Антидот для гидробионтов

С 1), Л 01 Г 61/00 к рыбоводи и может сстановлех гидробиондами, в част- в для рыб ракообразные,яется повыдотного рейто шение ствия.П р ний) и живают рацией кпобразных (даФатидиун) выдерроФоса концентер 1.Р тейших (с оты, ян- концентреэацин токреэоклая сольормулы ГОСУЛАРСТРРц 1,Д ррц 1 тгт Г 10 КЛЕВРЕТЕ";.4 И ОТНЫ 7 ИЯМ ПРИ ГЕНТ Сл СР(71) Азовский научно-исслеровательски., институт рыбного хозяйства (72) В.М.Рьяков Е,М.Рейхи )л.В.Жаров(56) Авторское свидетельство СССР Н 1099423, кл. А 01 1 У, 61/00, 1982,А 1: Я,М,Нчав В. РгоГес 1 че ас 1 оп оГ азсогЬ 1 с асй о ТЬе сох е оГ д 1 щегсап йо СЬаппа расЬпа. - СеоЬ 1 ов198 ц, ч11,6, р,248-250. Изобрете, ие относится ству и водной токсиколог быть использовано для во ния популяций планктонны в, отравленных пестици ности кормовых организмо х, как простейшие и Ц лью из.бретения явл эФФективности антив растворе хло 00 мг/л,Через 24 ч животных пер растворы аскор . новой кисл тарной кислоты и креэацина рацией 00"01-0005 м;/л, трис(2-оксиэил)амл;ний-оо сиацетат и,иэганоламин крезокс уксусной кислоты Ф 2(54) АНтИЛОт РЛЯ ГИДРОБИОНтОВ (57) Иэобретение относится к рыбоводству и водной токсикологии и может быть использовано для восстановления популяций планктонных гидробионтов отравленных пептицидами, Целью изобретения является повышение эФФективности антидотного действия на гидробионтов. В качестве антидста для гидробионтов применяют крезацин. 5 табл. -СН НХ(С 0 СН 0 Особей кон 1 рольнсй группы пересаживаютв чистую воду, Через 6 сут проводят подсчет живых организмов. Результаты экспериментов представлены в табл.1.Из табл,1 видно что по:ле воздействия хлороФоса на ракообразных и простейших и живых остается 62-70 л дафний и 40 у, особей спатидиума.В дальнейшем токсический эФФект пестицида продог;кает действовать и после удаления животных из раствора хлороФоса. Через 6 сут после начала опта в контроле в:ливых остаетсл 375 л ракообразных и 26,7,"; простейших от исходного количества.Гр."гпч гидробионтоепересаг нныев . фд с доб;,елением крГ.заци арез 6 сут не только пспностью сохра-НЯОТ Г ЕОЮ 1 ИСЛЕ 1 НГСТ ЬНО И ПРЕВЫшают се в суча с с да(1 ия 1 и на 100и более по сраьнению с аскорбиновойкислотой в слуас с простейшими розу ьтат нес ко ь ко иийе Одна ко мо нНО СЧ;татЬ,ГО В Р-;СтЯОРЕ КРЕзаЦИнапроисхолт 1 рактически полное восстан.аление нормального Функционироания популяций,В группах животных, 11 ересаженныхВ растворы известного антидгтэ аскорбиновой кислоты, численность особейостается почти на том же уровне, какойона была сразу после отравленияхлороФосом, т.е. полной ликвидациипоследствий воздействия токсикантаза 6 ут не прокзо"ло,Известный стимулятор ростаянтарная кислота не вызывающаяувелцения численности особей отравленной популяции, Их количество остается на уровне контроля или даже,снижается,Таким обрезом антидотное действие крезацина значительно превосходит действие аскорбиновой кислоты какдля ракообразных, так и для простейиих а также и янтарной для ракооб-,разных,П р и м е р 2, Аналогично примеру 1 на ракообразных и простейших(спатидиум трубач) воздействуютхлороФосом, а затем чыдерживают врастворах креэацина концентрацией0,00001, 0,00005, 0 С 001 иг/л длядафний и 0,00001 - 0,1 мг/л для простейших,Результаты экспериментов представлены в табл,2. Из табл,2 видно, что в воре, содержащей крезацин в количестве 0,00001, 0,00005 и О,С 001 мг/л, численность да,ний через 6 сут после начала экспериментов увеличивается на 25"35 ь по сравнению с началом опытов.В то же время в контрольной группе их количество снижается на 57,5 и составляет всего 12,5 от исходного. Таким образом, в воде, содержащей крезацин даже в таких низких количествах как 0,00001 мг/л, происходит ликвидации токсического действия хлороФос;, и даФнии восстананлиеаю 1 свою жи;-н деятельность. 1 од)1в Ртина наГл".Лается Рзксп:р,";с 11 х со сгатидиумом, Сразчпосл еозд : с; еи я пестицида в нивыхос 1 аютс 35-10. особей, Через 6 сутв котропой группе токсическое действие хлороФоса пгодолжа( т сказыват,ся и и у,иаых остается всего 231орган з 1 ое. В опытных группах пересаженных е воду содержащую резацин,последстсия зоздействля тонсисантауменьшены и позтсму через 6 сут численность особей почтл достигает исходной (в концентрации О,ОС 00 1 мг/л)ил превышает ее.Более сложное действие наблюдае гся в экспериментах с трубач-.м,Выдерживание животных в воде, содержащей хлорсхос приводит к гибели117-554 организмов. Через 6 сут токсическое последствие пестицида приводит к току, иго в живых из 60 особейостается только 7, т.е, 117. Вопытных группах животных, которыхпосле выдернивания в растворе. хлорофоса пересаживают в воду с крезациномразной концентрацией, численностьорганизмое на 6 сут после отравления остается на прежнем уровне илиповышается (до 130,81 от первоначального в воде содержащей 0,01 мг/лкрезацина).Таким образом, хлороФос вызываетсильные изменения в жизнедеятельноститрубача, которые приводят к практи"чески полному уничтожению поп.фляции,В контроле через 6 сут после отравления остается в живых только 1171популяции, что свидетельствует оневозможности восстановления ее численности, Действие крезацина нейтрализует токсический эФФект хлсэофосаи через 6 суг сохраняется не менее10 ь исходной численност, чтосви"детельствует о возможности восстановления популяции,П р и м е р 3. Аналогично примеру 2 простеиших (спатидиум и трубача) выдерживают в воде, сорержащей хлороФос в концентрации0,001 мг/л (данное количество токсиканта наиболее часто наблюдается вприродной воде в настоящее время).Результаты воздействия крезацинана простейших, выдержанных в Паст.ре хлороФоса гконцентрация0,001 мг/л) приведены в таблИз табл.3 видно, что крезацин,как и в предыдущих примерах, с.и"жас г тскс ическое дейс 1;",и;:с 1 и нида и спосоосгнует выживанию ногутции простсйОихТак, если в конгрольнх групг,ахчерез 6 с,т остае гся н живых 3 о,5 тособей спатидума и 143 с. трубачей,то в опытных группах, обрботанньх1(ре.ацинои, - 92-168,8, особей сгатидиума и 59-164,7/ трубачей,Таким образом, реэультать исследований показывают, цто крезацинявляется эффективны,л антидотнымсредством, оп гииальныии концентрациями для применения являются 0,0010,1 мг/л,При отравлении пестицидаии происходит угнетение активности фермента ацетилхолинэстеразы (АХЗ), которая является цунствительныи биохимицеским индикатором действия различных групп веществ, характеризующеефункциональное состояние нерв .ойсистемыП р и м е р 4. Поскольку н глаэмекрови рыб холинэстеразы либо носбееотсутствуют, либо имеют неэнацительную активность, определлют активностьАХЭ мозга, которал у рыб лвллетсясамой высокой среди поэноночньх животных,Результаты воздействия креэацинав концентрации 5 мг/л на АХЭ мозгарыб (карась) приведены н табл,4,Как видно из результатов исследований, крезацин повышает активностьацетилхолистиразь мозга рыб. Такииобразом, одним из механизмое антидотного действия креэацина является способность активизировать ЛХЭ, угнетенную пестицидами,П р и и е р 5, Одним из наиболеечувствительных и информативных методов оценки уровня свободнорадикальныхпроцессов, в том числе и при развитиихлор- и фосфорорганической пестицидной интоксикации, является хемигюлинесцентный анализ. В качестве методахемилтминесцентного анализа выбранарегистрация хемилюиинесценции сыворотки кролл в системе лючинол-НО,Регистрацию хемилюиинисценции сыворотки крстви леща в системе люминол - НО проводят, используя в качестве детектора АЗУ/, помещенный в снетоиэслиронанную к;меру сост,;ен -но конс рукцииобеспечив;. щую постоянное перемешивание обр,.ац с иэм.рительнои кювете и доэнронаниерасгнора НО в кюгету с,1 ситщью автоматического доэатора. Выходной сигнал ФЭУ подают на сход н,клеарногоанализатора ЛСс выводом на циГр-,гое табло, В измерительную канету внося 3 мл 5 мкл раствора люиннола в 01 М трис-НС 1 буферерН 6,8 100 мкл сыворотки, Одновременно с включением счетчика импульсон в нюнегу с помощью автоматицеского дозатора впрыскивают 500 мкл350 мМ раствора НО, Регистрациюхемилюмине ценции проводят а течение 3 иин.20 Результаты измерения . ветс суммыхеиилюминесценции сызорогки кронилеща в норме (контроль) при воздействии хлорофосом, хлорогос аскорбиновая кислота хлорофос + кр:зацин,25 приведены н табл,5,Иэ результатов исследований видно,цто под воздействием хлоро,зоса происходит значительное повьщ.ание снетосуммы хеиилюиинесценции, а следовательно, и свободнорадикальныхокислительных процессов. Ргтбаслениеаскорбиновой кислоты (известногоантиоксиданта) снижает активностьокислительных процессов в 3,"с раза.Крезацин более интенсивно воздействует на свободнорадикальные реакции, и величина снетосумиы хечолюминесценции практически не отлицаетсяот контрольной (Р ( 0,05)40 такии образом, установлено, чтокреэацин обладает высокой антиоксидантной активностью, Эта активностьявляется одним иэ механизмов антидотного действия креэацина.45 Антидотное действие крезацина значитель о превосходит действие аскорбиновой кислоты и позволяет полностью восст;нонить жизнедеятельностьпопуллции планктонных гидробионтовогравленных пестицидами,формула и зоб ретенияПрименение крезацина в качествеанг 1 дота длл гидробионтон,(без антидота) Количество (лиаьх нс сле Вь 1 дер)нилания в растворе х/,орс 3 оса В от началаопцта Ракообразнце /даФнии) 52 65Простейшие (спатидиуи) Количество живых лосле вылер т званиирастворе хлороФоса 0,01 нг/л Табли цаКоличество Вивьособей через6 суток1706496 Брг/)6.3 жене табл. 2 Колнчестт о ннанхчерез 6 сут. КоличеГяо нненхлопе ьнднрннеачнд В рас 1 арре Коллчестлоосгбер е Кон тентракнаантндота, нг/л начале омыта, вт,у, /торсс"оса 0,0 мг/л тат,Спа терн ум 1522201923 4045,53536,839,1 6 10 7 7 9(олицество живых поКоличествоособей в Количество живыхчерез 6 сут,сле вы/)ерживания в растворе хлороФоса начале опы.та, шт,ат. щт. Спати/1 иум 1 123 14 11 131706496 Таблиц;Прсдслжительность Активность ацетилхолинэстеразы Крезацин Контроль 282,03+/13,5" 302,4 Ь /-21, 13 318,86+/-16, 16 г а а 1 аблица 5 КритерийСтьюдента,достоверностьразности с контролем, Р Светосумма хемолюминесценции,имп./3 мин Соединение 1078+/24529936+/ 1828 15,64 10,88 с 0,05 7521+/г 539 2150+/г"78 С.О, 05 )0,05 2,00 Редактор О.Голояаца ивагеге вавегаееееге г е ва ееа г аг 1 Заказ 213 Тираж Подпис нсе ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССГ 113035, Москва Ж, Раущская на 5. д. /5