Способ определения карбарила

ОП ИСАЙИ ЕИЗОБРЕТЕН ИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз СоветскихСоциалистическихРеспублик 11958963пе делам нзобретеннй и еткрмтий(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КАРБАРИЛ Предлагаемое изобретение относится к определению пестицидов и может быть использовано в комбикормовой промышленности и других отраслях промышленности, где необходимо определять наличие содержания карбарила (севина) в продуктах, 5-нафтил-метилкарбамит (карбарил, севин) относится к ариловым эфирам М-метилкарбаминовой кислоты.Для обнаружения остатков карбарила в растительных тканях, фруктах, компотах, маринадах, мясе, органах животных и птицы известны колориметрические методы. Они основаны на гидролизе карбарила щелочью с последующим сочетанием продуктов гидролиза с диазотированным паранитроанилином или диобозензосульфокислотой 1). 1Недостатками колориметрических методов при анализе кормов и комбикормовых смесей является неполная очистка экстрактов от жира, восков и других коэкстрактивных веществ, а также их низкая чувствительность (0,1 - 0,6 мг/кг).Известен способ определенная карбарила в биологических субстратах с помощью метода тонкослойной хроматографии (ТСХ), который основан иа экстрагировании препарата из анализируемого объекта н-гексаном (или хлороформом), упаривании и очистке водометаполных экстрактов петролейным эфиром, хроматографировании на пластинах силуфол, гидролизе карбарила спиртовым раствором щелочи до 1 нафтола с образованием окрашенного соединения с солью диазония - прочный синий Б или прочный красный ГГ. При использовании этого способа из проб можно экстрагировать в среднем 75% содержащегося в тканях карбарила и определять пестицид в количествах 0,01 - 0,001 мг/кг 2).Недостатком известного способа при анализе комбикормов является неполная очисткка экстрактов от примесей, так как на хроматограммах не достигается разделения карбарила от выков, жиров и пигментов. На пластинке наряду с пятнами карбарила образуются пятна оранжевого цвета, которые накладываются и маскируют исследуемое вещество. Цель изобретения - повышение полноты определения карбарила, упрощение процесса проведения анализа и его удешевление..мг/кг Определено мг/кг 2,50 2,50 10 О,О Кукуруза 0,46 и 0,50 92,0 104,0 0,52 0,50 3Поставленная цель достигается тем, что экстрагирование карбарила проводят экспозицией в холодильнике в течение.15 - 16 ч, очистку экстракта от сопутствующих примесей осуществляют в 30 - 40%-ном этиловом спирте с последующим вымораживанием, а гйдролиз осуществляют одновременно с проявлением, причем в качестве проявляющей смеси используют 0,08 - 0,1/,-ный раствор соли прочный гранатовый в ацетоне с 1 н водным едким натрием в соотношении 1,1 - 1,3.Пример 1, Навеску корма (сырье или комбикорм) массой 10 г заливают 40 мл гексана и оставляют на ночь в холодильнике (16 - 15 ч), затем 1 ч экстрагируют на аппарате для встряхивания, Экстракт фильтруют в выпарительную чашку, промывая содержимое колбы 2 раза н-гексаном порциями по 20 мл. Фильтр смывают н-гексаном 2 раза по 15 мл. Экстракт в чашке упаривают досуха в вытяжном шкафу при комнатной температуре или используют ротационный испаритель. Для извлечения карбарила и очистки от примесей к сухому остатку приливают 5 мл 40%-ного этилового спирта и тщательно растирают остаток стеклянной палочкой. Затем чашку помещают на 30 мцн в морозильную камеру холодильника, после чего ее содержимое фильтруют через делительную воронку, Операцию извлечения.и вымораживания повторяют 3 раза. Из водно-спиртовой смеси карбарил трижды экстрагируют хлороформом порциями по 30 мл, каждый раз интенсивно встряхивая делительную воронку 1 мин.Для того, чтобы избежать образования эмульсии при взбалтывании водно-спиртового раствора с хлороформом, в делительную воронку добавляют 10 мл насыщенного раствора хлористого натрия. После отстаивания нижний хлороформный слой сливают в выпаривательную чашку через фильтр с безводным сульфатом натрия. Экстракт упаривают досуха при комнатной температуре под тягой. Сухой остаток растворяют в охлажденном ацетоне (хранится в морозильной камере)тщательно обмазывают стенки чашки покачиванием и количественно переносят на хроматографическую. пластинку. Остаток экстракта в чашке смывают не менее 5 раз.Пластинку с нанесенными растворами помещают в хроматографическую камеру, вкоторую за 60 мин до операции наливаютподвижный растворитель.В качестве подвижной фазы используютсистемы растворителей: для сырья - гексан - ацетон или гексан - этилацетат всоотношении 3:1, для комбикорма - гексан -ацетон - уксусная кислота в соотношении70:30:1, После того, как растворитель под 10 нимется на высоту 10 см, пластину вынимают из. камеры и высушивают на воздухе.Для проявления карбарила пластинку опрыскивают из пульверизатора смесью 0,10/О-ного раствора прочного гранатового и 1 н раствора едкого натрия в соотношении 1:1, выдерживают в сушильном шкафу при температуре около 100 С 3 - 5 мин. Гидролиз осуществляют одновременно с проявлениемпластин, При необходимости хроматограммуобрабатывают проявляющим реактивом вто 2 о рой раз,Г 1 ри наличии карбарила в пробе на пластинке появляются фиолетово-сиреневые пятна, на кремовом фоне, в зависимости отприменяемого подвижного растворителя,колеблется в пределах 0,24 - 0,38, Окраскапятен стабильная и не теряет интенсивности в течение нескольких часов. Количесгвенное определение проводят путем измеренияплощадей пятен пробы и стандартов, учитывая визуально интенсивность их окрасок.зв Содержание пестицида вычисляется по формулеА ггде Х - содержание карбарнла в анализируемой пробе, мг/кг;А - количество препарата в стандарте,35 мкг;В - навеска пробы, г;Я 1 - площадь пятна стандарта, мм.Чувствительность способа - 0,001 мг/кгкорма.Для оценки способа проводят анализ поопределению внесенных количеств карбарила в навески кукурузы, хлопкового шрота икомбикорма.Результаты определения карбарила всырье и комбикормах приведены в табл. 1.Таблица 1мг/кг 0,50 0,50 0,30 0,30 0,30 0,30 0,30 100,0 0,20 0,20 0,20 100,0 0,20 0,20 0,20 1,00 1,00 0,50 0,45 0,50 90,0 0,30 0,30 0,30 0,27 90,0 0,30 0,30 Хлопковый шрот Комбикорм ПК 3-193-1467 Комбикорм ПК 12 ВРЖ200-1648 6Продолжение табл. 1 Определено 0,53 106,00,43 86,00,26 86,00,26. 86,00,26 86,0Не обнаруженоИ ф = 92,542,70,28 93 30,26 86,7 0,18 90,0 0,20 100,00,85 85,0 0,85 85,0 Не обнаруженои + = 92,5+3,3 0,47 94,0 0,28 93,3 0,27 90,0 Не обнаружено 0,26 86,7 0,27 90,0Определено мг/кг 0,19 95,0 0,20 0,18 90,0 0,20 0,86 86,0 1,00 1,00 90,0 090 Не обнаруженоМ + = 90,5+0,8 матограммы определения карбарила в сырье и комбикормах.Сравнительная характеристика методов определения карбарила тонкоелойной хроматографией приведена в табл. 2. Таблица 2 Усовершенствованный методдля сырья и комбикормов Метод О,А. Малинина длябиологических субстратов Этапы работы 2-20 10 Навеска, г Гексаном, хлороформом 2-3 ч Гексаном, настаивают при перемешивании 15-16 ч (на ночь) в холодильнике, затем 1 ч - навстряхивателе. Экстракция Очистка, переэкстракция Метанолом, петролейнымэфиром, хлороформом. Остаток перед хроматографированием растворяют в гексане или метаноле,Применяемыепластины Силуфол Гексан ацетон (3:1) Силуфол Подвижная фаза Результат анализа показывает, что полнота определения карбарила в комбикормах предлагаемым способом - 90,5+ 0,8, хлопковом шроте - 92.5+3,3, кукурузе - 92,5+2,7. Для наглядной иллюстрации приводятся хро 40-ным этанолом, хлороформом, вымораживание в морозильной камере. Остатокперед хроматографированиемрастворяют в охлажденномацетоне. Для сырья; гексан-ацетон или гексан-этилацетат (3:1), для комбикормов; гексан-ацетон- -уксусная кислота (70;30:1)958963 10 Продолжение табл. 2 Усовершенствованный методдля сырья и комбикормов Метод О.А. Малинина длябиологических субстратов Зтапы работы а) 15/-ный р-р КОН в60/-ном спирте;б) 0,2 р-р соли прочныйсиний (или прочный крас.ный), Сначала опрыскиваютпервым реактивом (гидролиз), затем после высушивания - вторым (проявление),Проявитель гидролиз с проявлением. 1 очность определения 901 75 ролиз осуществляют одновременно с проявлением, причем в качестве проявляющей смеси используют 0,08 - 0,1/,-ный раствор соли прочный гранатовый в ацетоне с 1 М-водным едким натром в соотношении 1:1 - 1:3. Источники информации,принятые во внимание при экспертизе 1. Фузкельман Л. М., Вопросы питания, Мй 2, 1963.2. Малинин О. П. Методическое указание по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде, ч. И 11 с. 190 в 1, 1977. Составитель Н. Валеева Редактор С. Запесочный ТехредА. Бойкас Корректор А. Дзятко Заказ 6774/60 Тираж 887 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж - 35, Раушская наб., д. 45 Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул, Проектная, 4формула изобретения25Способ определения карбарила, включающий экстрагирование и очистку экстракта, хроматографирование на стандартных пластинах, силуфол в тонком слое силикагеля, гидролиз и проявление пятен, отличающийся тем, что, с целью повышения полноты 30 определения карбарила и упрощения процесса проведения анализа, экстрагирование карбарила проводят экспозицией в холодильнике в течение 15 - 16 ч, очистку экстракта осуществляют 30 - 40/,-ным этиловым спиртом с последующим вымораживанием, а гида) 0,1-ный прочный гранатовый ГБЦ в ацетоне;б) 1 н-водный аОН. Перед употреблением смешивают в соотношении 1:1. Совместители