Способ диагностики наследственного сфероцитоза

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИРЕСПУБЛИК 1 О О 1 И 33/68 САНИ ЕТЕНИ скин инсти вания кро.Ш. Эрадзекарев Гемолити а, 1975,НАСЛЕДСТВ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИИ К А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬС(57) Изобретение относится к гематологии, Цель изобретения - повышение точности способа. Проводят пробы на наличие наследственного сфероцитозаФ Фи затем определяют (11 а +К ) АТФ-аэную активность и липидный состав мемФ бран эритроцитов. При повышении (Иа ФК ) АТФ-азной активности мембран эритроцитов и увеличении липидной фракции в зоне свободных жирных кислот в сочетании с отрицательными другими пробами на наследственный сфероцитоэ диагностируют латентную форму этого заболевания, Способ обеспечивает проведение медико-генетических консультаций.13230 35 55 Изобретение относится к медицинеи касается способа диагностики наследственного сфероцитоза,Целью изобретения является повышение точности способа эа счет выявления .патентной формы заболевания,Способ осуществляется следующимобразом.У лиц с подозрением на наследственный сфероцитоэ берут кровь иэ 10пальца и проверяют на начилие микросфероцитоза, уменьшенного диаметраи пониженной осмотической реэистентности эритроцитов и повышенного числаретикулоцитов. Параллельно из вены 5берут кровь в объеме 15 мл, выделяютмембраны эритроцитов по методу Вг 1 п 1 с+шап, определяют (Ма +К ) АТФ-азнуюактивность, белок по 1.оцгу, фосфорпо Р 1 яКе, фракционный состав липидовпо Шталь.При наличии микросфероцитоэа,уменьшенного диаметра и пониженнойосмотической резистентности эритроци 25тов и повышенного числа ретикулоцитовс одновременным повьппением (Ха+К )АТФ-азной активности мембран зритроцитов и визуально определяемым увеличенйем липидной фракции в зоне свободных жирных кислот подтверждают диагноз наследственного сфероцитоза. Ес+ фли повьппение (Иа +К ) АТФ-азной активности мембран эритроцитов и увеличение липидной фракции в зоне свободных жирных кислот сочетается сотсутствием микросфероцитоза, уменьшением диаметра и пониженной осмотической реэистентности эритроцитови повышенным числом ретикулоцитов,ставят диагноз латентной формы наследственного сфероцитоза.П р и м е р 1. Больной 30 летпоступил в клинику с диагнозом наследственный сфероцитоз. Жалобы наобщую слабость, чувство тяжести в 45левом подреберье, субфебрильную температуру. Болеет с детства.Объективно: кожа и видимые слизистые желтушны, селезенка выступаетиэ подреберья на 7 см,плотной консистенции, проекция желчного пузыря болезненна. Анализ крови НЬ 94 г/л; эр, 2,8"10 /л; цветной показатель 1; СОЭ4 мм; лейк. 5,0 10 /л; тромб, 477.;ретик. 787; базофильная сетчатостьв толстой капле ; средний диаметрэритроцитов 7,0 мкм; осмотическая ре 83 2эистентность эритроцитов 0,56-0,327 ЯаС 1. Отмечается умеренный анизоцитоэ эритроцитов за счет насыщенных микро- и не большого количества макроцитов, небольшая полихромаэия, встречаются овалоциты 5-8 в поле зрения, а также единичные слезовидные, Лейкоцитарная формула,7: пал.6,0; сегм. 50,0; мон. 5,0; эоз. 1,0; лимф, 38,0.Функциональные пробы печени: общий билирубин 46,5 мк мол/л, прямой 7,2 мк мол/л, свободный 39,3 мк мол/л, тимоловая проба 9,0, общий белок 7,2 г/л.При специальном исследовании мембран зритроцитов обнаружено, что(Иа +К ) АТФ-аэная активность составляет 2,2 мМ/мг бч., липидная фракция в зоне свободных жирных кислоты визуально увеличена.Больному произведена спленэктомия и холецистэктомия.Анализ крови после операции: Нв 120,0 г/л; эр, 4,2 10 /л", цветной показатель 0,91; морфология эритроцитов не изменилась, но появились эритроциты с тельцем Жолли.На основании указанных исследований мембран эритроцитов подтвержден диагноз наследственного сфероцитоза.П р и м е р 2, Больной Б6 лет поступил в клинику с диагнозом врожденная гемолитическая анемия (предполагается микросфероцитоэ). Жалобы на общую слабость, высокую температуру, сонливость и беспокойность. Ребенок болеет с годовалого возраста.Объективно: выраженная желтушность кожных прокровов и видимых слизистых, на губах герпесная Сыпь, селезенка выступает из подреберья на 7 см, печень - на 6 см. Анализ крови: НЬ 90,0 г/л; эр, 2,8 О /л, цветной показатель 0,93;сСОЭ 22 мм; лейк. 6,8 10 /л; тромб, 230,4 10 /л; ретик, 1107 ;баэофиль 9ная сетчатость в толстой капле ; средний диаметр эритроцитов 7,0 мкм, осмотическая резистентность 0,56- 0,32 ИаС 1. Отмечается выраженный анизоцитоз за счет микро- и макроцитов, небольшой пойкилоцитоз, часть эритроцитов гипохромна, часть полихроматофильна, встречаются овалоциты (20- 25 в поле зрения), в том числе узкозлипсоидные, единичные слеэовидные. Лекйкоцитарная формула, Е: пал. 11,0;3 1323сегм, 38,0; мон. 3,0; эоз. 6,0; лимф.42,0,При цитологическом изучении мазкапериферической крови эритроциты, содержащие Нв 107 . При инкубации крови 5с бриллиантовым крезиловым синим красителем внутриэритроцитарные включениянестабильного гемоглобина не обнаружены.Функциональные пробы печени: общий Обилирубин за счет непрямой реакции25,2 мк мол/л; тимоловая проба 6;реакция сулемы 927.Моча и кал без изменения.По показателям микроцитоза, малого диаметра и пониженной резистентности эритроцитов подозревается наследственный сфероцитоз. В результатеспециальных исследований мембран эритроцитов оказалось, что (Иа +К 20АТФ-азная активность снижена(0,39 мМ/мг,б.ч.), липидная фракцияв зоне свободных жирных кислот визуально не увеличена, в связи с чемдиагноз наследственного сфероцитоза 25исключен.Проведено лечение переливаниемкрови, витаминами ВВ , фолиевойкислотой.Больной переведен в хирургическое 30отделение, где была произведенаспленэктомия. Больной выписан с диагнозом: несфероцитарная гемолитическая анемия,П р и м е р 3. Больной В. 60 лет.Субъективно; жалоб нет.Объективно: больной правильноготелосложения, подкожная жировая клетчатка развита слабо, печень и селезенка не увеличены, 40Анализ крови: Нв 155 г/л; эр.24,9 10 /л, цветной показатель 0,95;СОЭ 5 мм; лейк. 5, 10 /л; тромб,547; ретик. 57, , базофильная сетчатость в толстой капле +. Отмечается 45небольшой анизоцитоз за счет единичных микро- и макроцитов. Лейкоцитарная формула,3; пал. 2,5; сегм. 59,5;мон. 3,5; эоз. 2,0; баз. 1,0; лимф. По всем показателям больной признан практически здоровым. Однако в связи с тем, что у его детей имеется точно установлелпый наследственный сфероцитоз, были проведены специальные исследования мембран эритроцитов. Оказалось, что (Иа +К ) АТФ-азная активность мембран повышена и состав 083 4ляет 2,2 мМ/мг.б.ч. Липидные фракциив зоне свободных жирных кислот визуально увеличены.В результате исследований больному поставлен диагноз латентной формынаследственного сфероцитоза.П р и м е. р 4. Больной Г. 8 летпоступил в детское отделение в состоянии криза с жалобами на общуюслабость, желтушность,Объективно: обращает на себя внимание желтушность кожных покровови видимых слизистых.Анализ крови: Нв 93,0 г/л; эр,г2,1 1 О /л; цветной показатель 1,0,ретик, 2707 . Отмечается склонность эритроцитов к мароцитозу, умереннаяполихромазия. Предполагаемый диагноз: наследственный сфероцитоз, Проведено определение формы, диаметра и резистентности эритроцитов. Оказалось, что микросфероцитоз эритроцитов отсутствует,диаметр 7,5 мкм, резистентность 0,480,28. При проведении дополнительногоспециального изучения мембран эритро+ Фцитов оказалось, что (Иа +К ) АТФ-азная активность в пределах нормы, липидные фракции в зоне свободных жирных кислот визуально не увеличены.Диагноз наследственного сфероцитозаие подтвержден резуль тами исследований,Больному проведено исследованиеактивности фермента глюкозо-фосфатдегидрогеназы (Г-ФД), при этом оказалось, что активность ферментаГ-ФД составила 0 мз/гр Нв. На основании этих данных поставлен диагноз: наследственная гемолитическая анемия, обусловленная дефицитом фермента Г-ФД,Анализ крови: Нв 103 г/л; эр,4)1 1 О /л.Больной выписан в удовлетворительном состоянии.Способ испытан в лабораториях биохимии, а также наследственных и приобретенных анемий на клинических иамбулаторных больных НИИ гематологиии переливания крови,Способ обеспечивает 1007-ную точность диагностики заболевания, включая латентные формы, что позволяетсвоевременно провести целанаправленное лечение, а также дает воэможностьправильно прогнозировать заболецания1323083 в потомстве и проводить медико-генетическое консультирование. Ф о р м у л а изобретения Составитель Е. ЯрныхТехред Л.Олийныс Корректор А. Зимокосов Редактор М. Циткина4 Заказ 2890/5 Тираж 595 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул, Проектная, 4 Способ диагностики наследственного сфероцитоза путем определения формы, диаметра, осмотической реэистентности эритроцитов и количества ретикулоцитов, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности способа за счет выявления латентной формы заболевания, дополнительно опреде 4 Фляют (На +К ) АФТ-аэную активность и липидный состав мембран эритроцитов и при отсутствии уменьшения диаметра и снижения осмотической реэистентности эритроцитов на фоне увеличения количества ретикулоцитов в сочетании с повышением (йа +К ) АФТ- азной активности и увеличения липид ной фракции в зоне свободных жирныхкислот относительно нормы диагностируют латентную форму заболевания.