Способ получения противоопухолевого средства

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНИХРЕСПУБЛИК АЗ 15 И 4 А 6 фЮ :1 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИН ПАТЕНТУ Т 1%ИЬЬд уют штаммь: Ргойпш К, Ргоргоп 1 иш Кили Ргоез АТСС 6919, куль ят при 34-39 С в аназробных услоентрифугированиемсуспендируют в чищают, отделяют продуцента исполь р 1 оп 1 ЬасСегпип ач Ьасгегхщп дгапи 1 о р 1 опдЬасгегдцтп ас тивирование прово течение 48-100 ч виях, отделенную биомассу промываю фосфатном буфере, о етки цент Иращи- в угированием ьные лед отую суспен ифугируют фосфатном ентрифуги ее отделяют, получ ию себу- о леточных стенок цен ент суспендируют е, очищают, затем едимент лиофилизи ер сю ОСУДАРСТНЕННЫИ КОМИТЕТ СССРО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ(54)(57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОТВООПУХОЛЕВОГО СРЕДСТВА путем вьвания микроорганизма-продуцентпитательной среде с последующимделением биомассы и выделениемвого продукта, . о т л и ч а ю щс я тем, что, с целью снюкенибочных действий, проявляющихсяхимио- и радиотерапии, в качес лиофилизируют, или после промыв биомассу дезинтегрируют в мельн с помощью стеклянных шариков, пИзобретение относится к метти 1 ци 11 е, а име 1 п 1 О к фармацевтической про 1 пппЛЕН 11 ат Тн.11 ельто изобретения является снижение пабочкых действий, гроя 11 ляющихся при химио- и радиотерапии.Способ осуществляют следующим об -Разом,П р и 1; е р 1, Получение клеточных стенок,.Жидкостное выращивание соответствующей прапионовой палочки осуществляют в 1-литровой колбе Эрленмейераопри 37 С в анаэробных условиях,Пл 11 массового выращивания среду а 11 Р 111 с 11, тр -ду 711 1 СО икфицт ртуют гус тай взвесью пропиопавых палочек, Инц 1 ициру 1 ощую взвесь готовят путем растирания трехдневной А-агар-культурь 1 проиаковой палочки в 10 мл бульона. После культивирования в течение 72 чклетки Отделяют От жидкости путем центрифутиравания нри 10000 д в те-. чение 20 мин в центрифуге с охлаждеием Ссадак промывают трикры дистил-. лировттк 11 ой водой и затем смешивают с двай 111,1 м оаъемам стРк.1 янных п 1 арикав диаметром О,7-0,18 мм и измельчают в клеточной мельнице в течет:ие 1 р 5 ч . НОС:1 е микраскапичРскага контрол стеклянные шарики отделяют отгомоспзата с памощь 1 о С - 1 стеклят 1.:1 О-.го Филт.тра с помощью фосфатпога буфе-.;: /1."1 м ма ПРО. 2 н.О) и 11/15 м1 С 11 О;, ): Яолоч 11 у 1 о суспензию 1,садержащу 1 о клеточные стенки и цитат 1 лаз 1:у) ценгРифугируот в течениР 20 мин при -10000.,осадок Растворяют в фосфатн 1111 буРре(Р)1э 21Автс:1 Н 11.ческие Фермепть. Инактивируют в течение 10 мин кипячением на водяной бане,Клетачнь 1 е стенки очища;от путем инкубаии при 7 С в течение 24 ч с псмошью трипсиа (0,5 мг/мл суспензии) и 1 мл талуола на 100 мл суспезии для редотвращения роста бактерий.Очип 1 енн 11 е пу. ем трипсигп 1 о го перевариьания клеточные стенки центрифугируют при 40000 8 в течение 30 мин и прамыва 1 от 3 раза дистиллиРОванной водой. затем высушивают вымараживанием.+/А-бульон, г:Басо Сая 1 отпБас"а уеая экстракт КН 2 РО, 4.1880, 7 Н, О 11 ЛЮКОЗаДистиллирс ваная вода Да 1000 млРН 7,2"2 Н 0 и 1/15 11 КН РО 1 Растворяют каждый в 1000 мл дистиллированной воды,612 г раствора вторичного фосфатанатрия смешивают с 388 г растворапервичного Фосфата калия и устанавливают РН 7.2,П р и м е р 2, При.готовление суспензий Р. асгея (штамм АТСС 6919),Р, ОЯО 1 цп 1 (штамм 0575, КР) и Р. 8 гапц 1 ояцтп (штамм КР 45).Лиофилизирсвакные по примеру 1пропионовые палочки указанного видасуспендируют в буферираванком фасфатным буфером рас.творе поваренной солиуказанного вива в канпентрации 5,0или 7,5 мг/мл 1 случепная суспензияпригодна в основном для интраперито 25неальной инъекции,П Р и м е р 3 Согласно примеру2 готовят вводимые путем интраперитакеальной иньекции суспензии штаммаР. гапц 1 ояцтп (КР 45, 95 К), штаммаР, аспея (АТСС 6919) и штамма Р, апз. -о)цш (057.5, К 01 лз лиофилизированного материала с концентрацией 5 или7,5 мг/мл кле гачного материала. 35Г р и м е р 4, Приготовление вводимых икъекций суспензий для дополнительного лечения 1,обработки) при химиотерапии,Ц)тамм Р, р апцТаяцп 1 (КР 45) готовят согласна поимер1, Приготавливают суст 1 ензито 30 мг клеточного материала в 100 мл раствора цля внутривенНОГО ВВЕДЕНИЯ.Исследования ин вива,1, Гемопаэз (краветварение) уобработанных прапионавыми палочкамимышей после летальнага облучения,Три штамма пропиановых палочек(Р аспея, Р. 1.гапц).ояцтп, Р. ОП 1.О 1 цтп)в дозе 1,5 мг на мьш 1 ь вводили путемин.раперитонеалькай инъекции летально облученным мышам (850 Р). Приэтом получили что Р. 8 гапц 1 ояцтпбольше всего удлиняет время переживания облученных мьппей,Используют взрослых самцов мышейштамма 8111.яя в возрасте 8 недель,."животных кормят по стакдартной диете,Воды дают вдоволь Боцу и корм сте 1304736Исследование экзогенных селезеночных колоний,За 3,2 или 1 день до трансплантации костного мозга мышам-донорам вводят путем инъекции 1,5 мг Р, Вгапц 1 ояцш. Готовят суспензию клеток костного мозга путем промывки обеих бедренных костей стерильной Раг 1 егсредой. Клетки подсчитывают в гемоцитометре, 5 10 способных размножаться клеток в 0,2 мл Рагег-среды вводят путем инъекции в хвостовую вену каждой мьппи. Мышей за 4 ч до трансплантации костного мозга облучают 850 Р, Контрольным мьппам вводят путем инъекции 0,2 мл среды илия5 10 клеток костного мозга нормальных мышей (не обработанных Р, сгапц 1 ояцш). Другой группе мышей-доно ров вводят как указано выше Р. егапц 1 ояцтп, затем животных анестезируют эфиром, из ретробульбарного сплетения берут кровь, Клетки крови подсчитывают в гемоцитометре и аликвотные части крови с 5 10 нуклеированных клеток вводят путем инъекции в хвостовую вену облученных дозой 850 Р мышей, Контрольные мьппи получают такой же объем крови, который взят у нормальных мышей (не обработанных Р. цгапц 1 ояцп 1), Всех мьппей умерщвляют спустя 9 дней после трансплантации крови или костного мозга и взвешивают, вынимают селезенку, снова взвешивают и определяют число колоний на селезенку после фиксации в смеси хлороформ - этанол 1:335 рилизуют. Вода содержит окситетрациклин (1 г иа 1000 мл),Ышей облучают во вращающейся метакрилатной клетке по 10 мьппей ка клеку при удалении на 50 см от ТСХ 250 - Мейсог-единицы, которая работает при 200 кВ и снабжена 0,5 мм Сц-фильтром, 650 или 850 Р, Скорость облучения " 75 Р/мин определяется СТтермолюминесцектного К-дозиметром. 1 ОДля экспериментов применяют штамм Р. оспея (АТСС 6919), штамм Р. Оп 1 о 1 цп 1 (0575, КР 40) и штамм Р, Вгапц 1 ояцп 1 (КР 45) в форме умерщвлеккых целых клеток и в форме клеточных сте нок. Лиофилизированные пропионовые палочки суспендируют в фосфатбуферном растворе поваренной соли концентрацией 7,5 мг/мл и вводят путем инъекции 0,2 мл суспензии интраперитоне ально (1,5 мг на мышь).1 сс 1 едов 11 ие 1,1 р 1 е 11111 х с е.1 с з е ночных копоний,За 3,2, 1 или Р;и 1 си до об;1 учекия дозой 650 Р мьппам иктрапсрито 11 еал 1.11 с вводят путем инъекции Р, 1,гапи 1 ояцп 1. Контро 1 ьные м 1 пп 11 получают тако же объем РВВ (б,феррогдкый фосф;тсм раствор оварекиой соли). Спустя 9 дней после Облучения животных умер 1 пвляют и вынимают селезенку,взвешивают и подсчитывают колонии,как и в случае предыдущего теста,для оределекия экзогекных селезеночных колоний,Тест на выжива 11 ие.Мьппей разделяют к 11 7 1 ру, ричсм распределяют по 15 млппей а групу и облучают дозой 850 Р. Спустя 4 ч после облучения животным вводят путем инъекции клеточ 1 ые стенки прои 1 оковых палочек или целые клетки. Контрольные мыши полчают такой же Объем РВВ, Количество ереживгп 1 х животных в каждой группе подсч;1 тывают 1 а О-й день после облучеия,Все три штамма ропиоковых пц 1 очек приводят по срагкекию с котропьными животными к промежутков яцш в форме и в форме п репарата из к:1 еточных стее чем Р. асгея и Р, а 1 о -Относительный ьес селезенки Облученкых мышей увеличивастся только тогда, когга Р, егапц 1 ояпгп вводят за 1 день или спустя а ч после обучения дозой 650 Р,Число экзогеных селезекочных ко - лоний значительно ; величиьается случае всех обработок.В табл, 2 показано действие Р. 8 гапц 1 ояцп 1 нг образование экзогенных селезекочкых колоний (штамм Не установлено различия в относительном Весе селезенки между мышами которым трансплантируют нормальный костный мозг и которым траксплантируют костный мозг обработанных Р.егапц 1 ояцп 1 за 2,3 или 1 день до трансплантации животны;х-ОноррвОбработка приводит к значитет 1 ьному снижению количества экзогенных ок активне1 цп 1 .В табл.пц 1 ояц 1 п наколонии (шт значи; сль 11 ому удлинениюпереживания. Р, гапц 1 опреп;.рата из целых клеток 1 ЛОказапо в.1 ияние Р, дга Э 1;ПОГСКИЫС СЕЛСЗЕИОЧИЫСамм ЕР 45),.ПЕМ ПОСЛЕ ТГ Д 1 тс 1);); сдмцон СР "-ьшей. и:.Нс 105 мьппей разно 15 мьгшей на экспериментальных 8, 12 и б пухолевых клеток)у тем рсви,20 пстд. ьКОЛОНИЙ Б С 3 уЧдг СбутЕ 11 я жИБГ)ТНЬ"Хдозой 850 Р По СЭдвнентЮ С жИВОГНЬ:МИкоторым бпп введен костный мозг необработанных хсивотьх-донор)ГНьгкт,ия крови мьппей, которые сб,эабс Гд: ыР, Гд 1 ц.стцГп, летдл 1 НО подопытным жт -Бстттым ЭИБОИТ К ЗНДЧИТЕЛЬСМ 7 Утве"личснию от:осительного веса селезенк .и числа селезеночных колоний по сравнению с инъекцией крови из еобработдных животных-доноров (см табл,.З)11 диболее активной при стимуляции образования селезенсчных колоний является к 13 ОВь кстОрую стОир 1 От у мь 1- ШЕИ - ттстОЭОБ ,;ОТООЫМ - ,д 2 ИЗи 3 ттня ао 1)ГНСЬГаНТДЦИ КРОВИ БВО,ЯТ ип ец",1 п.т т;Гдпц 1 ся;тп ,1 ек)НБ БСГ Ч;1.: Р) Г 1:СГЛДХТИРсваинЭй пос е обпэдботки Р, 1 твдпц.оя),п2 рт 1 и 1 дент до Взятия т;р,)п)и Бьппается,1 КИННОЬ Р, я -; - ;Пц) Ояцтп р ПЕя Р, дттГО 1 цЛ Прн ЭКСПЕрИМЕН ной спчхоГи:11)т 1.пе 8)дгсогпд -80. ривс)дит к р;.;итю опухоли спус Гя римерно Чдней, Гыст 1 эый рг;1 о;уколи происхо; пт ме;-.;Ду ; - м и 1-м 3 етдльный эффект н;: 20-м и 28-м; нем5)спользовгно 225 1 т; тесте пс пг )гжиБ ЦСЛ 5 К)Т НД 7 1)Утп ( 1 ру 3 Гу) и жи 1" .Отным г:упп 1-т 7 Т в дни О, пг с.пе имплантации с Бт:ОДЯТ ПУТЕМ ИНЪЕКБИИ ПЭОПИОНОВЫЕ Палочки. Вводят путе инъекции Р,тгапт 1 сяцп, Р, дт,.о 1 цг или Р, аспеятрапергггснедльно (3 группы) илиБУГРИОПУХОЛЕБО т т РУППЫ) В ДОЗЕМг 7 мьпп . 1(с нтр ось нье мьши получают интрд.перитснедльные и:1 и Внутриспухо левые инъекции РВБ. Число переживших животных псдсч.иывдют на 1 б-й, 20-й ДС)Ь т;ССГЕ ИМГ 3 гтДТДЦИ 1 СПУХСЛЕВЫХ клеток и зятем каждый второй день Вплоть до т)5- го дня после имплантации, Оставшихся 120 животных разделяют пд 8 гругп и мышам эк периментальных грулп (1-1 Ч) и контрольных групп тт 1 Г И т, )Г . БОГ т, УЗ И . Е И - ПР пионовые палочки РВБ..1 а 20-й день .осле имплантации опухслевых клсток эсен мьшей умерщС: СЕКДЮТ И БЗВЕптнваЮТ.Среднее арифметическое и стандартныеотк.онения определяют для каждой3 ОЧЕК Г ЫЗЬ;Вдет ттЛи.-ЕНИЕ;тЕЭ ЕХСИБдгп 1 я мышей с сдркомой.11 сследуемыс пропионотзые палочкиД 313 экспериметов используют штамм 1 э Гс-ГО 3 Ьдс ЕГ ьлт ггапт 1 ояцп (1:Р ч 5), Шдмк Р О)13 ОП. 1 Эдс 1 ЕГЪ.т.ГП дспгя (П.1.с б--, ) и дмм РгорОт 1 Бд гецщ сэ ьт.) - .1 ь)п 0575 1(Р 710, УкдзднГГые прописнспье ПаЛОЧКИ ПХОфИ 3 ЗРУтЮТ И СУСПЕНДБРУот в фосфдбуферирсвдтном растворе повдРЕННСй СОЛИ В КОНтЕНТРаЦИИ " МГ 7 Мт 1, 0 2 мл сттс ензии Вводят инГг дГ 1 е)эипО - неапьно или Бнутриспухолево пораженным мышам.Р 1 спсльзую Бз 1)сслых самцов СР 1 т- мьппей, Опухоли индуцируют, вскрывают у мышей-доноров, опухолевую ткань разрубают, трипсинизируют (0,253 трипсина, 15 мин при 37 С) и фильтруют. Число клеток подсгчитывдот и устанавливают на 1 мл раствора по 8Вдренной соли дс 10 способных размножаться клеток 0.,1 мл. Зту суспекзию Вводят псдксжно путем и 1:ьекции внутрилопдточно, Зтот способ работь гэуппы, и все опухоли экспериментальных групп, которые лежат более, чем на . стандартных отклонения нижесреднего контрольного значения, оценивают как регресс Вные, Результаты11 Д 3 ИЗ ИРУ)Ю 1" С Тс ТИЧЕСКИ НУТЕм .:-теста (опухслевая масса) или С 1 э.- ОцдГ 1 гаг-андляза с ломэцью Яа:ея-коррекций (регрессия опухолей и переживание мышей). Результаты представлены в табл. 4,В табл, 5 показано Влияние прописновых палочек на рост и регрессиюдЭКОМЫ 1 80 у С 1 г 111 МЬППИ,1 ри интраперитонедльном введенииБ разовой дозе 1 мгмышь в случаетрех испытанных ытаммов пропионовых палочек получается значительное увеЛГчение селезенки нд А-й день после инъекции с Дальнейпп 1 м увеличением массы селезенки на т-Й день.Зто увеличение селезенки отражае. стимуляцию ретикулезной системы и СБИДЕТЕЛЬСТГтУЕТ С ГРОтИВООПУХОЛЕ 130473650 вой активности этих иммуносткмуляторов.Р. ягапц 1 ояцш ведет к регрессии более чем 707 в случае исследованных опухолей саркома, когда он вводится внутриопухолево.Ин вива цитостатическая активность в случае Мцгтпе опухолевых клеток благодаря Р, егапц 1 ояцш.Изучают цитостатическое действие штамма РгортоптЬасгегтцш 8 гапц 1 ояцш КР 45 в случае саркомы 1,-1 у ВАЕ В/с-мышей (легкие).Отмечается значительная активность по сравнению с необработанными животными.Антибактериальное действие как дополнительная обработка при химиотерапии первичной или вторичной опухоли легких,Выбирают 30 пациентов с первичными или вторичными метастатическимк опухолями легких. 10 пациентов путем внутривенного вливания получают 30 мг Р. егапц 1 ояцш в 100 мл раствора для внутривенного введения. Другие 20 пациентов являются контрольными.Всех пациентов лечат химиотерапевтически для синхронизации пролиферации неопластических клеток. Каждый курс длится 3 дня, 1-й день: винкрустин 1,5 мг внутривенно в 8 ч и в 20 ч; 2-й день; метотрексат 25 мг внутримьппечно в 20 ч; 3-й день; метотрексат 25 мг внутримышечно в 8 ч, также осуществляли введение метотрексата внутривенно до 25 мг в 14 ч и вливание 30 мг/кг циклофосфамида в то же самое время, Это химиотерапевтическое лечение осуществляют трижды 21 день.Общая химиотерапия состоит из трех вьппеуказанных циклов, которые начинают на 1-й, 22-й и 43-й день,Во время З-го, 10-го, 31-го и 52-го дня наблюдения вводят Р, гапц 1 ояцш в дозе 30 мг/100 мл раствора для внутривенного введения в течение 15 мин (в последний день первого химиотерапевтического цикла и затем спустя 1 неделю по окончании каждого цикла). 10 15 20 25 30 35 40 45 В случас обработанных толе ко хи - миотерапевтически пациентов обнаружено 5 случаев бактериальной инфекции три пневмонии, один сепсис ислучай ангины в течение б 0-дневнога времени наблюдения, в та время как в случае 10 обработанных с комощью химиотерапкк и внутривенныхвведений (вливаник) Р. 8 гапц 1 ояцтппациентов не обнаружено никаких симптомов бактериальной инфекции,Толерантность пациентов па отношению к внутривенным вливаниямР. 8 гапц 1 ояцпт штамма КР 45 хорошая.Во время вливания в количестве 30 мгР, пгапц 1 ояцтп наступают ощущения холода и затем повьппение температурыдо 39 С (2 - 12 часов спустя послеовливания), которые на следукнпий деньисчезают,Повторные вливания Р. 8 гапп 1 ояцшне приводят к развитию замедленнойгиперпавышенной чувствительности втечение бО-дневнога наблю-ения. Внутривенное влттванке 30-240 мг Р. 8 гапц 1 ояцш - штамма КР 45 можно осуществлять без ркска навык побочных действий или осложнений у пациентов,Общая кнструкция для локальноговведения (рак желудка и кишечника)10 мг лиофилизкрованнаго продуктасуспендируют в 1 мг 1/-нота раствораксилокаина в растворе поваренной солии вводят путем внутриопухолевой инъекцик через кожу (диаметр 1 мм), причем применяется длкнай 80 см жесткийполиэтиленовый отвод с прочно расположенной внутртьпштечнай ктлой (18Ьацде) без эпифиза, Отвод через биоптический канал вводят в эндоскап(гастрофибраскоп или коланоскоп),причем пунктируют (прокалывают) находящуюся под визуальным контролемнеопластическую опухоль и иглу вводят на 0,5-1 см в опухолевую ткань.Продукт вводят путем инъекции черезотвод и промывают 1-2 мл 17-нагоксилокаина в растворе поваренной соли.Внутриопухолевые инъекции 10 мгпродукта делают в течение первыхтрех дней, затем на 10-й и 17-йдень наблюдения.1304736 О Т а б,1 и1(Ол и 51 естВ О э нд 0 Ге 11 ных с ел 0 з Рноч Р ых к 0110 ни 11 у мышей 5 кото 511 е Об раб 0 тн н ь 1 ГОО ОГ ьЬас сет 1 нш ЯГ 11 пн 10 ЯНР штамь 1 КР 15 (среднее значение станарт нсс О Т КЛ С Н Е 11 И Е ,1Отнс 1 си тел ьный несС.ЕЛЕЗЕНК 1 Число эндогенныхКОЛОНИЙ СЕЛЕЗЕНКИ 1 аммIГн, с. я: 11:10 с;,те Обльченин 25 0,38 14, рс 050 Таблица1;Олн 1 естяо зкзогенных колоний после трансфуэии костноГО мОзга От обработаннь 1 х5, вга 1.Гок ка - штамм КР 45 мьш:ей (среднее значение + стандартное отклонение) СР 551-8 на 1 ООтносительный Число экаогенных колоний 11 уклеиров ыных клеток вес селезенки костного мозга 1512 . 0,32 О 99 О 1 с 2 О,4 + 1552 + 0531 ГО с .: нын мо зг но о:1 альньх; 1 ыпеи 1 ОЗ,О + 18,7 1,51 + 0549 1156 + 4,4116,0 + 4452 Кост 51 ь 1 й ,оэг мьп 1 ей 1., котооый ва 1 день до тоаь 5 сфузии были Обоа 107 О + 4 1 1,69027 э О Р, 8 гапц 10 ьцп 1 эа 3 дня до облучения 1(ос ный мозг мыыей которые зад 5 гя дс трансФуаии бьли обработаны Р. ргапо 1 аацш к 1 ст 11 ый ь,о г мьш 1 ей 5 которь 1 е Оы5, п.т 5,. Обааботаиь 1 Р,ГНГ 1 О. и 5, ВВсз". Дал ле тРЯНС 1 аУЗИЕ 1530,21304736 12 Таблица 3 Число экзогенных селезеночных колоний после трансфуэни крови от обработанныхР. 8 гапц 1 овцш - штамм КР 45 мышей (среднее значение + стандартные отклонения) СГ И-Б 6 иа ОТрансфуэия нуклеированных Эю 8 1 гюг 1 117+0128 1,4 + 0,23 6480 Кровь нормальных мышей Кровь мышей, которые эа Э днядо трансфузии обработаныР. 8 гапц 1 озцш 9,6 + 1,4 Ф1,84+0,31 2,62 + 0,88 9960 Кровь мышей, которые эа 2 днядо трансфуэии обработаныР. 8 гапц 1 овцш 0,2 + 2,6 2,010,34 3,45 + 1,8 о 20 Кровь мышей, которые заденьдо трансфузии обработаныР. 8 гапц 1 овцш фФ1,54+0,23 с7,4 + 1,6 3,23 + 1,48 9650 Таблица 4Переживание пораженных саркомойСРМ-мышей при обработке пропионовыми палочками( мгмьппь) на О-й, 4-й, 8-й, 2-й и 16-й день после имплантации опухолевых клеток День после имплантации опухолевых клетокГ 1 Т т Введение 28 30 32 34 36 38 40 42 44 15 13 1 О 7 Э 0 Интрапернтонеально Р. аспез 15 15 15 15 12 12 1 О 9 9 7 6 5 Э Э Интраперитонеально Р. ачдо 1 цш 15 15 15 15 15 14 12 8 8 8 5 , 5 2 1 15 15 15 14 14 13 11 10 8 5 4 4 0 ВнутриопухолевоР. аспев 15 15 15 15 15 15 13 12 1 9 7 7 6 Э ВнутриолухолевоР. ач 1 о 1 цш 15 5 15 15 15 14. 12 11 9 7 7 7 5 2 5 15 15 15 15 15 14 13 10 8 8 6 4 3 Внутриопухолево фр с 0,01 -р с 0,05 КонтрольР. 8 гапц 1 овцш Интраперитонеально Р, 8 гапц 1 овцш Лейкоцитов втрансфундированной крови Относительный вес селезенки Число экэогенных селеэеночныхколоний клетоккостногомозга1304736 1Таблица Масса опухоли и число регредироваш 1 ых опухолей в случаепораженных саркомоймьш 1 ейкоторые были обработань 1пропионовыми палочками (м /1 ыпь) на О-й, 4-й, 8-й,12-й и 16-й день после имплантации опухолевых клеток Инраперитонеале на.я инъекция Ян 7 трио 11 ухолевая инъекция г ПроцентЧислорегреМасса Чи сл о 1 Цт амм опухоли грегрессии 2631 321 О/15 263+ 32 0 Г) 0 Контро 1 ь Ргор 1 от.ьЬасге 11 ьцт гап 11оял 5:1,3 538 ф 212 11/15 842=312 8/15 73,3 Ртор 1.о 1: 1.1-:.с оег цл 1 4).0 842+246 10/5 032381 6/15 66,6 ОГ 5 О 1 Ц.:.: Р 11 ор 1. о 111)о 11 с Ге 1 цтпасцез 33,3 731+ 218 9/5 1; 2 Г -2 =,5 60,0 Составитель Е, ЯрныхРедактор А,:ежнина ехред В,Кадар Корректор М. Самборская Заказ 1325/58 Тираж 596 ПодписнодВН 1 КПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж,. Р 11 уц 1 ская наб д, 4/5 Производственно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул, Проектная, 4 дированный опухолей ПроцентРЕ 1 тРЕСсии