C12N 9/72 — урокиназа

Номер патента: 363917

Опубликовано: 01.01.1973

Авторы: Богомолова, Вител, Слобожанкина

МПК: C12N 9/72

Метки: препарата, содержащего, урокиназу

...щелочи до рН 8,0. После 4 - 5 час отстоя цри 4 С мочу отделяют от выпавшего осадка фильтрацией, Жидкость подкисляот Н, раствором соляной кислоты до рН 4,5 и замораживают цри температуре от - 18 до в 20 в течецие 18 - 20 час с последующим размораживацием при комнатной температуре и отделяют выделившийся осадок.Затем осадок суспецдируют в дистиллированной воде при рН 7,2 - 7,4 и к полученной суспецзии добавляют 100 г 40 "-ного водного раствора серцокцслого аммония (в расчете ца 1 л исходцой мочи), на котором происходит сорбировацце фермента.После 30 лин обработки цри энергичномвстряхивации смеси ее цецтрифугируют и цец трифугат отбрасывают.Осадок промывают водой под контролемхлористого бария. Затем активное цачало элюцруют 2,4-цым...

Номер патента: 927126

Опубликовано: 07.05.1982

Авторы: Джозеф, Маргрет, Мау-Юнг

МПК: C12N 9/72

Метки: урокиназы

...раз и определяют содержание ДНК и титры урокиназы как в примере 1. В данном примере консервирующее вещество состоит из 13,75 г/л среды гидролизата лактальбумина, 2,2 г/л йаНСОи 0,1 вес.Ф Д-глюкозы, Аминокислоту и/или человеческий сыворотоцный альбумин (ЧСА) добавляют в основное консервирующее вещество для получения желательной конечной концентрации (в вес.4),и е аюТитры урокиназы1 1 Общее количество ДНКф, (мкг) Добавки 6 1 3 6 3 1 285 8 13,5 7,4 4,8 298,5 22,4 11)9 11,7 3083 26,3 24,8 17,0 264,0Без добавки0,1 Ж ЧСА0,1 Ж ЧСА + 0,3 глицин0,1 Ж ЧСА + 0,5 Ж глицин 3 92712ка, альбумин человеческой сыворотки,глюкозу и бикарбонат натрия. Кромегидролизата белка молока, можнотакже использовать и другие белковыегидролизаты, такие как триптол,...

Номер патента: 1022988

Опубликовано: 15.06.1983

Авторы: Максименко, Смирнов, Торчилин, Чазов

МПК: A61K 38/49, C12N 11/10, C12N 9/72 ...

Метки: активностью, обладающая, стабилизированная, тромболитической, урокиназа

...ведут 16 ч, после чего полученное производное урокиназы отделяют от других веществ с .помощью гель-хроматографического метода, .Полученный продукт представляет собой урокиназу, химически связанную с синтетическим полимерным носителем. Продукт палностью сохраняет биологическую активность по высоко-. молекулярным субстратам (например, плазминоген), не теряет каталитической активности при хранении в холодильнике (4-5 С) в растворимом виде в течение трех месяцев (в отличке от растворов нативного фермента), обладает повышенной термостабильностью и пролонгированной тромболитической активностью.Синтез водорастворимого полимерного носителя осуществляют известным способом - радикальной сополнмеркзацией моиомеров в присутствии персульфата...

Номер патента: 1037683

Опубликовано: 15.04.1985

Авторы: Арабидзе, Кухарчук, Лещинский, Максименко, Медведев, Смирнов, Торчилин

МПК: A61K 38/49, C12N 9/72, C12N 9/96 ...

Метки: модифицированной, урокиназы

...Фатом буфера, рН.9,0 при 25 С в те"чение 5; Остаточная каталитическая.активность фермента 872. При этомконцентрация связанного с белкомнитропруссида натрия 1. 10 ф М.Свойства урокиназы близки тем, что .приведены в примере 1,Содержание белка в препарате74 Х. П р и м е р 3. Процесс лрово- .40дят также, как и в .примере 1, эаисключением того, что,реакцию моди фикации урокиназы нитропруссидомнатрия ведут в 0,3 М растворе фос-.45Фатного буфера.рН 8,3 при ОС .втечение 0,1 ч. Остаточная каталитическая активность фермента 90 Х.При этом с ферментом связывается7 ф 10 И нитропруссида натрия, а5Эсвойства урокиназы близки тем .котоф рые указаны в нримере 1.Содержание белка в.препарате 8 ОХ,При этом модификацйя урокиназынитропруссидам натрия не...

Номер патента: 1128601

Опубликовано: 15.07.1985

Авторы: Максименко, Смирнов, Тищенко, Торчилин, Чазов

МПК: A61K 38/49, C12N 11/00, C12N 9/72 ...

Метки: иммобилизированная, урокиназа, фибриногене

...Ферментас полимерной матрицей фибриноге нанаряду с т ем, что позволяет глоб улеФермента сохранять определенную подвижнос т ь ( изменения КК хат ) впридает получаемому препарату биокатализатора повьппенную стабильность, очем говорят данные табл. 2,Определение остаточной каталитической активности проводили нарН-стате по гидролизу 1 О М раствора АС 1 Ме в 0,1 М КС 1 при рН 7,5 икомнатной температуре.Экспериментальное определениетромболитической активности препаратов нативной и модифицированнойурокинаэы быпо выполнено согласноизвестной методике 5, с добавлением в омывающий раствор 0,33 мг/млплаэминогена человека. К 0,5 млраствора (10 мг/мл) фибриногенаприливают 0,2 мл раствора (4 мг/мл)тромбииа и выдерживают эту смесь 1 чпри комнатной...

Номер патента: 1137760

Опубликовано: 07.09.1985

Авторы: Максименко, Смирнов, Тищенко, Торфилин

МПК: A61K 38/49, C12N 11/00, C12N 9/72 ...

Метки: гепарине, иммобилизованная, урокиназа

...мг 1-этил-(3-диметиламинопропил) карбодиимида и смесь инкубируют при перемешивании в течение 30.мин, Затем к инкубационной смеси добавляют 1 мп раствора урокиназы 50,000 10/мл и инкубацию продолжают при 4 С в течеиие 16 ч. После этого раствор диализуют против дистиллированной воды ,в течение б,ч и лиофилизируют, В ре 1137760Продукты примеров 1-4 осуществляют катализ этой реакции по той жесхеме. При этом модификация урокиназы гепарином существенно не меняеткинетические свойства урокиназы.В табл. 1 приведены кинетическиепараметры реакции гидролиза метилового эфира ацетилглициллизина нативной и модифицированной урокиназойпри 25 С 0,1 М КС 8 и рН 7,8 (оптимумэстеразной активности).Таким образом, каталитическиесвойства модифицированной...

Номер патента: 1325076

Опубликовано: 23.07.1987

Авторы: Афанасенко, Зиновьева, Красильников, Пичугин

МПК: C12N 9/72

Метки: биологических, выделения, жидкостей, урокиназы

...колонку пропускают47-ный водный раствор аммиака. Навыходе аммиака иэ колонки собираютфракцию объемом 4 мл, содержащуюконцентрированную и очищенную урокиназу. Активность фракции 250 СТА/мл,содержание белка 0,25 мг/мл. Выходурокинаэы 807, удельная активностьпрепарата 5000 СТА/мг,П р и м е р 5. Выделение урокиназы проводят согласно примеру 4. Для отмывки колонки используют 0,05М трис-НС 1 буфер, рН 8,0. Элюцию урокинаэы проводят 27-ным водным раствором аммиака. Выход урокиназы 857 удельная активность препарата 4500 СТА/мг,П р и и е р б. Культуральную жидкость объемом 1 л и активностью 20 СТА/мл пропускают через колонку 1,510 см, заполненную макропористым стеклом МПС в 2500 вХ, в течение 4 ч, Затем колонку промывают 0,2 М трис1325076...

Номер патента: 1692151

Опубликовано: 27.10.1995

Авторы: Белогуров, Бибилашвили, Горюнова, Дельвер, Домкин, Ефимова, Рыбалкин, Савочкина, Сидоров, Скамров, Ченчик, Шевелев, Южаков

МПК: C12N 15/52, C12N 15/81, C12N 9/72 ...

Метки: escherichia, активатор, активатора, бактерий, днк, кодирующая, конструирования, плазмидная, плазминогена, продуцент, рuавс, рекомбинантная, типа, урокиназного, штамм

1. Рекомбинантная плазмидная ДНК рUАВС, кодирующая активатор плазминогена урокиназного типа размером 4,11 тпо, содержащая: Xba I Bgl I фрагмент ДНК вектора рUС19 размером 1,39 тпо; Bgl I Pst I фрагмент ДНК вектора рUС18 размером 1,28 тпо; Pst I Xba I фрагмент кДНК урокиназы человека размером 1,44 тпо; по три сайта рестрикции Асе I, Pst I; по два сайта рестрикции Bgl I, Hind III, EcoR I; по одному сайту рестрикции BamH I, Xba I; участок инициации репликации и промоторно-операторную область lac-оперона; генетические маркеры; Amp ген устойчивости к ампициллину.2. Способ конструирования рекомбинантной плазмидной ДНК рUАВС, заключающийся в том, что ЕсоR I Pst I фрагмент кДНК урокиназы человека размером 0,60 тпо, полученный в результате...