 характеризуетсяеле+ 55 триэтиламмония и конц, аммиаком. Придующими признаками. зтом происходит Отделение алигонуклеаотиМорфологические признаки, Клетки да от носителя. 5-Диметоксвтритильнуюмелкие, утолщенной палочковиднай формы, группу удаляют кислотной обработкой играмотрицательные. неспоронасныволигануклеотид бчищают электрофорозом в20% ПААГ, содержащем 7 М мочевину. Вы- Аликвоту реакционной смеси используют ход 1-5 о.е, для трансформации...

Номер патента: 1744107

Опубликовано: 30.06.1992

Авторы: Амбарцумян, Завольная, Казаков, Климович, Машуров, Морозова, Швецова

МПК: C12N 5/00

Метки: f-системы, антигена, антител, видов, гибридных, ему, животных, клеток, крупного, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, против, рогатого, родственных, скота, штамм, эритроцитарного

...и м е р 1. 1 млн клеток штамма после криоконсервации освобождают путем центрифугирования (1000 об/мин в течение 10 мин) от среды криоконсервации; пипеткой (1 мл) распределяют клетки по 200 тыс. в лунки (2 мл) 24-ячеечного планшета (Еочч) на среду ПС, кондиционированную предварительно посеянными макрофагами. План. шет помещают в атмосферу 95% воздуха и 5% СО 2 при абсолютной влажности и 37 С. Через 48 ч клетки из каждой лунки переносят во флаконы Карреля в 4 - 5 мл среды ПС, соблюдая при этом оптимальную посевную дозу 200 - 300 тыс,клеток в 1 мл. При достижении культуральной плотности 600-700 тыс, клеток/мл их рассеивают в свежую среду(ПС) во флаконы. В третьем пассаже ПС заменяют НПС или НПС с добавлением КС,Культуру пассируют до...